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抗AT1受体抗体对自发性高血压大鼠血压和肾脏的影响

陈明  
【摘要】: 目的:观察血管紧张素II的1型受体(AT1受体)胞外的不同肽段主动免疫的自发性高血压大鼠(SHR)对血压和肾脏的影响。 方法:根据大鼠AT1受体胞外肽段氨基酸序列设计合成多肽片段编号为ATR12181、ATR11188、ATR13275和ATR13263。合成的短肽与破伤风内毒素( TT)偶联作为抗原,主动SHR。5周龄雄性SHR随机分为5组,4组为主动免疫组,①ATR12181组,n=8②ATR13275组,n=6③ATR11188组,n=6④ATR13263组,n=6。免疫共6次,为第3、5、7、9、13、17周。对照组(n=7)皮下注射弗氏佐剂。所有SHR实验过程中动态监测血压和抗体滴度。于25周末处死动物,留取血、肾脏组织。从血液中提取相应的抗体,用免疫荧光的方法检测抗体是否能结合到培养的动脉平滑肌(VSMC)细胞膜上。观察肾脏组织光镜、电镜下形态的变化,并对肾脏组织原癌基因c-fos、c-jun mRNA表达水平用RT-PCR法进行检测。 结果: 4组免疫组均产生针对特定短肽的高滴度抗体。第5周时,体内抗体滴度开始上升,在第13周-17周抗体滴度达到峰值,并在体内维持一定浓度到实验结束。免疫荧光结果表明4组抗体均结合到培养的动脉平滑肌细胞膜上,呈阳性反应,对照组的结果为阴性。ATR12181组血压在第9周时开始较对照组下降,在第13周收缩压水平趋于平稳,为179.0±13.6mmHg较对照组188.0±9.9mmHg明显下降,P0.05,ATR11188、ATR13275和ATR13263与对照组相比没有显著性差异。肾脏的HE染色、Masson染色及电镜结果表明,ATR12181组相比对照组肾脏病理变化减轻,而ATR11188组相比对照组电镜下超微结构病变加重,ATR13275组、ATR13263组与对照组相比无明显差别。肾组织RT-PCR结果显示,ATR12181组c-fos、c-jun表达水平明显低于对照组(P0.05),ATR11188组c-fos、c-jun表达水平明显高于对照组(P0.05),其他两组与对照组无显著性差异。 结论:用AT1受体胞外不同肽段免疫可产生的不同特异性抗体,不同抗体对血压和肾脏可产生不同的影响。抗ATR12181抗体使SHR血压降低,肾脏病理变化明显减轻,原癌基因表达水平降低,对肾脏有一定的保护作用。抗ATR11188抗体加重SHR肾脏病理变化,原癌基因表达水平升高。


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