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RP-HPLC检测左旋咪唑在猪牛可食用组织中的残留

黄莹  
【摘要】: 本研究以外标法为定量手段,建立了左旋咪唑在猪和牛可食用组织中残留检测的RP-HPLC法。采用Waters高效液相色谱仪系统,紫外检测器,波长240hm;Hypersil-C_(18)色谱柱(200×4.6mm,5μm);以甲醇-0.05M碳酸铵(62:38v/v)为流动相,流速1.0ml/min。制样方法:取匀质样品,加50%KOH碱化,以乙酸乙酯提取,盐酸溶液反萃,分别用正己烷和二氯甲烷去脂净化,取酸层溶液用50%KOH调节pH值至11~12,用三氯甲烷提取,有机相置60℃水浴氮气吹干,残渣用流动相溶解,高速离心后进样20μl,HPLC分析。在此条件下,左旋咪唑的保留时间为4~5min。标准溶液的最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)分别为0.05μg/ml和0.1μg/ml,浓度在0.1~10.0μg/ml时与峰面积呈良好的线形关系,线性方程为y=27507x+2297.7(r=0.9999)。左旋咪唑标准溶液在浓度为0.1、1.0、10.0μg/ml时,日内和日间变异系数均<5%。用添加法测定左旋咪唑在组织中的回收率,并计算变异系数。取猪肌肉、肝脏、肾脏和牛肌肉、肝脏空白组织,加入左旋咪唑标准溶液,使组织中的浓度为0.5MRL、MRL和2MRL,用上法提取并分析。结果显示:左旋咪唑在猪、牛肌肉和猪肾脏组织的LOD和LOQ为0.01mg/kg,添加浓度为0.01mg/kg、0.02mg/kg、0.04mg/kg时,回收率在63~86%之间,日内变异系数和日间变异系数均<10%。左旋咪唑在猪、牛肝脏组织中的LOD和LOQ为0.05mg/kg,添加浓度为0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg时,回收率除低浓度为66%外,其他在80%左右,日内变异系数<10%,日间变异系数除猪肝脏中低浓度(0.05mg/kg)为11%外,其他均<10%。 结果表明,本研究所建立的检测猪、牛可食用组织中左旋咪唑残留的反相高效液相色谱法(RP-HPLC),其灵敏度、准确度和精密度均符合兽药残留检测方法标准所规定的要求,可作为标准的检测方法,用于监测猪牛可食用组织中左旋咪唑残留。


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