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运用全内反射荧光显微技术研究UNC-31/CAPS蛋白在囊泡锚定过程中的作用

明敏  
【摘要】:神经元与神经内分泌细胞胞吐和胞吞是生命活动的基础,和许多疾病如甲状腺功能亢进,巨人症,重症肌无力等密切相关。突触囊泡(Synaptic Vesicles,SVs)胞吐释放神经递质,而致密核心囊泡(Dense Core Vesicles,DCVs)依赖胞吐分泌激素。当前研究已经确定SVs和DCVs分泌机制是类似的,但SVs和DCVs特征上的差异,比如分泌事件发生的区域不同,SVs常发生在突触前膜高度特化的活跃区(active zone),DCVs的分泌却没有此类特殊的活跃区域,预示着这两种分泌的机制有所不同。 UNC-31/CAPS(Ca2+-dependent activator protein for secretion)蛋白是DCVs胞吐的重要调控因子,但其作用机理并不清楚。目前,我们已知UNC-31/CAPS有四个结构域(domain):C2,PH(pleckstrin homology),MHD(Munc homologue domain)和DCV binding domain。我们以线虫的原代神经元作为我们的研究模型,运用分子生物学的方法,在缺失unc-31基因的种系,注射全长cDNA或缺失上述任意结构域的cDNA,同时用特异的荧光标记物标记ALA神经元中的DCVs,采用全内反射荧光显微技术(Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy,TIRFM),研究囊泡胞吐过程中锚定(Docking)性质以及相关蛋白的功能。 TIRFM数据表明,UNC-31的缺失会影响囊泡锚定的动力学过程,并且其四个结构域都参与调控大囊泡锚定过程,缺一不可。


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1 明敏;运用全内反射荧光显微技术研究UNC-31/CAPS蛋白在囊泡锚定过程中的作用[D];华中科技大学;2009年
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