L-carnosine对NIT-1胰岛细胞功能、增殖和凋亡影响的研究

【摘要】：目的新近研究表明,L-carnosine可能是与糖尿病有关的一种保护因子,为此我们研究L-carnosine在高糖条件下对体外培养的NIT-1细胞胰岛素分泌功能,细胞增殖和凋亡的影响及机制。 方法1.对照组(C组:11.1mmol/L Glucose)和高糖组(H组:33.3mmol/L Glucose)对NIT-1细胞分别培养72h,放射免疫法测定在不同浓度糖和L-carnosine刺激下胰岛素分泌。 2.NIT-1细胞分四组:C(11.1mmol/L Glucose)、H (33.3mmol/L Glucose)、H+A(33.3mmol/L Glucose+1mmol/L L–carnosine)、H+B (33.3mmol/L Glucose+20 mmol/L L-carnosine),分别培养72h,BRDU检测细胞增殖率,流式细胞术检测其凋亡率,RT-PCR测定bcl-2和caspase-3mRNA的表达。 结果1.胰岛素释放:与C组相比较,H组整体水平下降;不同的刺激物下,C组和H组均为:无葡萄糖时,20mmol/L与0mmol/L L-carnosine刺激下相比显著增加(P0.01)。 2.细胞增殖率:H组较C组增加了63.59%±3.7%(P 0.01),H+A组较H组增加了23.44%±6.08%(P 0.01),H+B组较H组增加不明显(P 0.05);凋亡率:H组较C组增加了75.15%±7.61%(P 0.01),H+A组较H组减少了58.17%±6.92%(P 0.01),H+B组较H组也明显减少(P 0.01),但仍高于H+A组; 3.caspase-3mRNA的表达:H组较C组明显增加(P 0.05),H+A组与H组比较明显减少(P0.05),H+B组与H组相比减少不明显(P 0.05);bcl-2mRNA的表达:H组较C组明显减少(P 0.05),H+A组较H组明显增加(P 0.01),H+B组较H组增加不明显(P 0.05)。 结论1.长期高糖条件能使NIT-1细胞胰岛素分泌功能受损,L-carnosine在高浓度时可以单独刺激NIT-1细胞胰岛素的释放。 2.长期高糖条件下NIT-1细胞增殖凋亡均增加,但总体数量减少;低浓度的L-carnosine长期作用于NIT-1细胞可以增加其增殖减少凋亡,使总体数量增多; 3.caspase-3和bcl-2基因可能参与了高糖诱导NIT-1细胞的增殖与凋亡过程以及L-carnosine增加NIT-1细胞增殖、减少细胞凋亡的过程。