硼替佐米对人肺腺癌细胞增殖、凋亡及黏附能力的影响

【摘要】：背景和目的 肺癌在世界范围内发病率和致死率都很高,它也是导致相关癌症死亡的首要病因。非小细胞肺癌(NSCLC)的发病率占整个肺癌发病率的85%,而且NSCLC易发生局部和远处的转移。随着新的化疗药物和治疗方案的改进,肺癌患者的疗效已经取得了很大的进步,但是中位生存期仍然不理想。硼替佐米是一种蛋白酶体抑制剂,可以高选择地抑制26S蛋白酶体,在治疗多发性骨髓瘤显示出很好的疗效,目前,也有多项临床研究证实了硼替佐米单药或与化疗药物联合对NSCLC有效,但其作用机制尚不清楚。为此,本研究探讨硼替佐米对人肺腺癌细胞增殖、凋亡、粘附能力的影响,及其可能作用机制。 方法 用MTT检测不同浓度梯度(12.5～200 nmol/L)的硼替佐米对95D、A549、H520、973、H1299和GLC-82等6种人肺腺癌细胞系分别作用48小时和72小时后的增殖抑制作用。25nmol/L的硼替佐米作用48小时后,用倒置显微镜观察细胞形态的变化;用流式细胞仪分析细胞周期的改变及其凋亡;提取加药和未加药6个细胞的总蛋白,用Western blot杂交检测EGFR,E-cadherin,β-catenin和NF-κB蛋白表达水平。 结果 在不同浓度的硼替佐米作用48小时后,6种人肺腺癌细胞系的IC50值介于26～369 nmol/L之间,其中95D对硼替佐米的抑制作用最敏感,而GLC-82最不敏感。然而,在硼替佐米的作用时间延长至72小时后,6种细胞系的IC50值已非常接近,IC50值介于14～40 nmol/L。在25nmol/L硼替佐米作用于6种人肺腺癌细胞系48小时后,可见细胞形态发生变化,细胞变圆、细胞间隙变大,并可见裂解的细胞碎片;流式细胞技术检测发现硼替佐米引起G_0/G_1期和S期细胞比例减少,G_2/M期细胞比例升高,同时还观测到95D出现明显的凋亡峰,其次为H520、973和GLC-82;同时硼替佐米可以下调EGFR和NF-κB的表达。但对E-cadherin和β-catenin分子的影响在不同的细胞系中存在差异。 结论 1.硼替佐米对6个肺腺癌细胞系有抑制作用,随浓度和作用时间的增加,抑制作用增强。 2.硼替佐米作用使肺腺癌细胞系阻滞在G_2/M期,并诱导了细胞的凋亡。 3.硼替佐米下调NF-κB和EGFR有可能为其诱导凋亡的机制。 4.硼替佐米对E-cadherin和β-catenin分子的影响在不同的细胞系中存在差异。有可能会增加某些肺腺癌的粘附能力,降低癌细胞的远处转移。