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基于量子点的禽流感病毒检测新方法探索

张文韬  
【摘要】:流行性感冒是一种由流感病毒引起的急性传染病。目前,流感病毒已经分别从人、猪、马、海洋动物及鸟类等多种动物体内分离得到。禽流感病毒是一种A型流感病毒,属正粘病毒科。禽流感病毒表面的两种抗原糖蛋白,血细胞凝集素(hemagglutinin, HA)和神经氨酸苷酶(neuraminidase, NA)是其亚型的分类标准。HA、NA位于病毒表面,在病毒侵染宿主细胞的过程中起到关键性作用。目前已有16种HA亚型(H1-H16)和9种NA亚型(N1-N9)得到鉴定。近来流感病毒例如H5N1型、H1N1型等在人群中爆发,而流感病毒的检测与分型在临床诊断以及病毒防治中起到十分关键的作用。本研究基于量子点技术,对禽流感病毒的检测及分型的新方法进行了探索与研究。 首先我们将量子点与特异性的核酸探针相偶联,与此同时将磁珠与另一段识别同一病毒RNA分子的核酸探针偶联。这样,探针分子与病毒RNA结合成杂交分子后便形成量子点偶联探针-病毒RNA-磁珠偶联探针的“三明治”复合物。通过磁分离作用,将含有量子点的复合物分离、富集起来。最后通过对量子点荧光信号的检测实现对禽流感病毒的检测与分型。 我们还针对禽流感病毒HA、NA蛋白制备并纯化多克隆抗体,然后通过酰胺共价结合将量子点与抗体进行偶联。通过抗原抗体反应,携带有量子点的抗体蛋白识别病毒表面抗原,并通过量子点的荧光信号实现对禽流感病毒的检测与分型。 本研究基于量子点新技术,利用量子点的各种优势,开发了针对禽流感病毒的新方法,这些探索研究可能为其他病毒的检测提供有益的思路。


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