收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

共振瑞利散射法灵敏测定蛋白质

李景霞  
【摘要】: 共振瑞利散射(Resonance Rayleigh scattering, RRS)法是一种20世纪90年代后发展起来的新的定量分析技术。近年来,RRS法由于操作简单、灵敏度高而受到人们的广泛关注。目前,RRS法不仅应用到生物大分子、无机离子、医药和阳离子表面活性剂的测定,而且在胶束浓度和包容常数等方面的测定也被广泛应用。 蛋白质在生物体中担负着各种重要的生理功能。它是构成细胞内原生质的主要组成成分,是组成自然界中各类生命的最重要的物质,可以这样说,没有蛋白质就没有生命。因此,蛋白质的定量测定对于生命科学和生物化学研究具有重要意义,是临床检验中的重要指标,也是许多生化物质和药物分离提纯中质量检验及食品检验中常见的分析项目。蛋白质的测定方法主要有:紫外吸收法、荧光光度法和共振光散射法等。共振瑞利散射法是近几年才发展起来的新技术。其特点是灵敏度高和简便实用,在蛋白质及核酸等生物大分子的分析测定中优势明显。 本论文基于共振瑞利散射法,开展了蛋白质的检测工作,主要包括两个方面内容: 1、在pH 4.2的BR(H3PO4,H3BO3和CH3COOH与0.2mol/L NaOH溶液按一定比例混合)缓冲溶液中,甲基蓝与免疫球蛋白相互作用生成复合物,使溶液的350nm处的共振瑞利散射光谱显著增强,增强程度与免疫球蛋白的浓度成正比关系。据此建立了测定免疫球蛋白的新方法,方法的线性范围为0.3-67.2μg/mL,检出限为0.03μg/mL。方法稳定性好、灵敏度高,用于人血清样品测定,结果令人满意。 2、以巯基乙酸为稳定剂,合成了CdSe量子点,用该量子点作探针共振瑞利散射法测定人血清蛋白。在pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,巯基乙酸包被的CdSe量子点通过共价偶联标记了人血清蛋白,生成的复合物导致溶液的共振瑞利散射光谱和二级散射光谱(second-order scattering, SOS)显著增强,散射光强度的增加与人血清蛋白的浓度在0.4-48μmol/L的范围内成正比关系,检出限分别为0.1μmol/L (RRS)和0.25μmol/L (SOS)。实验结果表明,RRS法的灵敏度比SOS高。该方法具有简单、灵敏度高和选择性好等优点。将所建立的方法用于尿样中HSA的测定,结果令人满意。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 崔凤国;;生长素的代谢及作用机理[J];生物学教学;2011年08期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨清玲;刘健;张勇;张筑元;陈刚才;刘绍璞;周谐;宋丹;李莉;;共振瑞利散射法测定环境空气和废气中的氯化氢[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第四卷)[C];2011年
2 蒋先旺;刘买利;张许;;水和GB1蛋白质相互作甩的核磁共振研究[A];第十五届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2008年
3 刘买利;;蛋白质与药物相互作用和结合的NMR研究[A];第十届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];1998年
4 韩秀;杨宏飞;;Nolen-Hoeksema反刍思维量表在中国的试用[A];第十二届全国心理学学术大会论文摘要集[C];2009年
5 刘志荣;;天然无序蛋白质的结构柔性对结合速度的影响[A];第一届全国生物物理化学会议暨生物物理化学发展战略研讨会论文摘要集[C];2010年
6 谢彤;李桂莲;巨韩芳;赵德福;赵慧;穆成;王撷秀;;结核分枝杆菌链霉素耐药株rspL和rrs基因突变特征研究[A];2010年中国防痨协会临床/基础专业学术大会汇编[C];2010年
7 贾琼;石大伟;赵玉玲;李辉;陈彦丞;李亮;朱国峰;;河南省耐多药结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变分析[A];2010年中国防痨协会临床/基础专业学术大会汇编[C];2010年
8 江明锋;张义正;;黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因转录调控序列的鉴定[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
9 刘东旭;;C1抑制物蛋白质的新功能[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年
10 温子禄;张朝宝;马峻;赵俊伟;郭晓奎;王洪海;张舒林;余晓丽;;武汉地区结核分枝杆菌耐药分离株rpsL和rrs基因特征分析[A];中华医学会结核病学分会2011年学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 彭敬东;共振瑞利散射光谱在天然药物分析中的应用研究[D];西南师范大学;2005年
2 刘江涛;共振瑞利散射技术在博莱霉素类抗肿瘤药物分析中的应用研究[D];西南大学;2007年
3 杨清玲;共振瑞利散射和共振非线性散射光谱在环境分析中的新应用研究[D];西南大学;2008年
4 丁博;蛋白质特异性分子相互作用的设计、筛选及应用[D];中国科学技术大学;2010年
5 常乐;蛋白质的折叠与结合机制研究[D];南京大学;2011年
6 张德昌;二磷酸核苷酸激酶与跨细胞膜信息传递[D];中国协和医科大学;1989年
7 高希宝;蛋白质—金属纳米粒子体系荧光增强效应及其分析应用[D];山东大学;2007年
8 陈庆海;多重分子信标探针芯片构建与结核杆菌耐药基因多重突变位点检测研究[D];第三军医大学;2008年
9 陈欣;蛋白质在不同界面的识别、吸附及稳定性研究[D];浙江大学;2009年
10 白云飞;双链DNA芯片的制备及其应用研究[D];东南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李景霞;共振瑞利散射法灵敏测定蛋白质[D];信阳师范学院;2010年
2 宋彦琪;共振瑞利散射法在生物碱和磺胺类药物中的分析应用[D];西南大学;2010年
3 仇月红;共振瑞利散射法测定维生素B_1、B_2、B_(12)[D];湘潭大学;2010年
4 黎小艳;共振瑞利散射法和荧光法分析测定天然植物性激素及其分析应用研究[D];西南大学;2012年
5 刘丹;量子点做探针共振瑞利散射法在多糖分析中的应用研究[D];西南大学;2011年
6 陈粤华;用金纳米微粒作探针共振瑞利散射法测定药物的新方法研究[D];西南师范大学;2005年
7 陈莲惠;分光光度法与共振瑞利散射法测定某些药物的新方法研究[D];西南大学;2006年
8 段慧;共振瑞利散射和共振非线性散射光谱法测定青霉素类抗生素的新方法研究[D];西南大学;2008年
9 罗志辉;高效液相色谱—共振瑞利散射检测技术及其应用研究[D];广西师范大学;2008年
10 王芬;蒽环类抗生素与核酸相互作用及蒽环类抗生素测定的共振瑞利散射光谱研究[D];西南大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 新汶;蛋白质“CRD-BP”可使大肠癌恶化[N];医药经济报;2006年
2 记者  邰举;韩发现影响癌症转移的“开关”蛋白质[N];科技日报;2006年
3 刘云涛;北大蛋白质功能设计研究获新进展[N];中国医药报;2007年
4 钱铮;猫尿为何气味特别冲?含有“好奇心”蛋白质[N];新华每日电讯;2006年
5 高文;喝豆浆有七忌[N];中国中医药报;2006年
6 钱铮;源自幽门螺杆菌的“CagA”蛋白可致癌[N];医药经济报;2008年
7 张玲;孩子夏季吃肉有讲究[N];大众科技报;2007年
8 钱铮;阻止特定蛋白质结合可抑制乳腺癌[N];医药经济报;2006年
9 华雯;哪些食物不能一起食用[N];中国国门时报;2008年
10 保健时报特约专家 王旭峰;吃咸鸭蛋能补钙铁[N];保健时报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978