收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肝癌异常表达microRNAs的鉴定、功能、作用靶点以及治疗潜力研究

何星星  
【摘要】: 目的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma; HCC;肝癌)是一种全球性人类恶性肿瘤,具有高发病率和高死亡率特点,但缺乏有效的靶向治疗。当前诊断肝癌的生物标志物主要是甲胎蛋白(AFP),但有20%到40%的患者AFP呈阴性或低度阳性。手术切除或肝移植仍然是目前治疗肝癌的首选,但只有不到20%的肝癌病人适合外科治疗,并且术后复发率高,5年存活率只有30%到40%。肝癌病人的结局如此凄凉的主要原因是我们对肝癌发病的分子机制仍知之甚少和缺乏有效的靶向治疗。因此,致力于阐明肝癌的发生发展机制,探索新的早期诊断生物标志物和更有效的治疗方法是一项十分紧迫的研究课题。MicroRNAs (miRNAs)是近年新起的一个研究领域,为一组保守的非编码小RNA,通过转录后水平调控基因的表达。MiRNAs表达水平的改变能够调节肿瘤发生相关的重要生物学过程,因而系统评价某种确定表型肿瘤miRNA表达谱的变化将有利于我们更深入的理解肿瘤发生发展的机制。本研究拟应用肝癌细胞细胞株与原代正常肝细胞miRNA表达谱差异这一全新的策略鉴定出肝癌异常表达的miRNAs,并进一步系统的研究这些miRNAs的功能、作用靶点以及治疗潜力。 方法应用Agilent human miRNA array分析7株肝癌细胞株和3例原代正常肝细胞的miRNA表达谱,通过比较得到肝癌中异常表达的miRNAs,并用TaqMan qRT-PCR进行确认。在细胞水平上转染miRNA前体或抑制剂以及相应的对照miRNA,通过细胞增殖、细胞周期和凋亡分析、细胞迁移与侵袭以及克隆形成实验,探讨这些异常表达的miRNAs在肝癌发生发展中的作用。利用生物信息学技术如miRBase、TargetScan、PicTar等数据库,预测miRNA的作用靶点,再通过SYBR Green定量PCR、Western Blot以及Luciferase精确靶点实验,验证肝癌相关miRNAs的作用靶点,从而阐明这些异常表达的miRNAs在肝癌发生中,类似于抑癌基因或癌基因的分子作用机制。利用肝癌裸鼠移植瘤模型,探索这些异常表达的miRNAs分子或其拮抗剂在肝癌治疗中的潜力。 结果通过比较肝癌细胞株与原代正常肝细胞的miRNA表达谱差异获得肝癌异常表达miRNAs 37个(2-fold change,P 0.05)。我们证实上调的miR-221和下调的miR-375通过调控细胞增殖、周期、凋亡、迁移侵袭以及克隆形成参与了肝癌的发生发展。miR-221作用其靶点BMF、BBC3和ANGPTL2而作用类似于癌基因,miR-375作用其靶点LAMC1和PDGFC而作用类似于抑癌基因。治疗性的应用慢病毒介导的anti-miR-221或胆固醇修饰的miR-375类似物可以有效的抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长。 结论通过比较肝癌细胞株与原代正常肝细胞的miRNA表达谱差异可以高效鉴定出肝癌特异性的miRNAs。这些异常表达的miRNAs通过作用其靶点,调节了肿瘤发生相关的重要生物学过程,从而参与了肝癌的发生和发展。实验结果显示慢病毒介导的anti-miR-221或胆固醇修饰的miR-375类似物对治疗肝癌有良好的潜力。所有这些,使我们相信基于miRNAs的诊断和治疗在抗肝癌研究中具有诱人的前景。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李莉;洪晓绿;李刚;;MicroRNAs与病毒性肝炎的研究进展[J];热带医学杂志;2011年07期
2 张书葵;张治红;;高强度超生聚焦刀治疗肝癌的临床护理[J];全科护理;2011年23期
3 李泽夏;刘海玲;吕辉;吴晓英;;与卵巢癌转移有关的microRNA研究进展[J];现代生物医学进展;2011年14期
4 张羡珠;蓝桂香;肖红梅;;肝动脉造影灌注栓塞术治疗39例肝癌的护理[J];全科护理;2011年20期
5 覃志伟;王宗华;邹利全;刘志鹏;熊晓峰;李学成;陈陵;;负载人miR-29慢病毒的包装鉴定及对人胃癌细胞株增殖的影响[J];中国肿瘤;2011年06期
6 卢小丽;廉姜芳;;microRNAs与心力衰竭的研究进展[J];医学综述;2011年13期
7 翟庆娜;周亮;余振东;唐爱发;王勇;桂耀庭;;大规模平行测序技术筛选人肾细胞癌组织中差异表达microRNAs及其验证[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2011年03期
8 吴志;;别让乙肝“变”肝癌[J];健康人生;2010年02期
9 卫巍;王兴鹏;;microRNAs在胰腺癌中的研究进展[J];同济大学学报(医学版);2011年03期
10 王芬芬;陈晓光;张娟;张超英;宋扬;崔莲花;;肝癌病人血浆叶酸和维生素B_(12)水平变化及其意义[J];青岛大学医学院学报;2011年04期
11 游雪梅;莫新少;詹爱丁;钟丽;陈似霞;陈德凤;;不同肠道准备方法对肝癌术后血清胆红素值影响的临床研究[J];护理研究;2011年16期
12 李波;;干细胞移植治疗肝癌患者11例疗效分析[J];求医问药(下半月);2011年03期
13 段娇博;付菊芳;宋汉歌;靳雁;杨艳;张敏;孙静;;原发性肝癌病人的需求评估研究[J];护理研究;2011年24期
14 杜海磊;杨卫平;陈聆;施敏敏;汪洋;李军;刘卓然;陈拥军;严佶祺;匡洁;李勤裕;Seewoo Varun;邱伟华;;索拉非尼抑制肝癌细胞增殖中自噬的作用及其机制[J];外科理论与实践;2011年03期
15 陈五军;尹凯;赵国军;唐朝克;;microRNAs——脂质代谢调控新机制[J];生物化学与生物物理进展;2011年09期
16 冯新星;孙凯;宋雷;;microRNAs在代谢综合征中的研究进展[J];中国分子心脏病学杂志;2011年04期
17 吕静;杨绪侠;;肝癌介入手术治疗的配合及护理[J];全科护理;2011年18期
18 王海英;唐丽萍;廖培娇;;原发性肝癌经皮消融治疗术后并发症的护理[J];现代临床护理;2011年08期
19 刘志学;;术惠病人,患者口碑树起大医风采——记中国医学科学院肿瘤医院腹部肿瘤外科副主任吴健雄教授[J];中国医药导报;2011年16期
20 蔡秀军;沈柏用;;原发性肝癌免疫治疗进展[J];中国实用外科杂志;2011年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 余林欢;;肝癌病人的心理分析及对策[A];全国外科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2002年
2 徐克成;牛立志;;肝癌经皮微创消融治疗[A];肝脏病防治学术研讨会及新进展学习班专刊[C];2005年
3 张道平;沈宇清;张爱凤;缪凤琴;张建琼;;ARL-1在肝癌中表达模式的初步研究[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
4 吴倩;;1例91岁肝右前叶肝癌病人在CT引导下射频消融术的心理护理[A];2010中华医学会影像技术分会第十八次全国学术大会论文集[C];2010年
5 刘彦青;刘圆;;肝癌病人的饮食及心理护理[A];全国传染病护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2007年
6 郑树森;;肝癌的诊治进展[A];2009年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2009年
7 王红军;;肝癌病人的出院指导[A];河南省肿瘤全科护理学术交流会暨专科护士培训班资料汇编[C];2006年
8 殷志荣;;肝癌病人饮食护理的重要性[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2008年
9 陆益钱;;肝癌病人的健康教育体会[A];第一届全国肿瘤护理学术会议论文集[C];2001年
10 罗鸿萍;张秀芝;;216例肝癌病人行射频消融治疗的护理体会[A];全国第三届重症监护护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 何星星;肝癌异常表达microRNAs的鉴定、功能、作用靶点以及治疗潜力研究[D];华中科技大学;2010年
2 宋培明;氨基酸同位素标记技术在肝癌疾病蛋白质组学研究中的应用[D];上海交通大学;2009年
3 周可树;MicroRNAs在慢性淋巴增殖性疾病中的表达及其在慢性淋巴细胞白血病预后中的意义研究[D];中国协和医科大学;2010年
4 惠博;自噬溶酶体通路及泛素蛋白酶体通路在肝癌药物干预中的相关作用研究[D];复旦大学;2011年
5 徐永锋;肝癌局部免疫微环境状态以及PEBP1分子表达影响肝癌复发转移的相关研究[D];复旦大学;2010年
6 孙海香;缺氧诱导因子(HIF-2α)通过TFDP3诱导肝癌细胞凋亡分子机制及临床研究[D];复旦大学;2011年
7 高刚;氡致肺癌及肺损伤相关microRNAs的研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年
8 戴陈新;HIF-1α对肝癌复发转移及肝癌内外相关微环境的影响[D];复旦大学;2010年
9 黄华;癌旁免疫炎症相关因子及癌内骨桥蛋白表达与肝癌术后复发关系的研究[D];复旦大学;2010年
10 邢春阳;肝癌蛋白作用分层作用网络模型的建立及RNF43在肝癌发生发展中的作用研究[D];浙江大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李振宇;CD147、MMP9在肝癌表达及临床意义[D];浙江大学;2010年
2 罗美;CD147在肝癌肝移植患者组织中的表达及其预后意义[D];辽宁医学院;2011年
3 徐赟;LINE-1甲基化与肝癌临床病理和预后关系[D];第二军医大学;2010年
4 胡捷;血浆循环DNA变异在预测肝癌肝移植预后中的价值研究[D];复旦大学;2010年
5 张萦斐;GRP78在原发性多结节肝癌中的表达及意义[D];广西医科大学;2010年
6 杨平华;多发性肝癌肝切除术指征的探讨[D];第二军医大学;2011年
7 陈根;非解剖性肝切除治疗肝癌合并肝硬化病人的疗效和预后因素分析[D];华中科技大学;2010年
8 郭媛媛;肝癌中RACK1对JNK通路的调控作用及机制探讨[D];河南大学;2011年
9 孙鼎强;甘氨双唑钠在肝癌介入治疗中的应用及临床对照研究[D];泸州医学院;2010年
10 李有骏;中医药治疗肝癌相关文献的证治用药之规律研究[D];南京中医药大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李荔;周钢桥:易得肝癌的基因[N];北京科技报;2010年
2 镇江市第三人民医院肝胆外科 主任医师 李宏欣;不同临床分期肝癌病人治疗方法的选择[N];镇江日报;2010年
3 副主任医师 周德瑞;肝癌病人能生育喂奶吗[N];卫生与生活报;2007年
4 本报记者 喻京英;提高抗癌意识最重要[N];人民日报海外版;2011年
5 本报记者 苗蓓 本报通讯员 李兆玉;托马斯·肯瑟勒:为了友谊而来[N];南通日报;2011年
6 庄庆平;识破肝癌的“伪装”[N];家庭医生报;2006年
7 第二军医大学附属东方肝胆外科医院副院长 教授 张柏和;肝癌,重在病因预防[N];家庭医生报;2005年
8 本报记者 许琦敏 陈青 实习生 李婷;病人“逼”我创新[N];文汇报;2006年
9 印高乐;干扰素降低肝癌病人开刀后复发几率[N];医药经济报;2002年
10 记者 胡德荣;肝癌复发转移或可早发现[N];健康报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978