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硒营养强化重组米中L-硒-甲基硒代半胱氨酸检测方法的研究

宋天真  
【摘要】:本项目以硒营养强化重组米为原料,建立和优化了硒营养强化重组米中总硒的紫外可见光谱检测法和L-硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)的液相色谱质谱联用。本项目重点研究外源添加硒营养强化重组米中总硒及有机硒的检测技术及优化检测方法,可为食品中有机硒定性定量分析提供技术参考。并以检测技术为手段,研究了挤压工艺过程中,高温、高压、高剪切力环境作用是否对硒营养强化重组米中营养强化剂MSC的稳定性产生影响。主要研究结论如下:(一)确定了硒营养强化重组米的总硒检测方法及试验参数硒营养强化重组米中的总硒含量采用紫外光谱法进行测定:0.5000 g硒营养强化重组米样品消解后在pH 1.5时加入0.5 ml浓度为5%的EDTA-2Na溶液和1.5 ml浓度为1%的邻苯二胺溶液,定容10 ml,反应40 min;而后反应混合物使用环己烷震荡萃取3 min,通过检测萃取液中硒络合物3,4-苯并-1,2,5-重氮苤硒脑在波长330 nm的吸收来测定硒营养强化重组米的总硒含量。结果表明在优化的测定条件下,在1μg/ml~5μg/ml浓度范围线性回归方程为A=0.1285c+0.0053,R~2=0.9982,方法的加标回收率为95.56~111.20%。(二)建立了测定硒营养强化重组米中的外源有机硒MSC含量的高效液相色谱质谱联用法(HPLC-MS/MS)硒营养强化重组米中的外源有机硒MSC含量的测定采用HPLC-MS/MS:室温下,将硒营养强化重组米粉碎后过120目筛,然后采用乙腈水溶液(v:v=1:1),超声提取70 min时提取效果最佳。继而选用Themo AQUASIL C18色谱柱(150×2.1mm,3μm),以5%乙腈水溶液(0.01%甲酸)和95%乙腈水溶液(0.01%甲酸)为流动相进行梯度洗脱。采用多反应监测(MRM))正离子模式(m/z 183.99→166.96)进行MSC的定量分析。结果表明在最佳的检测条件下,标准曲线在20 ng/ml~500 ng/ml浓度范围线性良好,回归方程为A=2449.9c-5003.8,R~2=1,检测限为1.36 ng/ml。方法的加标回收率为95.62%~99.35%。(三)研究了硒营养强化重组米制作的工艺参数中挤压温度对MSC稳定性的影响为了同时满足能够制作出成型的硒营养强化重组米,固定其他温区的温度,改变三区的温度,研究加工过程中温度对硒营养强化重组米中MSC的影响。结果显示,制备工艺中的挤压温度对硒营养强化重组米的总硒及甲基硒代半胱氨酸稳定性影响并不大。验证了硒营养强化重组米最初设定的双螺杆挤压机工艺条件可以在制作品质优良的重组米的前提下添加的营养强化剂MSC稳定性良好。


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