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半枝莲生物活性及相关化学成分研究

余建清  
【摘要】:半枝莲为唇形科植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don的干燥全草,分布在我国大部分地区,资源极其丰富。半枝莲有抗癌、抗炎、利尿等作用。但由于缺乏对半枝莲生物活性物质基础及其作用机制的研究,限制了半枝莲的开发利用。本课题从抗肿瘤、抗氧化及抗微生物活性方面对半枝莲的有效部位及有效成分进行了研究,为充分利用半枝莲资源,进行创新药物的研究和开发奠定基础。 1 抗肿瘤作用 以对肿瘤细胞生长的抑制作用为初筛指标,对半枝莲的抗肿瘤有效部位进行了研究。将半枝莲乙醇提取物用不同极性溶剂萃取,分为5个部位。其中,氯仿萃取物(CE-SB)作用最明显,进一步研究了CE-SB的体内外抗肿瘤作用。 采用了一系列检测细胞凋亡的方法研究了CE-SB诱导肝癌细胞Bel-7402的凋亡。结果显示,CE-SB可诱导Bel-7402细胞发生凋亡特征性的形态变化,如光镜下观察可见细胞逐渐变圆、细胞体积缩小等;通过Hoechst 33258对细胞核染色,可以看到染色质固缩、聚集,细胞核发生碎裂成为凋亡小体;提取DNA,进行琼脂糖凝胶电泳分析显示,经CE-SB处理过的细胞,形成凋亡特征性的DNA片段阶梯;流式细胞仪分析表明,经CE-SB处理过的细胞中出现G_1/G_0期前的亚二倍体峰(sub-G_1峰),即凋亡峰的出现,随着CE-SB的增加,凋亡率逐渐增加。对CE-SB处理过的Bel-7402细胞进行周期分析,结果表明,CE-SB对Bel-7402细胞S期影响较大,随着CE-SB浓度的增加,S期细胞数明显减小。 以丝裂霉素为阳性对照药,在CE-SB与丝裂霉素对肿瘤细胞达到相同抑制


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