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慢传输型便秘蛋白质组学及手术治疗的研究

陈炜  
【摘要】:目的:消化道重建方式与术后患者康复及生活质量密切相关,本研究通过对比回直肠传统吻合、逆蠕动侧侧吻合以及逆蠕动盲直吻合等不同消化道重建方式在便秘外科领域中的应用优劣,为寻求更加合理的外科手术方式提供经验依据,弱化术后腹泻与复发等并发症的难题。方法:本试验随机选取有随访资料的武汉大学中南医院2008—2013年手术干预的慢传输型便秘患者,按照消化道重建方式分为3组,回直传统吻合组(20例),回肠逆蠕动侧侧吻合组(22例).盲肠直肠逆蠕动吻合组(23例),术后随访2年(3月、6月、12月、24月),随访期间通过收集、分析围手术期相关并发症发生率,手术前后便秘评分、肛门失禁评分、生活质量评分等数据资料,比较不同消化道重建方式的优势与弊端。结果:1、逆蠕动回直及传统回直重建入组患者一般资料具有可比性,超过70%的患者对手术结果满意,术后早期(3、6、12月)Wexner肛门失禁评分逆蠕动回直吻合组较传统回肠直肠吻合组低(P0.05),术后胃肠生活质量评分(3、6月)逆蠕动回直吻合组优于传统回肠直肠吻合组(P0.05),与传统回直重建方式相比,逆蠕动回直重建消化道获得接近健康人群的排便次数(P0.05);2、回直肠及盲直肠重建消化道两组患者一般资料具有可比性,术后便秘症状均改善明显(术前术后WCS评分对比,P0.05)术后口排便次数逆蠕动盲直吻合较回肠重建更接近正常人群平均值(P0.05)。在术后Wexner肛门失禁评分、胃肠生活质量自评分二者比较无显著性差异(P0.05);3、腹泻是回肠直肠重建消化道术后常见并发症,但主要集中在术后12月内。盲直重建消化道术后腹胀腹痛较回直更为普遍。本研究随访周期内未见便秘复发病例;结论:全结肠切除术后逆蠕动回肠直肠吻合重建消化道,较传统重建方式相比具有减轻术后早期腹泻、提高生活质量等优势。逆蠕动盲直重建消化道,术后可获得理想排便功能,但术后腹胀腹痛比例及程度较逆蠕动回直重建更为突出,有一定复发风险。目的:结肠慢传输型便秘属于难治性功能性便秘疾病范畴,以结肠动力功能障碍为主要病理特征,对于难治性慢传患者而言,在严格把握手术适应征的前提下,手术治疗具有积极意义。目前慢传诊断主要依赖于病史及胃肠传输试验,缺乏生物学检测指标,本研究旨在运用差异蛋白质组学研究方法,利用其高通量的特点,构建双向电泳图谱,运用质朴分析鉴定出与结肠动力障碍相关蛋白,为阐述慢传具体发病机制及临床筛选便秘指标打下基础。方法:随机选取5例单纯结肠慢传输型患者,根据术前胃肠传输试验结果,将其全结肠标记为动力障碍区及正常区域,术中肉眼再次证实上述区域结肠血运及蠕动特点,并分别取全层肠组织配对为5组。提取、分离总蛋白,构建双向电泳凝胶图谱,通过ImageMaster分析软件分析鉴定差异蛋白表达点。切胶溶解后,通过基质辅助激光解吸电离四极杆飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质朴分析,匹配蛋白质数据库,寻找与之相对应的蛋白质。结果:获得5组分辨率高、重复性佳的结肠动力正常与结肠动力障碍的双向电泳图谱。正常动力组平均斑点数为274±30,动力障碍组平均斑点数为212±24,两组内匹配率位为72.99%。有76个点蛋白表达差异,挑选25个点进行质朴分析,均重复操作3次以上,累计鉴定15种蛋白质,质朴分析成功率达60%。结论:1成功应用双向凝胶电泳技术构建结肠慢传输患者自身对照病变组与正常组结肠组织蛋白表达谱。2病变组中共鉴定出15种蛋白质,这些差异蛋白可能参与了结肠慢传输型便秘的具体发病机制。


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1 陈炜;慢传输型便秘蛋白质组学及手术治疗的研究[D];武汉大学;2015年
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