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蒽醌类化合物抗菌及抗肿瘤生物活性的研究

郑言博  
【摘要】:蒽醌类化合物在中药中较为常见,尤其在蓼科蓼亚科植物中广泛的存在,除高等植物外,它们还存在于低等植物地衣类和菌类的代谢产物中。各种蒽醌及其苷都具有多方面的生物活性,本课题是在完成蒽醌类化合物标准物质的研制和论证的基础上,进一步测试它们的抗菌和抗肿瘤生物活性,以期利用成分分析结合生物活性测试的方法,评估其在中药材功效作用中的重要性,从多角度科学地分析和论述中药材的质量。尝试从“成分”和“活性”两个方面诠释中药材的成分与功效状况,全面反映中药材的品质,以此提升此类中药材安全有效的用药水平,也为蒽醌类物质的进一步研究和开发提供一定依据。 本课题采用药敏纸片法实验,噻唑蓝(MTT)活细胞染色法实验,磷脂结合蛋白V (膜联蛋白V即Annexin V)及碘化丙啶(PI)双染法实验和碘化丙啶(PI)单染法实验研究14种蒽醌类化合物对7种常见致病性细菌、3种常见致病性真菌、人体肝癌细胞Bel-7402的抗菌和抗肿瘤方面的生物活性,分别以头孢曲松钠,氟康唑注射液和盐酸多柔比星(阿霉素)为阳性对照,筛选出具有抗菌和抗肿瘤活性的蒽醌类化合物,并分析其活性的强弱。 课题实验结果如述:药敏纸片法选取四个药物浓度(0.5mg/mL,1.0mg/mL,1.5mg/mL和2.0mg/mL)的抗菌实验,筛选出了对细/真菌有抗菌的活性的蒽醌类化合物,分别是二氢丹参酮I、LG02、雷公藤红素,与阳性对照药对比得到有效样品的药效强弱和最小抑菌浓度(MIC)及最佳抑菌浓度(BAC)。抗肿瘤生物活性实验包括MTT染色法、Annexin/PI双染法、PI单染法实验,选取雷公藤红素,隐丹参酮,二氢丹参酮I,丹参酮I,丹参酮IIA,异丁酰紫草素,大黄酚和大黄素甲醚进行研究。MTT染色法选取药物浓度分别为1μg/mL,5μg/mL,10μg/mL和30μg/mL,其结果显示雷公藤红素、二氢丹参酮I、丹参酮IIA和异丁酰紫草素四个药样对人体肝癌细胞Bel-7402有抗肿瘤生物活性作用;Annexin/PI双染法以药物浓度30μg/mL进行研究,通过分析细胞凋亡率可知抗肿瘤药效强弱依次为雷公藤红素异丁酰紫草素阿霉素丹参酮IIA二氢丹参酮I;PI单染法实验验证出药物抗肿瘤的作用机制有可能是通过抑制细胞增殖即细胞周期达到使肿瘤细胞凋亡的目的。


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