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AM真菌的孢子萌发及双重培养研究

邵菊芳  
【摘要】:丛枝菌根能够通过扩大植物根系的吸收面积而增强根系对土壤中磷素营养的吸收能力,改善树体营养,提高抗旱力,克服了柑橘等果树根毛少,难以吸收土壤中磷酸根离子的缺点。柑橘苗木以及新建果园中没有VA菌根或者VA菌根的数量极少,因而增加丛枝菌根的数量,对于提高苗木质量,改善果园根域环境,具有较大的作用。但是菌根真菌的培养极为困难,通过双重培养大量繁殖AM真菌菌剂,并将之用于柑橘等果树,对于提高柑橘产量、改善品质等具有重大意义。 本研究以Gigarspora margarita,Glomus mosseae,Glomus sp孢子和Glomus sp孢子果4种有代表性的菌种为试验材料,研究了培养前的低温处理和不同繁殖体形式对AM真菌孢子萌发的影响,以及双重培养过程中菌丝对宿主根系的侵染现象和产孢机理,主要结果如下: 1 从柑橘树根际土壤中分离提取到了以球囊霉属为主的大量土著孢子,为研究低温条件下贮藏不同时间对土著孢子萌发的影响提供了试验材料。 2 观察了柑橘菌根结构。对柑橘根染色压片观察表明:柑橘根内存在菌丝、泡囊和丛枝等典型的菌根构造,AM真菌能与柑橘形成良好的共生关系。 3 土著孢子在4℃分别贮藏0、10、20、30、40、50d后进行培养,结果表明:培养前进行低温处理10~50d均显著提高了孢子萌发率;处理20d萌发效果最佳,萌发率为30.34%;最低的是未经低温贮藏的孢子,只有4.94%。 4 不同AM真菌的繁殖体形式对孢子萌发的影响存在显著差异。对相同培养条件下Gi.margarita、Gl.mosseae的孢子以及Gl.sp的孢子果和孢子的萌发率进行了比较,萌发率最高的是Gl.sp孢子果,达60%;萌发率最低的是Gl.sp孢子,只有7.14%。Gi.margarita,Gl.mosseae,Gl.sp孢子果和Gl.sp孢子四种繁殖体形式之间的萌发率都达到差异水平。 5 将白三叶草种子培养萌发出的幼根切下在White液体培养基中进行振荡培养,获得了AM真菌纯培养的离体生活根研究材料;建立了Gi.margarita与白三叶草离体根系的双重培养体系。将萌发的Gi.margarita孢子与离体生活根共培养,1个月后观察到体系产孢。 6 进行了菌丝对白三叶草离体根的侵染及产孢机理研究,主要结果如下:1)孢子萌发时从配囊柄处伸出1条或几条菌丝,并逐渐产生分支;2)白三叶草根系对孢子萌发率的影响不显著;3)培养2周后,双重培养中菌丝的分支比对照更旺,而且出现菌丝对白三叶草根系匍匐侵染的现象;4)培养3周后,双重培养的部分厚壁菌丝顶端膨大成球形并停止生长,其下产生有横隔的分支菌丝,有的分支菌丝形成典型的分支吸收结构(BAS);5)第4周以后菌丝几乎布满整个平板,可发现从根内 伸出的菌丝在根外附近形成丛枝状结构;6)菌丝极性实验表明,分支的菌丝表现为 向地性,厚壁菌丝表现为负向地性;7)双重培养的白三叶草根段染色压片结果表明: 根系被AM真菌充分侵染,皮层产生大量次生抱子,对照中无抱子产生。


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