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玉米肽制剂的解酒保肝作用研究

朱晔  
【摘要】:肝脏具有去氧化,储存肝糖等作用,是身体的代谢中心,能参与体内的多个生理过程。长期大量饮酒会引起酒精性肝病,可发展为酒精性肝炎、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化等。近年来,因饮酒人口增多而导致酒精性肝损伤日益增加,因此,研制有效的解酒保肝产品在预防酒精肝损伤方面具有重要意义。玉米肽(又称玉米低聚肽)是玉米蛋白进行酶水解而获得活性小分子多肽,具有醒酒保肝、降压、抗疲劳等作用。葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata(wild)Ohwi或甘葛藤Pueraria thomsonil Benth的干燥块根,是由国家卫生部批准的药食两用植物,《中华本草》中介绍葛根有解酒醒脾之功效,与葛根总黄酮有关。姜黄素(Curcumin,简称Cur)是从姜科、天南星科中的部分植物根茎中提取的多酚类物质,具抗氧化、抗炎症、清除自由基、抗肿瘤等多种作用,可减轻酒精性肝损伤。菊花为菊科菊属(Chrysanthemum morifoliuin Ramat)的多年生宿根草本植物,含有黄酮、三萜类、多糖、挥发油等物质,具有保肝、清热解毒等疗效。本课题制备了姜黄素-玉米肽复合物,对复合物的理化性能进行测定,并研究其对小鼠酒精性肝损伤的保护作用;采用玉米肽与葛根、菊花等配伍,制备玉米肽解酒保肝泡腾片,建立泡腾片的质量标准,考察其稳定性,并评价泡腾片对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。一、采用碱溶酸中和法制备Cur-玉米肽复合物。通过测定Cur原药和复合物的溶解度、粒径、Zeta电位等,对Cur的溶解性及化学稳定性等进行表征,同时利用DSC、荧光光谱和红外光谱对Cur和玉米肽的相互作用进行研究。结果表明,Cur与玉米肽通过疏水作用复合,改善了Cur的水溶性和稳定性。二、Cur-玉米肽复合物的体外抗氧化实验和体内药效实验。通过测定Cur原药、玉米肽、物理混合物和Cur-玉米肽复合物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力发现,Cur和玉米肽形成复合物后,有利于Cur对自由基的俘获,产生抗氧化作用,加强对酒精性肝损伤的保护。对Cur-玉米肽复合物的醒酒保肝作用进行研究,结果表明:Cur-玉米肽复合物可降低小鼠血清中AST、ALT和肝脏中TG、MDA的含量,升高肝脏中GSH含量,加速体内自由基清除,有效对抗酒精造成的肝功能损伤,改善小鼠的肝功能状况。三、对玉米肽解酒保肝泡腾片的制备工艺进行优化。采用酸碱分开制粒,压片即得。对辅料及其用量进行筛选,得到最佳处方和制备工艺为:将60 g PEG6000溶于适量水中,加417 g碳酸氢钠与其混合均匀,50℃烘干,过20目筛整粒;取主药600 g、甘露醇260 g均匀混合,加无水乙醇制成软材,50℃烘干,过20目筛整粒;最后将柠檬酸583 g、阿斯巴甜10 g、PEG6000 60 g加入上述颗粒,混匀,压制1000片,即得。四、制定玉米肽解酒保肝泡腾片的质量标准,并对泡腾片进行质量评价。玉米肽解酒保肝泡腾片的片重差异、崩解时限等均符合2015版《中国药典》相关规定。采用双波长紫外分光光度法对泡腾片中总黄酮含量进行测定,方法可靠,使用方便;制定高效液相法测定泡腾片中葛根素和玉米肽的含量,方法精密,使用方便。薄层鉴别结果显示,泡腾片与菊花对照药材、绿原酸标品在同一位置上,显示相同颜色,并且无阴性干扰。五、对玉米肽解酒保肝泡腾片进行影响因素试、加速试验和长期稳定性试验考察。以泡腾片的性状、鉴别、崩解时限、pH值、含量测定、微生物限度等作为检测指标。结果表明:在6个月内玉米肽解酒保肝泡腾片的各项指标无明显变化,具有良好的稳定性。六、玉米肽解酒保肝泡腾片的体内药效考察。建立酒精诱导小鼠肝脏损伤模型,考察玉米肽解酒保肝泡腾片的醒酒保肝作用,结果表明:玉米肽解酒保肝泡腾片可显著降低小鼠血清中AST、ALT和肝脏中TG、MDA的含量,明显升高肝脏中GSH含量,加速体内自由基清除,有效对抗酒精性肝损伤,对酒精性肝损伤小鼠的肝脏起到保护作用。


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