收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

银杏叶提取物对大鼠肝纤维化的防治作用及其机制

罗燕军  
【摘要】:肝纤维化是一常见病,致病率和病死率高。慢性肝病如寄生虫性(血吸虫、华支睾吸虫感染)、慢性病毒性(HCV、HBV感染)、免疫性(自体免疫性肝损伤)、毒物损伤性肝病等均可导致肝纤维化的形成,进一步可发展为肝硬化甚至肝癌。肝纤维化的病理特征为肝内过量的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积。到目前为止,临床尚无确实有效的治疗方式。银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)由银杏树的绿叶中提取,其具有类似SOD的活性和自由基清除作用,本研究的目的是了解EGB在大鼠CCl_4所诱导肝纤维化形成和恢复过程中的作用及其可能的机制。 研究分为两部分,第一部分研究EGB对大鼠CCl_4肝纤维化形成的抑制作用及其机制。将40只大鼠随机分为正常对照组(N组)、EGB正常对照组(E组)、造模组(C组)和EGB预防组(CE组)。四组大鼠分别以生理盐水、EGB200mg·kg~(-1)、生理盐水或EGB 200mg·kg~(-1)灌胃,1次·天~(-1);同时分别以矿物油、矿物油、CCl_4+矿物油(1:1)或CCl_4+矿物油(1:1)0.15ml·只~(-1)腹腔注射,2次·周~(-1)。于第8周末处死大鼠,应用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、Alb、TP和Tbil,观察肝功能变化;肝组织HE染色、Masson染色和网状纤维染色,观察肝组织病理学变化;检测肝组织中MDA含量的变化;免疫组化方法检测肝组织αSMA蛋白表达的变化;RT-PCR法检测肝组织中MMP-13、-2、TIMP-1和TIMP-2基因表达的变化。 第二部分研究EGB对大鼠肝纤维化逆转的促进作用及其机制。大鼠CCl_4腹腔注射8周后,将C组大鼠处死,经病理学检查证实为肝纤维化形成,将剩余18只大鼠随机分为2组:EGB治疗组(Y组)和自然恢复组(Z组),分别以EGB 200mg·kg~(-1)和等体积生理盐水灌胃,1次·天~(-1),共2周,于实验末处死大鼠,同样进行肝脏病理学研究、肝功能检测、肝组织MDA含量检测和αSMA蛋白表达的免疫组化研究及肝组织MMP-13、-2、TIMP-1和TIMP-2基因表达的研究。 结果发现,C组肝纤维化形成,与N组相比较,C组大鼠肝纤维化程度明显 增加(,6.18,尸0.01),肝组织中胶原纤维和网状纤维含量明显增加(拼25.H 和27.14,P0.001),MDA含量明显增加(片9.64,P0.001),aSMA蛋白阳性 染色面积明显增加(t=4‘94,P0.001),MMP一2、TIMP一l和TIMP一2基因表达明 显增加(r分别为29.37,27.56,25.08,P0.001),血清ALT、AST活性和Tbil 水平明显升高(t分别为6.82、7.14和6.06,尸0.001),血清Alb、TP含量则明 显降低(t分别为1221和1 3.79,尸0.001)。相对于C组,CE组大鼠肝功能改 善(ALT:卜3 .89,AST:卜5.06;Thil:拼4.22,TP:拼n .01,Alb:片7.04,均 为尸0.001),肝纤维化程度降低(u二3.55,p0.01),肝组织中胶原纤维和网状纤 维沉积明显减少(拼9.85和18.94,P0.001),MDA含量降低(拼3.71,P 0.005), aSMA蛋白阳性面积明显减少(拼6.67,P0.001),MMP一2、TIMP一l和TIMP一2 基因表达减少(t为14.58,11.29,7.52,P0001),但CE组各指标与N组相比 较仍有显著性差异(ALT:户3.27,P0.005;AST:卜2.04,Alb:拼2.59,Tbil: t=2 .50,P0.05;TP:t=4.04,P0.001;肝纤维化分级:u=3.95,P0.01;胶原 纤维沉积:t=16.79,P0.001;MDA:t=6.67.P0.001;aSMA:拼3.02,P0.005; MMP一2:t= 18,72,TIMP一l:卜26.22,TIMP一2:t=13.40,P0.001):网状纤维沉 积与N组相比较,无显著性差异(片1.71,P.05)。E组和N组各指标无明显 差异。各组肝组织中未见MMP一13基因表达。 Z组大鼠肝纤维化程度相对于C组明显降低(u=3.28,P0.01),肝组织中胶 原纤维和网状纤维含量减少(t分别为2.99,3.23,P0.005),MDA含量下降 (拼2.37,P0.05),aSMA阳性面积无明显差异(t=1 .40,P.05),MMP一13基 因表达明显增加(t=30.75,尸0.001),而TIMP一1和TIMP一2、MMP一2基因表达 明显减少(t为11.31和15.10,33.33,P0,001),肝功能部分改善(ALT:户1.50, 尸 .05:AST:拼1 .67,尸0.05;Tbil:户3.54,P0.005;TP:片7.66,P0‘001: Alb:拼5.28,尸0.001)。Y组大鼠肝功能正常,与z组比较,Y组肝纤维化程度 明显降低(好3.54,P0.01),胶原纤维和网状纤维沉积进一步减少(t分别为7.14 和12.17,P0.001),MDA含量明显减少(拼5.93,P0.001),aSMA蛋白阳性 面积明显减少(户1 .83,尸0 .05),肝组织MMP一13基因表达明显增加(拼8.46, P0.001),TIMP一1和TIMP一2、MMP一2基因表达迅速减少(t为12.63,22.46 和5 .76,P0.001)。 以上结果提示:EGB有防治肝纤维化的作用,EGB通过抑制氧化应激而抑 制HSC活化,降低肝组织MMP一2、TIMP一1、一2的表达,从而抑制肝纤维化的 形成。EGB促进HSC凋亡/促进HSC向静止状态转变,增加肝组织MMP一13表 达,抑制护r1MP一1、一2的表达,促进肝纤维化的逆转。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 徐速;;MTX在发生肝纤维化的银屑病人中的药代动力学[J];国际皮肤性病学杂志;1987年05期
2 叶红军,高永生,王丽英,肖红,计秀生,潘春芝,冯雪梅;血清Ⅲ型前胶原对肝纤维化的诊断价值[J];临床肝胆病杂志;1993年02期
3 彭安国,陈东风,冷思仁,徐有奇;透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白对肝纤维化诊断价值的研究[J];中国实用内科杂志;1996年08期
4 王宝恩;肝纤维化的诊断与严重度评估[J];中华肝脏病杂志;1998年04期
5 王建芳;肝纤维化检测指标与肝组织病理学改变关系的探讨[J];江苏医药;1999年02期
6 曾凡杰,刘璐,朱建衡,黄鹰,王媛,刘文虎;肝纤维化指标检测在病毒性肝炎中的应用[J];铁道医学;1999年03期
7 金丽华,徐克成;中药抗肝纤维化治疗[J];胃肠病学和肝病学杂志;2000年03期
8 孙守才,刘光炜;加味四逆散治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的初步研究[J];陕西中医学院学报;2001年01期
9 久太;病毒性肝炎患者血清IV—C、HA和LN水平与肝纤维化的关系[J];西藏医药杂志;2001年02期
10 袭柱婷,单长民,姜学连,栾希英,李珂珂;三棱、莪术抗大鼠免疫性肝纤维化研究[J];中国中药杂志;2002年12期
11 史丽云,梁国庆;中药复方治疗肝纤维化及腹水的电镜实验研究[J];广西中医学院学报;2002年03期
12 石伟珍,葛孝定;血清肝纤维化指标对肝纤维化诊断价值的评估[J];浙江临床医学;2003年05期
13 左和宁,刘凌云;慢性肝病纤维化的血小板功能变化[J];湖南医学高等专科学校学报;2003年04期
14 石小枫,刘杞,刘林,徐曼;三七总苷抗实验性肝纤维化的研究[J];中药药理与临床;2004年01期
15 吴艾萌,汤红,张晓天,周曙岚,朱孝武,赵敬武;彩色多普勒超声检查对慢性肝炎肝纤维化的判断[J];实用肝脏病杂志;2004年03期
16 黄晓丽,唐望先,但自立;结缔组织生长因子——新发现的致肝纤维化因子[J];中西医结合肝病杂志;2005年02期
17 陆伦根;曾民德;;肝纤维化非创伤性诊断[J];中华肝脏病杂志;2006年03期
18 余姣;徐可树;;TGF-β家族在肝纤维化中的不同作用及对策[J];世界华人消化杂志;2006年28期
19 刘荣火;周宇;;核因子-κB抑制剂与肝纤维化关系[J];肝脏;2007年02期
20 李生财;;论肝纤维化中医病机的演变规律[J];新中医;2008年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈俊红;王继;;不同中医治法逆转大鼠肝纤维化的病理观察[A];中华中医药学会中医、中西医结合治疗常见病研讨会论文集[C];2007年
2 李瑞雯;高爱梅;汪晖;;小檗碱对免疫性肝损伤的治疗作用研究[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
3 慕永平;小川智弘;河田则文;;蛋氨酸·胆碱诱导大鼠脂肪性肝纤维化肝细胞凋亡机制研究[A];第二十次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2011年
4 程明亮;李宏;姚玉梅;;丹芍化纤胶囊对猪血清免疫性肝纤维化肝中氧化及抗氧化的影响[A];第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2004年
5 叶国荣;舒建昌;;肝星状细胞在肝纤维化中的作用[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
6 程井军;曾佑祥;孙雅祥;柯冬桂;熊建玲;;电针治疗非酒精性脂肪性肝纤维化患者30例[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
7 严福华;;MR弥散加权成像和MR巨噬细胞成像在肝纤维化炎症分级中的应用研究[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年
8 肖定璋;;肝纤维化细胞模型的建立[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
9 缪锡民;;肝纤维化发生机制及治疗对策[A];2005年浙江省感染病、肝病学术会议论文汇编[C];2005年
10 刘克洲;;肝纤维化治疗若干研究进展[A];浙江省中医药学会肝病专业委员会2006年年会暨慢性乙型肝炎诊治研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李志红;酒精性肝纤维化中医证候特点和慢肝消抗酒精性肝纤维化的分子机制[D];北京中医药大学;2004年
2 段志军;肝纤维化形成中MMP-1、TIMP-1表达及益气软肝方保护作用的实验研究[D];大连医科大学;2003年
3 强晖;肝纤维化相关基因的筛选及其功能初步研究[D];第二军医大学;2003年
4 毕红征;RF胶囊抗肝纤维化作用及机理研究[D];成都中医药大学;2005年
5 朱冰;抗纤Ⅰ号方药抗实验性大鼠肝纤维化作用及其分子机制研究[D];河北医科大学;2003年
6 彭彦辉;中药和硒对慢性肝纤维化的预防和治疗作用及其机理研究[D];河北医科大学;2002年
7 翁红雷;干扰素-γ抗肝纤维化动物实验和临床研究[D];浙江大学;2002年
8 吴晓玲;红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ-Smad信号通路的影响[D];重庆医科大学;2005年
9 段颖华;合俞会配穴法治疗肝纤维化的探讨及实验研究[D];广州中医药大学;2010年
10 刘文滨;反义TIMP-1表达质粒对实验性肝纤维化影响的体外研究[D];复旦大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邢陆;加味越鞠丸治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究[D];辽宁中医学院;2002年
2 阎文昭;肝组织与血清转化生长因子β_1表达水平与病毒性肝炎患者肝纤维化的关系[D];河北医科大学;2003年
3 陆亚琴;地龙2号抑制实验性大鼠肝纤维化的基础研究[D];东南大学;2004年
4 冯璇;复方归芪颗粒治疗肝纤维化的实验研究[D];南京中医药大学;2010年
5 李一;趋化因子CXCL9及其受体CXCR3在肝纤维化损伤中的基因表达变化研究[D];上海交通大学;2011年
6 薛苗;CTGF特异性小分子干扰RNA对大鼠肝纤维化逆转的影响[D];兰州大学;2011年
7 尹旭;海鞘醇类似物LQC-X6抗实验性肝纤维化的研究[D];北京中医药大学;2011年
8 郑力搏;PTEN在CCl_4诱导大鼠肝纤维化和自发逆转肝组织中的动态表达及其与在体肝星状细胞增殖、凋亡的关系[D];河北医科大学;2011年
9 李成泰;悦肝胶囊Ⅱ对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究[D];延边大学;2003年
10 廖丹;TGF-β1和smad4mRNA在病毒性肝炎肝纤维化中的表达及意义[D];广西医科大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 马艳红;解放军302医院:建立国内首家肝纤维化无创诊疗中心[N];中国医药报;2009年
2 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所 段瑞娴 刘红艳 程勇卫 高啸 林菊生 唐望先 武汉市第七医院 虞涤霞 华中科技大学同济医学院基础医学院病理学系 吴翠环;外源性核酸对大鼠肝纤维化的影响[N];保健时报;2009年
3 黄丁毅;福瑞股份:肝纤维化专科面对“做大”命题[N];医药经济报;2010年
4 徐琪忠 王根华;长征医院研究揭示肝纤维化发病机制[N];中国医药报;2010年
5 记者 胡德荣;动物实验表明—— 一抗肿瘤药可改善肝纤维化症状[N];健康报;2011年
6 吴杨 杨苏河;减缓肝纤维化进程[N];医药经济报;2001年
7 胡德荣;肝纤维化研究多步推进[N];健康报;2004年
8 ;什么是肝纤维化[N];健康报;2005年
9 记者 张旭;新型无创肝纤维化检测仪可避免75%的肝活检[N];中国医药报;2009年
10 广文;治疗肝病 阻断肝纤维化是关键[N];健康报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978