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特异腐质霉Humicola insolens(YH-8)纤维素酶的分离纯化及性质研究

王在贵  
【摘要】:特异腐质霉Humicola insolens(YH-8)培养混合物,通过超声波破碎细胞壁,确定该菌所产的酶为细胞外酶,经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定粗酶液的组分不少于5个。 特异腐质霉Humicola insolens(YH-8)纤维素酶粗酶液经过1.5倍酒精沉淀,DEAE-Sephdex A-50离子交换层析,Sephdex G-100凝胶过滤,得到电泳纯的纤维素酶两个组分,酶1分子量约为55kD,酶2分子量约为80kD。  研究了纯化后的纤维素酶的催化性质。以羧甲基纤维素为底物时,酶1的最适催化温度为60℃,酶2的最适催化温度为65℃,在50℃以下稳定性较好,底物对酶有较强的保护作用;酶1和酶2的最适pH分别为5.5和5.5~6.0,酶1的pH稳定性范围为4~8,酶2的稳定性范围为6~9;Zn~(2+),Ca~(2+),Mg~(2+),K~+,Li~+对酶1有激活作用,K~+,Li~+对酶2有激活作用;酶1主要对CMC和水杨素有分解作用,对其它底物几乎不分解;酶2除了可以分解CMC和水杨素外,对其它底物也有微弱的分解作用。


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