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IFN-γ对小鼠破骨细胞前体CXCR4表达的调节及意义

喻晶  
【摘要】:目的 体外实验研究小鼠IFN-γ过表达慢病毒载体对RAW264.7细胞CXCR4表达的调节并观察小鼠IFN-γ过表达慢病毒载体感染胶原诱导类风湿关节炎(CIA)动物模型的影响 方法 1.使用小鼠IFN-γ过表达慢病毒载体感染RAW264.7细胞,在荧光显微镜下观察荧光表达情况,使用酶标记免疫吸附测定法(Elisa法)测定细胞上清IFN-γ浓度,使用western blot法检测细胞CXCR4表达。 2.6-8周龄的DBA/1 J雄性小鼠,将小鼠随机分为三组:未使用胶原干预组(正常组)、胶原干预组1(阴性对照病毒干预组)和胶原干预组2(小鼠IFN-γ过表达慢病毒干预组)。使用150ug牛源Ⅱ型胶原和等体积弗氏完全佐剂,将其充分乳化后在尾根皮内注射进行初次免疫,第21天后使用100ug牛源Ⅱ型胶原和等体积弗氏不完全佐剂充分乳化后进行加强免疫小鼠。在加强免疫同时尾静脉注射慢病毒。免疫过程中观察各肢体踝关节、足趾关节有无红肿、变形等。加强免疫后第30天处死小鼠,留取小鼠血浆和四肢骨组织。分别进行小鼠血浆Elisa检测和骨组织切片染色。 结果 1.小鼠IFN-γ过表达病毒能够感染RAW264.7细胞,并且使RAW264.7细胞表达IFN-γ浓度明显高于未感染组和阴性对照病毒感染组。 2. IFN-γ过表达病毒能够感染RAW264.7细胞,并且使RAW264.7细胞表达CXCR4浓度明显低于未感染组和阴性对照病毒感染组。 3.使用牛源Ⅱ型胶原、弗氏完全佐剂以及弗氏不完全佐剂免疫诱导的小鼠类风湿关节炎模型均出现单个或多个关节红肿;正常组小鼠各个关节均无关节红肿表现;小鼠IFN-y过表达慢病毒干预组病变关节的体征改变轻于阴性对照病毒干预组; 4. IFN-y过表达慢病毒干预组小鼠血浆IFN-y浓度高于正常组和阴性对照病毒干预组; 5. IFN-y过表达慢病毒干预组病变关节的病理改变轻于阴性对照病毒干预组。 结论 小鼠IFN-y过表达慢病毒载体能有效的感染破骨细胞前体RAW264.7细胞和感染胶原诱导的类风湿关节炎动物模型;感染后无论是体内还是体外的IFN-y浓度明显升高;IFN-y能显著降低破骨细胞前体CXCR4的表达;IFN-y能减轻胶原诱导的类风湿关节炎动物模型的关节病变程度。 目的: 了解武汉地区骨质疏松症的发病情况,为武汉地区骨质疏松症的防治提供依据。 方法: 对2004年1月至2008年12月在武汉市湖北省新华医院初次行骨密度检测的体检者11559例(年龄为20岁-99岁,其中男6434例,女5125例),采用美国LUNAR PIXI骨密度检测仪进行右侧足跟部骨密度检查,按不同检测年份、年龄、性别进行分组,分别计算各组的BMD值以及骨量减少、骨质疏松的患病率。 结果: 按各个检测年份或是不同年龄分组,无论是骨量正常组、骨量减少组还是骨质疏松组,同一组的男性与女性的BMD值之间均有显著性差异(P0.05)。2007年及2008年体检人群骨量减少和骨质疏松症的患病率均低于2004年(P0.05)。 结论: 女性比男性更易患骨质疏松症;2007年及2008年的骨量减少、骨质疏松患病率较2004年-2006年有所下降;随着年龄的增大,骨量减低、骨质疏松的患病率增高;女性50-岁组、男性60-岁骨质疏松发生率明显增多。


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