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心脏性猝死心传导系统的组织病理学及RyR2表达的免疫组织化学研究

王昊  
【摘要】:【研究背景】心脏性猝死(sudden cardiac death , SCD)是法医病理学研究和实践的重点和难点。虽然多数案例能找出致死性疾病,但仍有少数案例经详尽的法医病理学检查仍不能明确死因,被称为阴性解剖(negative autopsy)。对阴性解剖死亡前的症状进行深入的调查后常可发现提示心脏事件的征象,从而推测为心脏性猝死。综合案情和法医病理学检查结果,学者们普遍认为这类死亡可能与某些致死性心律失常性疾病有关。国内、外研究人员通过对尸检组织样本的分子生物学及实验动物的病理生理学研究,认为这些致死性心律失常性疾病与编码相应离子通道的基因的突变有关,而在某些心律失常性疾病中离子通道蛋白的表达和分布也出现异常。 心传导系统是启动和传导心电活动的组织,包括窦房结、房室结、希氏束、束支等。心传导系统的病变可直接导致心电活动紊乱,即心律失常。 Ryanodine Receptor 2 (RyR2)是心肌细胞肌浆网上主要的钙离子释放通道,在心肌兴奋—藕联活动中有重要作用。大量研究证实,RyR2的表达及功能异常可导致多种致死性心律失常性疾病。但已有的研究多为分子生物学方面的研究,侧重基因突变和基因、蛋白质表达的检测,这些方法虽然精确,但在法医病理学检案中因检测样本的不确定性而难以广泛应用。免疫组织化学技术对检材条件的要求较分子生物学方法低,且不需要特殊的仪器设备,法医病理学诊断中应用更方便。但目前国内、外未见利用免疫组织化学方法研究心脏性猝死的心传导系统中RyR2表达和分布的报道。 【目的】收集SCD案例的心传导系统组织,切片后经HE染色和免疫组织化学染色,观察窦房结、房室结及希氏束的病理形态学改变和RyR2的表达,并与非SCD组对比,探讨SCD组与非SCD组间心传导系统病理形态学改变及RyR2分布的差异性,试图为部分阴性解剖猝死案例的法医病理学诊断和研究提供参考。 【材料与方法】从华中科技大学同济医学院法医学系法医病理教研室2007-2010年尸检案例中,根据分组条件筛选2组,即SCD组和非SCD组。SCD组23例,为经系统法医病理学检查和案情调查确定为SCD的案例;非SCD组14例,死因包括机械性损伤、机械性窒息等。心传导系统取窦房结、房室结、希氏束3个部位,在HE观察的基础上进行RyR2的免疫组织化学染色,比较SCD者与非SCD者的病理形态学改变及免疫组织化学着色情况,并进行图像分析。 【结果】SCD组心传导系统主要病变有病理性纤维化或脂肪浸润、出血、血管壁病变;SCD组心传导系统病变率高于非SCD组;与非SCD组比较,SCD组RyR2的表达显著减少,在细胞间和细胞内的分布也有异常。 【结论】心脏性猝死常伴有心传导系统的病理形态学改变,对心传导系统的检查有助于心脏性猝死的诊断;心脏性猝死心律失常的机制可能与心传导系统的Ca~(2+)调控有关,RyR2的免疫组织化学染色可能有助于心脏性猝死的诊断。


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