收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

水稻Tos17突变体库的创建和应用

马振  
【摘要】: 利用突变体来克隆基因是功能基因组研究的重要策略,目前很多研究机构都在用各种方法创建突变体库,并且从突变体中分离到了很多重要的基因。本研究利用水稻中的一个反转录转座子Tos17创建水稻突变体库。Tos17是一个“复制-粘贴”型的转座子,在组培的情况下被激活产生新的拷贝插入到基因组中,而分化成植株后Tos17的转座活性消失,新的拷贝能稳定遗传。为了证明利用Tos17创建突变体来分离克隆基因的方法的有效性,本研究对T1代家系进行了正向遗传学的筛选,目的是寻找与Tos17插入位点共分离的家系,为基因分离和克隆奠定基础。此外通过接头PCR的方法分离Tos17侧翼序列,不仅能更加深入的了解Tos17在水稻基因组中的分布,而且根据侧翼序列提供的基因信息,可以广泛的开展反向遗传学的研究。主要研究结果如下: 1.共计产生独立的Tos17突变体15,543株。通过对Tos17拷贝数的Southern检测,发现中花11中Tos17原始拷贝数为4,经过三个月的组培时间,平均每株含有新Tos17插入拷贝1.4个,整个突变体库中约含有插入位点21760个。 2.利用接头PCR的方法和TAIL-PCR的方法分离到能精确定位到水稻染色体上的Tos17侧翼序列601条,其中非重复的侧翼序列为524条。 3.从侧翼序列的分析的结果来看,Tos17偏向于插入较大的染色体,插入数目和染色体的长度存在显著的正相关(r=0.717,P0.01)。而在基因组区间内,我们发现Tos17显著偏爱于插入基因区(SR=10.85),而显著不偏爱于插入基因间隔区(-8.88)和转座因子相关区(-3.68)。在基因区域内,Tos17偏爱插入基因区(SR=4.55)而不偏向插入ATG上游1kb区(SR=-4.62)和翻译终止密码子下游500bp(SR=-3.25)这两个区。在基因编码区内,Tos17显著偏爱插入基因的外显子区域(SR=2.48)。 4.2008年夏季对Tos17插入突变体T1代1,881个家系进行了筛选,结果显示整个田间有突变表型的频率为5.69%,主要突变表型有矮化、不育、白化、黄化、晚抽穗等。对10个家系中的12个插入位点进行了PCR验证,发现有10个Tos17插入位点是可以确认是正确的。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张向前;刘芳;朱海涛;李晓燕;曾瑞珍;;水稻Ds插入淡绿叶突变体的鉴定和遗传分析[J];遗传;2009年09期
2 郭飞;卢杰;魏斌;张自立;;拟南芥抗镧突变体的筛选及初步鉴定[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年11期
3 魏然;阮颖;王莹;刘春林;;化学诱导激活系统的研究进展[J];作物研究;2006年05期
4 赵天祥;孔秀英;周荣华;高双成;贾继增;;EMS诱变六倍体小麦偃展4110的形态突变体鉴定与分析[J];中国农业科学;2009年03期
5 贺云霞;徐慧;叶飞;孙慧玲;王宏俊;龚玉梅;张莉;黄秀芬;张培君;;副猪嗜血杆菌EZ-Tn5转座子插入突变体库的构建及减毒株的筛选(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2011年02期
6 黄国庆,姚泉洪;高通量筛选蛋白质突变体库方法的研究进展[J];上海农业学报;2004年02期
7 陈亮;储黄伟;袁政;潘爱虎;梁婉琪;黄海;沈明山;张大兵;陈亮;;~(60)Co-γRay射线诱变水稻突变体的分离和遗传学初步分析[J];厦门大学学报(自然科学版);2006年S1期
8 杨松涛;张涛;郑家奎;;水稻突变体库研究进展[J];中国农学通报;2010年19期
9 宛淑艳;张治国;赵桂兰;;基因激活标签体系及其在植物功能基因组学研究中的应用[J];中国农学通报;2008年04期
10 张晓勤;薛大伟;周伟辉;邬飞波;张国平;;用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变的大麦浙农大3号突变体的筛选和鉴定[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2011年02期
11 韩锁义;杨玛丽;陈远东;于静静;赵团结;盖钧镒;喻德跃;;大豆“南农94-16”突变体库的构建及部分性状分析[J];核农学报;2008年02期
12 陈远东;喻德跃;;EMS诱发大豆“南农94-16”突变体库的扩建及部分突变体的SSR分析[J];大豆科学;2009年04期
13 孙万刚;;拟南芥突变体构建方法及目的基因分离鉴定技术[J];安徽农业科学;2010年18期
14 李伟;智慧;王永芳;李海权;刁现民;;谷子EMS诱变的处理条件分析[J];河北农业科学;2010年11期
15 贺云霞;徐慧;叶飞;孙慧玲;王宏俊;龚玉梅;张莉;黄秀芬;张培君;;副猪嗜血杆菌EZ-Tn5转座子插入突变体库的构建及减毒株的筛选[J];安徽农业科学;2011年13期
16 李琳琳;王凤茹;韩建民;董金皋;;拟南芥干旱敏感突变体的筛选及其对干旱胁迫的响应[J];河北农业大学学报;2011年04期
17 烟草突变体库创制、筛选与分析项目组;李凤霞;晁江涛;徐建华;;烟草突变体库创制、筛选与分析项目中期检查会议在青岛召开[J];中国烟草科学;2011年04期
18 刘辉;赵竹青;陈涛;;水稻T-DNA插入突变体库筛选及其突变特征研究[J];江苏农业科学;2007年01期
19 王凤华;李光远;;T-DNA插入突变及其研究进展[J];河南农业科学;2007年06期
20 申佩弘;晁红军;宋修鹏;武波;唐咸来;;利用双标记mTn5构建甲基杆菌MB200突变体库的研究[J];山西农业科学;2008年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 贾娇;邢继红;董金皋;;拟南芥抗核盘菌突变体的筛选[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
2 姚姿婷;蓝秀万;周燕;周辉;商巾杰;陈保善;;大规模板栗疫病菌突变体库的构建[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 胡瑞学;刘金亮;张世宏;赵文生;彭友良;潘洪玉;;尖孢镰刀菌蓖麻专化型突变体库的构建及其部分突变子的筛选[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
4 周鹏;潘丽;刘丽萍;王子月;黄俊斌;;希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体库的构建与筛选[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
5 佟星;吴宝美;赵波;叶剑;刘红霞;曾潮武;濮绍京;万平;;小豆突变体库构建及突变体筛选[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
6 肖雪琼;谢甲涛;付艳苹;程家森;姜道宏;李国庆;易先宏;;核盘菌致病缺陷型突变体筛选及其分子致病机理初步研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
7 佟向军;夏梽丹;祖尧;Helena Telfer;胡婧;于静怡;刘欢;张泉;苏都莫日根;林硕;张博;;通过以斑马鱼为模式的遗传筛选研究脊椎动物细胞分化与发育[A];2010·第一届斑马鱼学术研讨会论文摘要集[C];2010年
8 ;植物分子遗传国家重点实验室[A];培育生物产业,发展绿色经济——第五届中国生物产业大会·2011基因科学与产业发展论坛会刊[C];2011年
9 杨哲;郭慧;邢来君;李明春;;根癌农杆菌介导法选育甘油氧化酶高产菌株的初步研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
10 王伟伟;张桂珍;刘金亮;张世宏;赵文生;彭友良;潘洪玉;;玉米大斑病菌T-DNA插入突变体库构建及致病相关基因的克隆[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邵勤;一个新的甜瓜叶色黄化突变体研究[D];东北农业大学;2013年
2 李宁;小麦黄绿突变体特性研究与遗传分析[D];中国农业科学院;2012年
3 吴宇;拟南芥耐低硫突变体高通量筛选的建立和鉴定[D];中国科学技术大学;2010年
4 张治国;水稻标签库突变体筛选与分析[D];中国农业科学院;2006年
5 韩锁义;大豆突变体库的构建及子叶折叠突变相关基因的初步研究[D];南京农业大学;2008年
6 侯蕾;拟南芥盐敏感突变体的筛选鉴定及蛋白酶体β5亚基与植物抗氧化性的相关性研究[D];山东师范大学;2012年
7 徐荣旗;棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体表型特征及侧翼序列分析[D];中国农业科学院;2009年
8 周小静;拟南芥RETARDED ROOT GROWTH基因的图位克隆及功能分析[D];华中农业大学;2011年
9 王伟平;水稻包穗突变体M893的形态、生理及遗传特性研究[D];湖南农业大学;2010年
10 刘文真;三个水稻叶色突变体的鉴定与基因克隆[D];浙江大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马振;水稻Tos17突变体库的创建和应用[D];华中农业大学;2010年
2 王振宇;拟南芥光周期敏感型多效突变体ldd1的表型及遗传分析[D];兰州大学;2010年
3 李雪华;大豆突变体库的初步构建及突变类型的鉴定[D];南京农业大学;2003年
4 吕明;芥菜型油菜黄化突变体L638-y叶片缺绿的生化机制探讨[D];西北农林科技大学;2010年
5 李瑞清;水稻白化转绿突变体G_9的特性分析和基因定位研究[D];安徽农业大学;2010年
6 唐京生;农杆菌介导水稻转化系统的优化及水稻T-DNA插入突变体库的初步建立[D];四川大学;2002年
7 沈年伟;水稻半卷叶突变体的遗传分析与基因定位[D];中国农业科学院;2011年
8 胡时开;一个水稻矮化迟抽穗突变体(lhdd)的遗传分析与基因的精细定位[D];中国农业科学院;2010年
9 闫双勇;水稻T-DNA插入突变体库的构建与初步分析[D];四川农业大学;2004年
10 柴振光;盐芥激活标签突变体库的构建及盐芥转座子标签突变体的筛选[D];山东师范大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 记者 王丹;我国建成大型小鼠基因突变体库[N];健康报;2010年
2 付毅飞;给基因装上“开关”[N];科技日报;2004年
3 本报记者 齐冰;2003,生物科技成果多[N];健康时报;2003年
4 本报记者 李鹏;李传友:当植物面临逆境[N];北京科技报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978