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集胞藻PCC 6803apcF突变体的构建及性质研究

邓黎黎  
【摘要】: 光合作用是地球上最重要的化学反应,是所有生命活动能量的最终来源。光合调控也是蓝藻基因工程的一个热点,apcF是光反应中心重要亚基。apcF是与别藻蓝蛋白相关的一个基因,它所对应的氨基酸(β18.5)可以帮助别藻蓝蛋白进行光能传递。能量在光合作用系统内的传递顺序为PE→PC→APC→Chla,在从APC到Chla的传递过程中,需要把能量分别传递到光反应中心PSⅠ和光反应中心PSⅡ中,把能量从APC传递到PSⅡ的过程中,apcF基因所编码的β18.5起到了相当关键的作用。 本研究构建了含有同源臂但缺失目的基因apcF及报告基因Kana的pBlue-L`-apcF△-kana-R`载体,通过自然转化单细胞集胞藻PCC6803,用含卡那霉素的BG11平板筛选,BG11液体培养基放大培养,得到了具有抗卡那霉素抗性的突变藻株。提藻总DNA,经PCR检测,证实apcF基因已经定向敲除。 本实验还测定了室温吸收光谱和荧光光谱及各项生理生化指标,实验表明缺失apcF的突变藻株生长速度明显低于野生型,Chla含量最高在对数初期高于野生型18%,PC含量在对数初期比野生型下降近3倍,光合作用在对数末期比野生型下降20%左右,呼吸作用在延滞期比野生型高3.5倍,本文还推断了蓝藻光合作用能量传递中的一些机制。


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