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黄瓜再生体系的建立及耐热材料的筛选

秦华伟  
【摘要】: 黄瓜(Cucumis sativus L.)是世界上一种重要的蔬菜。黄瓜喜温怕热,随着全球变暖,温室效应的日益严重,选择耐热性品种成了当务之急。黄瓜的遗传基础狭窄,使常规育种工作量大,但效率低,浪费很多的人力和物力,而耐热突变体的离体筛选可以在人工模拟高温的环境中进行定向选择,提高育种效率。本实验从再生体系的建立、耐热突变体的筛选和耐热体细胞无性系的鉴定进行研究,进而获得耐热性的材料。主要结果如下: 1再生体系的建立 以多代自交系07X-2、07X-3(耐热性不同)为材料,通过苗龄、子叶大小、IAA、NAA和6-BA五个方面,对愈伤组织的诱导进行研究。结果表明:07X-2黄瓜在苗龄为6d,切去1/2子叶大小时在MS+0.1mg/L IAA+1.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA的培养基上出愈率最高并且质量好;07X-3黄瓜在苗龄为7d,切去1/2子叶大小时在MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA的培养基上出愈率最高并且质量好。 将绿色紧实的07X-2黄瓜愈伤组织接种到附加不同激素组合的MS培养基中,进行芽的诱导。结果表明:07X-2黄瓜的愈伤组织在MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+3.0mg/L AgNO3的培养基上芽诱导率最高。 选取07X-2黄瓜大小一致的诱导芽,每2-3个芽分成一簇,将这些芽转接到含有不同质量浓度6-BA或者KT的MS培养基中,筛选芽伸长的最佳激素浓度。结果表明:在附加0.05 mg/L 6-BA的MS培养基上芽生长快并且质量高。 2耐热突变体的离体筛选 将07X-3黄瓜绿色紧实的愈伤组织放入,38℃、42℃、45℃的胁迫温度下进行高温处理,处理时间分别为8h、12h、16h、20h。结果表明:最佳胁迫处理条件为45℃,12h,此时愈伤的存活率达到半致死剂量以下且存活率比较高,适合进行耐热体细胞无性系变异的筛选。 07X-2、07X-3黄瓜的愈伤组织经过逐步高温处理法和直接高温处理法处理后,将存活的愈伤组织再生成苗。结果发现:两种处理方法都能显著降低愈伤组织的存活率,延长芽诱导的时间。 3耐热体细胞无性系的初步鉴定 在大棚中,对母株、再生植株的D1代、耐热性再生植株进行热胁迫处理,室内测其生理生化指标。结果表明:07X-2耐热再生植株的耐热性都比母株强;07X-3耐热再生植株的耐热性有20%的比母株强。07X-2再生植株的D1代的耐热性都比母株强,07X-3再生植株的D1代有40%的比母株的耐热性强。


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