收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

RhD阴性孕妇的RH基因型及其与抗D抗体产生关系的研究

朱伟彦  
【摘要】:新生儿溶血病(HDN)主要由于母婴血型不合引起,Rh HDN主要发生在母亲是RhD阴性胎儿是RhD阳性,由RhD血型不合引起的HDN。所以在RhD阴性孕妇妊娠期间确定胎儿的RhD血型对于预防、诊断Rh HDN有重要意义。现在已经可以在产前通过羊水或孕妇外周血用PCR的方法检测胎儿RhD基因进而推断RhD血型。这就要求RhD基因型与表型之间高度的一致性或者比较固定的联系可以进行相互的推断。但我国RhD阴性人的D外显子呈现多态性,建立在高加索人基础之上的RhD基因定性方法并不能直接应用。同时在临床输血中,RhD血清学阴性者接受RhD阳性血液后发生同种免疫仅占50%-75%,并且RhD阴性孕妇产生HDN仅占5%-7%,说明并非所有的RHD阴性人都会产生同种免疫。因此本研究旨在一方面探索RHD基因型与表型之间的关系,从而在产前诊断中能够从一定程度上从胎儿基因型推测表型;另一方面分析RHD阴性孕妇基因型与其是否产生抗D抗体的关系,从而为临床预测和预防新生儿溶血病提供理论指导。 第一节RhD阴性孕妇表型与基因型的关系 目的:观察中原地区RhD阴性孕妇的表型、基因型,以期找出基因型与表型之间的关系,为检测胎儿RhD基因推断RhD表型提供理论基础,对临床RhD HDN的诊断、预防极有意义。 方法:用血凝试验筛选出70例RhD阴性孕妇并检测RhC/E抗原表型;用间接抗球蛋白法(IAT)、吸收放散试验进一步检测D抗原表型及分类;采用聚合酶链反应-序列特异性引物扩增(PCR-SSP)技术,检测70例样本的基因型,比较分析基因型与表型之间的关系。 结果:①用血凝试验测得70例RhD阴性孕妇中,C、c、E、e抗原的表型频率分别为25.71%、74.29%、7.14%和92.86%;用IAT法及吸收放散试验测得血凝试验判断为D阴性的70例孕妇中,54例为真实阴性,无弱阳性,16例为Del型;②RHC/E基因的基因型与其血清表型完全一致。带有C抗原的D阴性个体的RHD基因结构具有多态性。检测70例RhD血清学阴性个体中,C/E基因型为CC或Cc有28例,其中不缺失RHD基因外显子者为8例,部分缺失者为4例,完全缺失者为16例;不具有C抗原的D阴性个体(表现型为ccee、ccEe或ccEE)均为完全缺失RHD基因。③16例Del型中15例不缺失RHD外显子型,仅1例为部分缺失RHD基因外显子。 结论:①RHC/E基因型与其表型完全一致,可根据其表型判断其基因型。因此在产前诊断中可根据胎儿RHC/E基因型推断其C/E表型。②RhD阴性者具有C抗原者其基因型具有多态性,基因结构可分为不缺失、部分缺失、完全缺失三种,不具C抗原者基因结构为完全缺失型。因此在产前诊断中若胎儿RHD基因不缺失,并不能推断其为RhD阳性。③Del型几乎全部为不缺失型。 第二节RhD阴性孕妇的RH基因型与抗D抗体产生关系的研究 目的:筛检抗D抗体阳性的RhD阴性孕妇血液样本,分析流产史、生育史对抗-D产生的影响;分析其基因型、表型,以期找出RhD阴性孕妇产生抗体的规律,并从基因型或者表型初步评估产生抗D抗体的可能性。 方法:用微柱凝胶不规则抗体筛检卡及孕妇抗体效价测定卡进行抗-D筛选和抗-D效价测定;同时对于孕妇的流产史及生育史进行统计分类,研究流产史、生育史对抗-D产生及其效价高低的影响。用间接抗人球蛋白试验及吸收放散试验进行进一步RhD抗原分类;用血凝试验进行C/E血清型检测;采用PCR-SSP技术对抗-D阳性的样本进行基因型检测; 结果:①用微柱凝胶不规则抗体筛检卡及孕妇抗体效价测定卡筛选出RhD(-)孕妇抗-D阳性者共35例,其中6例效价大于等于512,3例256,8例128,6例64,4例32,5例为16,3例8。产生抗体者均是有过流产或者生育的,流产生育次数越多产生抗体的几率越大,效价越高;同时有生育史者比有流产史者有更大可能性产生抗体。流产史、生育史与抗-D的产生及抗-D效价的高低密切相关,相对于流产史,生育史影响更强;②吸收放散试验测得35例标本全部为真实阴性,无1例为Del型;③血凝试验测得35例抗-D阳性孕妇的RhC/E表型主要为ccee;④PCR-SSP测得35例抗-D阳性孕妇无一例不缺失RHD基因外显子; 结论:①流产史、生育史与抗D的产生及效价的高低成正相关,同时相对于流产史来说,生育史对抗D的产生有更强的相关性。②结合血清学及基因结构检测结果可知,产生抗体的RhD(-)孕妇C/E血清型主要为ccee者,其基因型为完全缺失RHD基因外显子;少数部分缺失者也能产生抗体,但不缺失型则不太可能产生抗-D。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 黎劲,覃玉荣,韦柳红;自体输血在RhD阴性患者手术中的应用[J];淮海医药;2004年06期
2 周小玉,王燕,汪承亚,陈慧萍;贮存式自体输血在RhD阴性孕妇分娩中的应用[J];临床输血与检验;2004年04期
3 宋海燕,李振才,高霞;自异体输血在RhD阴性患者肝移植术中应用1例[J];临床输血与检验;2004年03期
4 王民权,陈月,邱淑业;Rh阴性患者产生抗-C、抗-e1例[J];中国输血杂志;2001年03期
5 冯双利,卢志芬;30名RhD阴性无关供血者的Del分析[J];临床输血与检验;2001年02期
6 刘海丹,周宜开,张广森,史娟,陈凤英,严尽力,李双;73例RHD阴性献血者RH表型及RHD基因型的研究[J];实用预防医学;2002年02期
7 呼志西,石延设,赵娜,李琴,石玉梅;陕北地区RhD阴性调查[J];中国输血杂志;2004年06期
8 许德义,赵宁江,杜勇,陆会芳,陈伟岳,董国飞,汤晓娴,付荆艳,陈长水;红细胞的低温冷冻保存及临床意义[J];临床输血与检验;2004年03期
9 张志梅,兰炯采;RhD阴性、D~u、Del的检定及临床意义[J];中国免疫学杂志;2001年06期
10 曹晓莉;刘丽中;赵敏;;冰冻红细胞制备及洗涤过程中应注意的几个问题[J];西北药学杂志;2005年06期
11 孙业富;夏爱萍;范恩勇;;扬州市RhD阴性无偿献血者抗原分布及不规则抗体调查[J];临床输血与检验;2011年01期
12 朱晓霞;;贮存式自体输血在RhD阴性患者手术中的应用[J];现代中西医结合杂志;2006年15期
13 宫伟;邱艳;高国静;;RhD阴性无偿献血者队伍的建立和管理[J];临床输血与检验;2006年04期
14 孙伟生;;对13例RhD阴性患者手术行预存式自体输血分析[J];江西医药;2007年01期
15 杨珊;罗志;;柳州市RhD阴性无偿献血者库建设现状及临床应用调查[J];中国输血杂志;2009年11期
16 陈静,刘敏;泸州地区为RhD阴性公民办理“稀有血型证”及建个人档案库的调查[J];四川省卫生管理干部学院学报;2002年03期
17 范亮峰;向东;王健莲;沈伟;刘曦;陆琼;蔡晓红;金沙;;抗G抗体引起新生儿溶血病1例[J];临床输血与检验;2010年01期
18 蔡雪娇;杨慧敏;谢作听;;预存式自体输血在26名RhD阴性孕妇中的应用[J];中国输血杂志;2009年08期
19 刘嫦瑛;谢波;陈春平;严娜;刘亚军;;咸阳市RhD阴性献血者的筛查与管理[J];中国输血杂志;2007年03期
20 林宝莲;;台州市RhD阴性血液的临床供应[J];临床血液学杂志(输血与检验版);2009年06期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 周其富;俞渭生;单立新;张源;楼静芝;;回收式自体血回输在RhD阴性患者手术中的应用[A];2007年浙江省麻醉学学术年会论文汇编[C];2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978