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A型肉毒毒素治疗良性前列腺增生症的实验研究

杨雄  
【摘要】:第一部分 大鼠前列腺增生模型的制备及组织学评估 目的:建立一种效果可靠、操作简单且周期短的大鼠前列腺增生模型,为进一步开展实验奠定基础。方法:我们采用去势后大鼠皮下注射丙酸睾酮4mg/kg/d的方法对大鼠进行前列腺增生模型的建立,通过对比不同造模时间前列腺大小及湿重、HE染色观察前列腺上皮细胞与间质细胞的增生情况,来了解最佳的造模时间及模型的可靠程度。结果:实验组大鼠去势并以4mg/kg/d皮下丙酸睾酮注射造模后,大鼠前列腺湿重与体积、前列腺指数均较对照组有明显上升,以造模21天组与28天组最为显著(P0.001),21天组与28天组之间各数值无显著性差异;HE染色证实造模21天组与造模28天组均能良好的形成前列腺上皮与间质增生模型。结论:SD大鼠去势后皮下注射丙酸睾酮4mg/kg/d,连续注射21天,形成前列腺上皮细胞与间质细胞均明显增生的模型。此法操作简单,效果可靠,且建模所需时间较短,是一种良好的大鼠前列腺增生模型制备方法。 第二部分 不同剂量A型肉毒毒素前列腺内注射实验及其组织学研究 目的:了解大鼠前列腺增生模型A型肉毒毒素多点注射后的变化及其细胞凋亡情况。方法:对建立好的前列腺增生模型大鼠前列腺内多点注射不同剂量的A型肉毒毒素,一周后收获前列腺标本,测量其湿重、体积,计算前列腺指数,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)了解其细胞凋亡情况。结果:大鼠前列腺内分别注射不同剂量的肉毒毒素一周后,前列腺湿重及体积均明显减小,以20U肉毒毒素组最为明显。TUNEL检测凋亡发现,肉毒毒素注射后前列腺细胞出现大量凋亡,细胞凋亡率与肉毒毒素剂量呈正相关。20U肉毒毒素注射组前列腺细胞的凋亡率高达(0.711±0.154),而对照组的细胞凋亡率仅为0.035±0.014,二者的差异有统计学意义(P0.01)。结论:肉毒毒素多点注射后,可诱导前列腺细胞发生凋亡,使前列腺重量及体积减小。 第三部分 A型肉毒毒素治疗前列腺增生症诱导凋亡机制的研究 目的:通过免疫组织化学研究,了解大鼠前列腺内肉毒毒素注射后激活细胞凋亡的可能原因。方法:使用免疫组织化学技术,对10U肉毒毒素注射大鼠的前列腺进行免疫组织化学研究,了解凋亡相关基因的表达情况,探讨肉毒毒素激活细胞凋亡的可能途径。结果:肉毒毒素注射后大鼠前列腺内,Bcl-2、Fas以及Caspase-3的表达均与前列腺增生组有显著性差异。其中Fas及Caspase-3的表达增加,而Bcl-2的表达减低。结论:前列腺内肉毒毒素注射后,可能通过抑制Bcl-2基因的表达,增强Fas及Caspase-3基因的表达来激活细胞凋亡,达到缩小前列腺的目的。


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