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洛阳地区规模化鸡场隐孢子虫流行病学调查及PCR检测

代娟  
【摘要】:隐孢子虫病是一种以腹泻为主要症状的人畜共患病,隐孢子虫宿主范围广泛,可寄生于包括人在内的240余种动物,严重威胁着人和动物的健康。禽类隐孢子虫病是家禽及鸟类最常见的寄生虫病之一,现已报道至少有30种禽类可感染隐孢子虫,主要引起消化道和呼吸道症状;也可通过水源导致人畜患病,是一个严重的公共卫生问题。本试验对洛阳地区规模化鸡场隐孢子虫病流行情况进行了调查,通过对分离到的隐孢子虫从形态学、人工感染试验、卵囊排出规律、18S rRNA序列分析,鉴定出洛阳地区鸡源隐孢子虫的流行种类,确定了该地区鸡源隐孢子虫分离株及与其它种类隐孢子虫之间的分子种系相似性,为预防和治疗人兽共患隐孢子虫病提供了科学依据。 为了掌握洛阳地区鸡隐孢子虫病的流行状况,自2011年5月~2012年4月,利用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法对8个规模化鸡场采集的359份粪样进行了隐孢子虫卵囊检查。检查结果显示:洛阳地区鸡场隐孢子虫感染总阳性率为15%(54/359),主要集中在50日龄以下的雏鸡。发现2种不同形态的卵囊,初步鉴定为贝氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫。 为了进一步验证隐孢子虫的虫种,对3日龄雏鸡嗉囊接种,进行人工感染试验,观察其排卵囊规律和临床表现。试验结果显示:潜隐期为4天,高峰期出现在感染后第8天,高峰期持续时间为8~15天。对病鸡隐孢子虫主要寄生部位进行黏膜涂片和改良抗酸染色以及对组织进行石蜡切片H.E染色,结果仅在气管和法氏囊部位发现卵囊,为贝氏隐孢子虫常寄生部位。 对本次分离到的2个鸡源隐孢子虫分离株,采用常规PCR方法基于18SrRNA基因位点进行扩增,扩增片段经测序和序列比对,进行进化发育分析,鉴定其种类。结果显示:从洛阳地区分离到的2个隐孢子虫分离株和贝氏隐孢子虫在同一进化分枝上,亲缘性较近,为同一虫种,同源性为100%,确定洛阳地区鸡源隐孢子虫分离株为贝氏隐孢子虫。本次研究结果表明,洛阳地区鸡已存在隐孢子虫病,为规模化鸡场对本地区公共卫生健康的风险性评估提供了数据和科学依据,为动物及人隐孢子虫病的防治奠定了良好基础。


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