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SRAP标记技术优化与湖北油茶遗传多样性研究

左雪枝  
【摘要】:油茶是我国南方特有的木本食用油树种。湖北省是油茶的主产区之一,了解湖北省油茶的遗传基础是油茶种质资源保护、品种改良和开发利用的基础,也是发展壮大油茶产业的前提。本研究采用SRAP标记对湖北省武汉新洲、黄石阳新、咸宁横沟桥、黄冈红安和恩施鹤峰5个居群的油茶遗传多样性进行分析,计算了5个居群间的遗传多样性指数和样品间的遗传距离,构建了样品间的遗传关系树状图,从分子水平上揭示了我省油茶种质资源现状,探明了湖北省不同地区油茶种质资源间的亲缘关系,为我省油茶种质资源建立统一的分类标准提供参考,为杂交育种的亲本选配提供理论依据;同时也证明了SRAP标记技术在油茶遗传基础育种研究中的可行性,同时为利用SRAP标记进一步进行油茶的分子辅助选择育种研究打下了坚实的基础。主要研究结果如下: 1.建立了油茶SRAP-PCR的反应体系并筛选合适的引物。通过单因素法对SRAP反应体系进行优化,SRAP-PCR体系优化结果是:Mg2+浓度1.6mmol/L、引物浓度0.21μmol/L、dNTPs浓度110μ mol/L、模板DNA量90ng、Taq DNA聚合酶用量1.5U;反应程序中第二次退火温度最适为49℃。随后在36对引物组合中筛选出了11对重复性好、多态性高的引物。 2.利用建立的体系,用11对引物对48个个体进行扩增,获得清晰的扩增条带64条,其中多态性条带60条,占93.75%;各材料间的遗传相似性系数(GS)在0.469至0.906之间,平均GS值为0.653;居群平均有效等位基因数(Ne)、平均Nei's遗传多样性(H)、平均Shannon信息指数(Ⅰ)分别为1.5161、0.2748、0.3899,聚类分析将居群分为2大类群,这些结果表明供试油茶具有较为丰富的遗传多样性。


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