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硅胶柱层析纯化灵菌红素的工艺优化及动力学研究

胡凯  
【摘要】:灵菌红素是具有由三个吡咯环重组的甲氧基吡咯架子结构的次级代谢物。出于它拥有特殊的抗癌活性被广大研究机构重视。距今为止,紫外分光光度计法是依然是测定灵菌红素的首要方法。想要快速精准的测定发酵液中灵菌红素的含量,本实验过程中采纳的流动相体系是水和甲醇的高效液相色谱法来快速测定灵菌红素,同时利用制备型高效液相色谱少量制备高纯度样品。本课题的研究目的是通过对硅胶柱层析纯化灵菌红素的动力学过程进行研究,指导使用制备型高效液相色谱提纯出纯度较高的灵菌红素。(1)通过对灵菌红素的吸附性能进行实验研究与分析,利用Langmuir模型灵菌红素的等温吸附曲线进行较好了拟合,相关系数R2可以达到0.9866,选用动力学准二级模型能较好拟合吸附过程。洗脱曲线能较好拟合灵菌红素的洗脱过程,洗脱率可达93.45%。(2)通过对灵菌红素吸附动力学探讨,从而指导制备型高效液相色谱最佳条件研究,通过对流动相、流速、进样量、温度等条件的调节与摸索,结论:SB-C18(9.5mm×2.5dm,5×10-3mm)的制备型高效液相色谱的最好制备条件是流动相结构(甲醇:水=51:49)、流动相速率(2×10-3L/min)、进样量(2×10-5L)、温度(25℃)。制备灵菌红素的纯度较高,速度较快。


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