黑曲霉产木聚糖酶液体发酵工艺的研究

【摘要】： 木聚糖是自然界存在的可再生的一种植物成分。木聚糖酶能降解木聚糖成木糖或木寡糖。木聚糖酶在饲料、食品、纺织、造纸等行业有着广泛的用途，是现代酶学研究的热点之一。本实验在固体发酵的基础上，进行了适合液体发酵菌株的筛选和工艺的探索，为木聚糖酶液体发酵生产打下基础。通过以木聚糖酶固体发酵高产菌株黑曲霉F27(A.niger F27)为出发菌株，经钴—60诱变，筛选得到适合于液体发酵的菌株L，在5％的麸皮筛选培养基上酶活为1966u／ml。在摇瓶水平上进行了培养基筛选实验，筛选到适合于木聚糖酶发酵主要碳源—玉米芯、主要氮源—蛋白胨、无机盐离子—Mg~(2+)、氨基酸—His，还进行了表面活性剂Tween—80的添加量等因素试验。在得到的发酵培养基的基础上，对发酵条件进行优选，发现在pH值5.5、转速220rpm、500ml摇瓶装量为50ml、温度28～30℃下酶活可达到8226u／ml。在摇瓶发酵工艺优化的基础上进行了发酵罐放大试验，并对发酵罐发酵工艺进行了优化，在玉米芯6％、葡萄糖0.5％、蛋白胨1％和尿素0.3％等的改良培养基上，培养条件为：14h内温度为30℃，14h后28℃，消前pH5.5，罐压0.06mpa～0.08mpa通气1：1.0～1.5搅拌100～150rpm基础上，得到酶活为7200u／ml。