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黑曲霉产木聚糖酶液体发酵工艺的研究

李加强  
【摘要】: 木聚糖是自然界存在的可再生的一种植物成分。木聚糖酶能降解木聚糖成木糖或木寡糖。木聚糖酶在饲料、食品、纺织、造纸等行业有着广泛的用途,是现代酶学研究的热点之一。本实验在固体发酵的基础上,进行了适合液体发酵菌株的筛选和工艺的探索,为木聚糖酶液体发酵生产打下基础。通过以木聚糖酶固体发酵高产菌株黑曲霉F27(A.niger F27)为出发菌株,经钴—60诱变,筛选得到适合于液体发酵的菌株L,在5%的麸皮筛选培养基上酶活为1966u/ml。在摇瓶水平上进行了培养基筛选实验,筛选到适合于木聚糖酶发酵主要碳源—玉米芯、主要氮源—蛋白胨、无机盐离子—Mg~(2+)、氨基酸—His,还进行了表面活性剂Tween—80的添加量等因素试验。在得到的发酵培养基的基础上,对发酵条件进行优选,发现在pH值5.5、转速220rpm、500ml摇瓶装量为50ml、温度28~30℃下酶活可达到8226u/ml。在摇瓶发酵工艺优化的基础上进行了发酵罐放大试验,并对发酵罐发酵工艺进行了优化,在玉米芯6%、葡萄糖0.5%、蛋白胨1%和尿素0.3%等的改良培养基上,培养条件为:14h内温度为30℃,14h后28℃,消前pH5.5,罐压0.06mpa~0.08mpa通气1:1.0~1.5搅拌100~150rpm基础上,得到酶活为7200u/ml。


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