收藏本站
收藏 | 论文排版

枯草芽孢杆菌B-903菌株的发酵条件及所产抗生素的研究

王瑞霞  
【摘要】:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-903菌株是河南省农业科学院植物保护研究所从郑州果园中分离得到的生防菌株。经测定,它代谢产生的抗菌物质对多种植物病原真菌具有较强抑制作用。 本实验对枯草孢杆菌(Bacillus subtilis)B-903菌株所用培养基进行了优化,在所选用的培养基中,5号培养基:葡萄糖1.5%、淀粉0.2%、豆饼粉3%、硫酸锰0.1%、磷酸二氢钾0.15%、磷酸氢二钾0.3%、硫酸镁0.05%、酵母膏0.02%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%效果较好。同时发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-903菌株的最佳发酵时间可以缩短。 该抗生素对植物病原菌的抑菌机理及其理化特性和发酵时间已有一些报道。但笔者在进行优化培养基的研究过程中发现,最佳发酵时间与前人的研究有所不同。在前人研究的基础上,通过摇瓶发酵(200ml/500ml、28℃、126r/min)筛选到种子液菌龄24h、摇瓶发酵72h的最佳发酵时间,比原来的种子液菌龄24h、发酵时间112h缩短40h,节约了能源和时间。 本研究以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-903菌株为出发菌株,对其进行亚硝基胍(NTG)和微波诱变处理,确定了两者诱变处理的最佳剂量:NTG最佳处理浓度为2001μg/mL,微波诱变选用850w、脉冲频率2450MHz处理100s,共筛选出13个高效突变株(其中NTG诱变数为7株,微波诱变数为6株)。经传代实验,2株高效突变株N_1和W_2抑菌圈直径分别稳定在26mm和24mm以上,比出发菌株提高21.8%和14.8%。 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-903菌株通过摇瓶发酵培养所产抗生素经过灭菌、离心等预处理,然后用80%饱和度硫酸铵沉淀,脱盐后经活性炭脱色,茚三酮显色为淡紫色,初步确定为所产抗生素含有多肽或蛋白质或氨基酸。沉淀经80%乙醇提取、乙酸乙酯去杂质后浓硫酸显色为单点。过正相硅胶柱,用氯仿:甲醇(2:1)洗脱,未能将活性成分冲洗下来;过ODS-C~(18)反相硅胶柱,用30%、50%、80%甲醇水溶液梯度洗脱,活性成分富集在80%甲醇洗脱液中。通过核磁共振波谱鉴定该活性成分为大分子量多肽。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈丽红;惠友为;;链霉菌NW136菌株发酵条件的研究[J];陕西林业科技;2008年01期
2 兰时乐;李立恒;胡超;林元山;谢达平;;中草药饲料添加剂发酵菌种的筛选与发酵条件研究[J];中国饲料;2010年15期
3 韩烨;周志江;肖华志;王占忠;;纳豆菌的发酵条件优化及纳豆制备方法改良[J];山西农业科学;2010年09期
4 高大响;张雪松;张小华;;一株除臭菌的分离鉴定及其发酵条件的初步研究[J];黑龙江畜牧兽医;2011年07期
5 张运真,青春耀,刘亚纳,李伟莉;改变厌氧发酵工艺条件对发酵液氮含量的影响[J];可再生能源;2004年05期
6 童应凯;韦东胜;刘婷;王玉;;海洋红酵母培养条件的研究[J];食品研究与开发;2006年08期
7 刘波微;彭化贤;曹玉桃;席亚东;;稻瘟病拮抗菌Xi-55菌株鉴定及其发酵条件[J];中国生物防治;2006年S1期
8 纪明山;李艳丽;谷祖敏;张杨;李丽娜;;番茄叶霉病拮抗细菌H402发酵条件研究[J];河南农业科学;2007年01期
9 王美玲;曹远银;李会娜;;小麦白粉病拮抗细菌PE4培养条件的初步研究[J];江苏农业科学;2007年02期
10 李晓平;潘荣光;马晓英;;拮抗菌株PM-1发酵条件研究[J];辽宁农业科学;2007年03期
11 万水霞;胡丰林;丁婷;樊美珍;郭煕盛;;不同发酵条件对细脚拟青霉(RCEF0969)抗白色念珠菌活性的影响[J];生物学杂志;2007年05期
12 杨华;纪明山;李广旭;张广仁;;不同发酵条件对苹果轮纹病拮抗细菌生长的影响[J];果树学报;2007年06期
13 周军;;产脂肪酶菌株的筛选及脂肪酶发酵条件的研究[J];河北农业科学;2008年02期
14 吴进东;;紫云英绿汁发酵液发酵条件的优化研究[J];饲料广角;2008年14期
15 杨燕凌;方金铜;黄添孙;;产植酸酶菌株的筛选及其产酶条件研究[J];中国生态农业学报;2008年04期
16 赵晓燕;武硕;杨海清;刘素花;刘正坪;;桃褐腐病菌的拮抗细菌CE的发酵条件研究[J];中国农学通报;2008年10期
17 刘辉;刘爱新;梁元存;刘菲;魏芳芳;;烟草赤星病菌(Alternaria longipes)产角质酶液体发酵条件的优化[J];中国烟草科学;2009年05期
18 周欣;张丽;李雄飞;;杆菌肽的生物法检测及发酵条件研究[J];湖南农机;2010年05期
19 周映华;吴胜莲;贺月林;缪东;;饲用枯草芽孢杆菌发酵条件的优化[J];湖南农业科学;2010年11期
20 杜宇,樊美珍,李增智;鸡腿菇胞外多糖发酵条件的研究[J];安徽农业大学学报;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王园;陆文清;;发酵条件对固态发酵豆粕品质的影响[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
2 梁健良;杜云平;周庆丰;余国莲;李小军;毕英佐;;凝结芽孢菌的分离与发酵条件的优化[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(上册)[C];2010年
3 陈林林;辛嘉英;张颖鑫;张帅;;粗状假丝酵母产脂肪酶发酵条件的优化[A];2009食品科技(北京)论坛会议指南[C];2009年
4 刘梅;徐同;;木霉的营养生长及发酵条件[A];中国植病学会西南联合学术年会论文集[C];2000年
5 曾晓华;陆勇军;;氨基酸高产酵母的选育与发酵条件的优化[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
6 马光庭;黄玉柳;;丝状真菌絮凝剂的研究[A];广西微生物学会2003年学术年会论文集[C];2003年
7 张念海;易安妮;丛莉;吴希阳;;地衣芽孢杆菌1103的产酶、抑菌特性及其发酵条件的优化[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
8 明飞平;李从发;刘四新;刘振杰;;新型环氧化物水解酶产生菌的筛选与发酵条件研究[A];廿一世纪微生物学发展前沿与应用新技术研讨会论文摘要集[C];2003年
9 陈宏文;王蔚;方柏山;胡宗定;;克雷伯杆菌生产1,3—丙二醇关键酶发酵条件研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
10 王光远;王艳艳;陈冠军;;产菊粉酶酵母菌株的筛选、鉴定以及发酵条件的研究[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集(上)[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曹冬梅;产β-环糊精葡萄糖基转移酶高温菌株HY15发酵条件的优化及酶动力学研究[D];吉林农业大学;2011年
2 连喜军;红曲色素光稳定性的研究[D];天津科技大学;2005年
3 黄惠琴;海洋放线菌抗MRSA菌株的筛选及菌株AM105活性物质的研究[D];华南热带农业大学;2005年
4 余勃;枯草芽孢杆菌发酵豆粕生产大豆活性多肽的研究[D];南京农业大学;2006年
5 孙迅;粗毛栓菌的木质纤维素降解酶及其基因克隆[D];四川大学;2005年
6 赵巧云;天花粉蛋白基因工程菌株发酵条件及产物抗病毒实验研究[D];西北大学;2006年
7 金朝霞;草酸盐高效降解菌的筛选及其酶学性质研究[D];大连理工大学;2008年
8 李羿;茯苓优良菌种的选育、保藏和液体发酵的研究[D];成都中医药大学;2005年
9 骆艳娥;重组大肠杆菌高密度发酵生产类人胶原蛋白的过程优化研究[D];西北大学;2005年
10 马延和;嗜碱芽孢杆菌N16-5碱性甘露聚糖酶的研究[D];江南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王瑞霞;枯草芽孢杆菌B-903菌株的发酵条件及所产抗生素的研究[D];河南农业大学;2005年
2 李今煜;苏云金芽孢杆菌WB_7菌株发酵条件的研究[D];福建农林大学;2004年
3 石金舟;产细菌素乳酸菌的筛选鉴定和细菌素发酵条件的研究[D];安徽农业大学;2005年
4 柴萍萍;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WY45产β-甘露聚糖酶的纯化与性质研究[D];中国农业大学;2005年
5 彭辉;麻黄有效成分产生菌的筛选及其生产条件的优化[D];西北大学;2005年
6 张金波;阿魏侧耳深层发酵条件及其胞外多糖理化性质的研究[D];华中农业大学;2005年
7 王永敏;发酵蛹虫草胞外多糖的分离提取及对巨噬细胞的激活作用研究[D];山东师范大学;2006年
8 徐春华;高产大豆异黄酮β-葡萄糖苷酶菌株的发酵工艺研究[D];辽宁师范大学;2006年
9 赵金;胶质芽胞杆菌絮凝剂的絮凝作用与絮凝机理研究[D];贵州大学;2006年
10 肖少香;豆渣发酵技术的研究及产品开发[D];湖南农业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郑成已;伯赛优化人ω干扰素基因工程菌发酵条件[N];中国医药报;2006年
2 高玉平;灵芝种质资源的收集与评价技术[N];科技日报;2006年
3 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2007年
4 河南科技学院 崔艳红;聚焦饲用酶制剂生产中存在的安全隐患[N];中国畜牧兽医报;2006年
5 ;畜禽粪便处理后方可作肥料[N];吉林农村报;2007年
6 杨美玲;农村户用沼气实用技术讲座(一)[N];山西科技报;2006年
7 郭强 武继旭 杨永杰 张景志;机械化高温好氧堆肥技术[N];中国建设报;2006年
8 郑延平;青贮饲料品质好坏咋鉴定[N];中国畜牧兽医报;2005年
9 ;技术进步奖[N];中国食品报;2009年
10 池俊英;维生素B_(12)及其衍生物后市看好[N];医药经济报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978