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蛋白质与染料、药物相互作用及其应用研究

邓翠贞  
【摘要】: 蛋白质是一类重要的生物大分子,在生物体内占有特殊的地位。它是重要的生命物质,它与营养、发育、遗传、新陈代谢等生命活动有着密切的联系。蛋白质的研究无疑将成为21世纪生命科学之中主要的任务之一。 对蛋白质和染料、药物相互作用的研究,不仅对改进和发展检测蛋白质的方法有促进作用;同时也对药物设计分子、新药开发等均具有重要的指导意义。本文对蛋白质与染料光谱探针、药物作用及应用的研究进行综述。研究了酸性黄-蛋白质体系、并将其运用于分析检测;探讨了头孢曲松钠与蛋白质的相互作用;建立了催化法测定头孢曲松钠、痕量银的新方法。 一蛋白质与酸性黄作用机理的研究及分析应用 基于在pH=1.64的Clark-Lubs缓冲溶液中,牛血清白蛋白与酸性黄作用时导致吸收光谱发生变化,在532nm附近吸光度明显降低,而在424nm附近吸光度则呈增强趋势,其︱ΔA︱-1与cP-1呈良好线性。本文系统研究了蛋白质与酸性黄的作用机理及实验条件对蛋白质与酸性黄结合反应的影响,探讨了蛋白质与酸性黄之间的作用力。在选择的实验条件下,检出限为0.88mg·L-1,线性范围为1.2~360mg L-1,应用于人尿中总蛋白的测定与邻苯三酚红-钼法基本吻合。 二头孢曲松钠与牛血清白蛋白的相互作用研究 在模拟动物体pH条件下,用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱法研究了牛血清白蛋白(BSA)-头孢曲松钠(CTRX)体系的荧光光谱进行了研究,采用同步荧光技术考察了头孢曲松钠对牛血清白蛋白构象的影响。实验发现,CTRX对BSA有较强的荧光猝灭作用,用Stern-Volmer和Lineweaver-Burk方程分别处理试验数据,发现BSA与CTRX发生反应生成了新的复合物,属于静态荧光猝灭,发生分子内的非辐射能量转移。求得CTRX-BSA的形成常数KLB及热力学函数ΔG、ΔH和ΔS,根据热力学函数确定了CTRX和BSA之间的作用力类型为静电作用力,依据F?rster非辐射能量转移机制,确定了给体-受体间的结合距离和能量转移效率,计算出结合位置距离蛋白质色氨酸残基为4.20nm。 三阻抑催化光度法测定头孢曲松钠 对在磷酸介质中,CTRX阻抑Cu2+-高碘酸钾-偶氮胂(Ⅲ)反应体系进行了研究,并以此为基础建立了阻抑光度法测定CTRX的新方法,研究确定了反应的最佳实验条件。研究结果表明,该方法的检出限为0.0022mg·L-1,线性范围为0~1.0mg·L-1。该方法用于头孢曲松钠针剂中头孢曲松钠含量的测定,同时与高效液相法进行了比较,结果满意。 四乙基紫-K2S2O8-Ag(Ⅰ)催化反应体系研究及痕量银的测定 基于在醋酸-醋酸钠介质中Ag(Ⅰ)催化过硫酸钾氧化乙基紫的褪色反应体系进行了研究,并以此为基础建立了催化光度法测定痕量银的新方法,研究确定了反应的最佳实验条件。研究结果表明,该方法的检出限为4.0μg·L-1,线性范围为0~80μg·L-1,反应的表观速率常数为3.96×10-4s-1,表观活化能为40.04KJ·moL。该方法用于废定影液样品中银的测定,同时与火焰原子吸收分光光度法进行了比较,结果满意。


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