收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NaNO_2预处理对过氧化损伤PC12细胞的保护作用

李延红  
【摘要】:目的:探讨低剂量亚硝酸钠(NaNO_2)预处理对过氧化损伤鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用;同时观察其诱导PC12细胞分化的作用。 方法:分别以系列浓度的NaNO_2作用PC12细胞不同时间,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测NaNO_2对PC12细胞活力的影响,研究剂量-效应和时间-效应关系,寻找最低促增殖效应剂量和最佳促增殖效应时间。过氧化损伤PC12细胞模型制作采用400 mmol·L~(-1)乙醇、45 mmol·L~(-1) NaNO_2、1.1 mmol·L~(-1)过氧化氢(H_2O_2)处理2 h。细胞增殖指标采用MTT、活细胞计数法、Hoechst33258荧光单染计数有丝分裂指数;细胞凋亡检测采用Hoechst33258染色计数细胞凋亡率、流式细胞术(FITC-annexinⅤ/ PI)双染法和Hoechst 33258/PI活细胞染色法;比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量。Western-blotting检测相关蛋白表达。瑞氏染色观察PC12细胞分化状态。 结果:MTT结果显示,低剂量NaNO_2促进细胞增殖,高剂量抑制其增殖,剂量-效应关系呈典型的倒U型曲线。NaNO_2最低促增殖剂量为(促增殖效应高于对照组的15%)0.14 mmol·L~(-1),最佳促增殖效应时间点出现在第24 h;400 mmol·L~(-1)乙醇、45 mmol·L~(-1)的NaNO_2、1.1 mmol·L~(-1) H_2O_2作用PC12细胞2 h,流式细胞术结果显示,细胞凋亡率分别为(50.63±2.14)%、(52.06±8.32)%、(53.6±8.51)%,用0.14 mmol·L~(-1) NaNO_2预处理细胞24 h,再分别用上述氧化剂作用2 h,细胞凋亡率分别下降为(19.71±3.19)%、(19.65±2.17)%、(18.23±4.19)%差异具有显著性(P﹤0.05);用0.14 mmol·L~(-1) NaNO_2和一氧化氮清除剂(c-PTIO)预处理细胞24 h,再用上述氧化剂作用2 h,细胞凋亡率则分别为(32.28±7.31)%、(38.63±5.08)%、(30.75±3.81)%。Hoechst 33258染色、Hoechst 33258/PI活细胞染色计数细胞死亡率结果与其相似。 用400 mmol·L~(-1)乙醇作用PC12细胞2 h,SOD、CAT酶活性,GSH-Px、MDA含量分别为(20.95±1.68) U/mg. Prot、(11.45±0.93) U/mg. Prot、(41.17±2.72)μmol/mg. Prot、(98.38±11.5)μmol/mg .Prot,用NaNO_2预处理细胞再用乙醇作用,SOD、CAT酶活性和GSH-Px、MDA含量分别为(62.38±2.98)U/mg. Prot、(19.29±0.27) U/mg. Prot、(62.59±1.41)μmol/mg.Prot、(49.38±2.93)μmol/mg.Prot;用NaNO_2+c-PTIO预处理细胞24 h,再用乙醇作用2 h,SOD、CAT酶活性和GSH-Px、MDA含量分别为(40.23±1.57)U/mg.Prot、(15.98±1.9) U/mg.Prot、(51.21±1.52)μmol/mg.Prot、(73.58±14.7)μmol/mg.Prot。用NaNO_2预处理再用乙醇作用组,与单纯乙醇组相比,Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达量降低,Bcl-2和HIF~(-1)α蛋白表达量升高(P﹤0.05);c-PTIO可以部分逆转这种现象。45 mmol·L~(-1) NaNO_2和1.1 mmol·L~(-1) H_2O_2处理细胞,上述各指标变化情况与乙醇组一致。瑞氏染色结果显示,0.14 mmol·L~(-1) NaNO_2作用PC12细胞48 h,明显促进PC12细胞突起生长,缺氧诱导因子(HIF~(-1)α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达量增加,作用效果类似神经生长因子(NGF)。c-PTIO可以部分抑制这种现象。 结论: 1.低剂量NaNO_2促进PC12细胞增殖,高剂量抑制其增殖,剂量-效应关系呈典型的倒U型曲线。 2.低剂量NaNO_2预处理能够使PC12细胞抗氧化酶活性增强、脂质过氧化水平降低、HIF~(-1)α的表达增加,对过氧化损伤的细胞有保护作用。 3.低剂量NaNO_2可以促进PC12细胞分化。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 吴建萍;;浅谈钾通道开放剂对心血管的保护作用[J];实用心脑肺血管病杂志;2011年08期
2 段建辉;祝晓玲;李学军;;神经干细胞衰老基础与临床研究进展[J];国际病理科学与临床杂志;2011年04期
3 王瑞国;秦震;孟芹;;刺五加注射液对肢体缺血再灌注损伤的保护作用[J];中国煤炭工业医学杂志;2011年09期
4 王月芬;叶山东;;吡格列酮对糖尿病降血糖之外的保护作用[J];国际病理科学与临床杂志;2011年03期
5 谭庆雄;;青光眼视神经保护的研究进展[J];右江民族医学院学报;2011年03期
6 黎明;;蒙药广枣七味丸的药理学进展[J];北方药学;2011年04期
7 孟巍;韩璐;任世成;;复方甘草酸苷对亚急性酒精性肝损伤大鼠的保护作用研究[J];公共卫生与预防医学;2011年03期
8 吉世军;;胸腺素β4(Tβ4)在心肌缺血再灌注损伤的保护作用中的应用[J];中国医药指南;2011年17期
9 肖俐;易键;赵静;徐丽;刘柏炎;刘德明;曾建国;;博落回提取物对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用[J];中南药学;2011年07期
10 张文吉;付谧;王建生;;浅谈前列地尔对早期糖尿病肾病患者肾功能的保护作用[J];求医问药(下半月);2011年06期
11 傅晓钟;邢凤晶;蓝燕宇;王爱民;王永林;李靖;周雯;张伟;刘影;;灯盏乙素苷元4'-N-取代氨甲基苯甲酸酯的合成及体外抗氧化活性研究[J];有机化学;2011年07期
12 王永生;;依达拉奉对脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究[J];中国当代医药;2011年24期
13 李志军;;当归补血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究[J];实用中医药杂志;2011年09期
14 唐光昕;王新生;王世平;王沛涛;;左卡尼汀对少弱精子离心过程中的保护作用[J];齐鲁医学杂志;2011年05期
15 彭洪清;李光照;易慧娟;;荭叶心通软胶囊对麻醉犬急性心肌梗死保护作用[J];中国当代医药;2011年18期
16 童华生;陈怿;唐柚青;苏磊;;乌司他丁对重症中暑患者血管内皮细胞损伤的保护作用[J];广东医学;2011年12期
17 薛建军;张凌云;谭萍;;参附对心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究进展[J];中国民族民间医药;2011年13期
18 李培培;朱学良;杨国燕;陈栋梁;;玉米肽对小鼠酒精性肝损伤的保护机制研究[J];中国食品工业;2010年10期
19 王超;严洁;常小荣;杨茜芸;沈菁;周丹;;艾灸内关穴防治心肌缺血再灌注损伤的探讨[J];内蒙古中医药;2010年04期
20 洪性勋;尹明浩;;朝医二门五味汤对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的保护作用[J];中国民族医药杂志;2010年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李文丽;海春旭;蒋宁;冯安吉;杨新斌;谷小钢;;V_A、V_E对梭曼诱导大鼠过氧化损伤的保护作用[A];第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年
2 郑奕;;征收税费对近海渔业资源保护作用的模拟分析[A];中国环境科学学会2009年学术年会论文集(第四卷)[C];2009年
3 陈勤;李磊珂;;远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用[A];中华中医药学会中药实验药理分会第六届学术会议论文汇编[C];2006年
4 石进峰;张博爱;贾延劼;;麝香提取物对大鼠皮层神经细胞炎性损伤的保护作用[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
5 刘学文;胥向红;杨锐;贾玉洁;;W-7对NMDA诱导的体外培养神经元凋亡的保护作用及机制[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
6 朱元贵;陈晓春;陈丽敏;方芳;周宜灿;赵朝辉;;一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及人参皂苷Rg1的保护作用[A];第四次全国中西医结合中青年学术研讨会论文集[C];2002年
7 王守训;史立宏;李桂芝;高尔;孙凤祥;;银杏黄酮磷脂复合物对过氧化损伤血管内皮细胞的保护作用研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
8 冯国清;宋丽杰;付润芳;王振基;;PGE_1对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
9 唐春红;李鑫;;葛根素与葛根异黄酮对内皮细胞损伤的保护作用比较研究[A];首届中国西部营养与健康、亚健康学术会议论文集[C];2005年
10 陈勤;李磊珂;;远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 唐正国;硫化氢延迟预处理对大鼠心肌的保护作用及其机制的研究[D];中南大学;2010年
2 董文鹏;白藜芦醇对肠缺血再灌注损伤的保护作用及研究机制[D];第四军医大学;2011年
3 张爽;蒺藜皂苷单体B对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D];吉林大学;2011年
4 单亚明;CdTe量子点标记靶向多肽及其介导APX模拟酶抗心肌细胞过氧化损伤研究[D];吉林大学;2005年
5 唐铁龙;缺血后适应对大鼠肾脏热缺血再灌注早期损伤的保护作用及其机制研究[D];四川大学;2006年
6 杨丽娟;雌激素对脑缺血再灌注损伤神经元的保护作用及机制探讨[D];中南大学;2012年
7 付云锐;丹参酮ⅡA对肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[D];重庆医科大学;2012年
8 杨玉波;L-Arg对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究[D];吉林大学;2003年
9 张淑敏;Sul-F对心肌损伤的保护作用及其机制研究[D];中国海洋大学;2011年
10 洪霞;阿尔茨海默病的危险因素[D];中国协和医科大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李延红;NaNO_2预处理对过氧化损伤PC12细胞的保护作用[D];河南大学;2011年
2 闫玉梅;过氧化物模拟酶对H_2O_2诱导的心肌细胞氧化损伤保护作用的研究[D];吉林大学;2006年
3 钟孝正;甘氨酸对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D];南京医科大学;2010年
4 赖晓晶;14-3-3蛋白对神经元存活及其缺血损伤的保护作用和机制[D];华中科技大学;2009年
5 赖晓晶;14-3-3蛋白对神经元存活及其缺血损伤的保护作用和机制[D];华中科技大学;2009年
6 赵丽晶;牛磺酸对缺血再灌注损伤心肌细胞的保护作用[D];吉林大学;2006年
7 刘冠兰;萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化功能研究[D];清华大学;2010年
8 侯聪敏;双黄连对犬肝细胞对乙酰氨基酚损伤的保护作用[D];河北农业大学;2011年
9 李敏;碘过量对FRTL细胞过氧化损伤的实验研究[D];天津医科大学;2010年
10 李静;乙酸钠对内毒素休克的保护作用及抗炎机制的研究[D];河北大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 岳阳;白介素-22对肝脏脂肪变性起保护作用[N];中国医药报;2010年
2 兆丰 中创;中药对脑神经细胞具有保护作用[N];中国劳动保障报;2006年
3 万同己;VC、VE对DM患者肾脏的保护作用[N];中国医药报;2003年
4 张中桥;复方丹参注射液对EPC氧化应激损伤有保护作用[N];中国中医药报;2007年
5 张中桥;复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤有保护作用[N];中国医药报;2006年
6 吕崇山;对肾有保护作用的五种中药[N];中国医药报;2004年
7 记者孙国根;硫化氢对心血管系统有调节保护作用[N];健康报;2009年
8 广文;油茶提取物对心肌有保护作用[N];中国医药报;2000年
9 李增烈;“丙球”并非万能药[N];家庭医生报;2007年
10 淑芬;轻度黄疸对新生儿具有保护作用[N];医药经济报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978