收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PCR技术在黑木耳交配型因子研究中的应用

肖扬  
【摘要】:黑木耳(Auricularia auricula)是一种栽培历史悠久,深受消费者欢迎的食用菌,具有重要的药用滋补功能。 采用原生质体单核化技术分别获得黑木耳栽培菌株He-1和Ju-1的单核体H_2和J_3,H_2和J_3杂交配对形成双核体H_2J_3。H_2J_3经栽培出耳后,获得其子实体,通过单孢分离技术获得F_1子代59个单核体。 根据交配型将F_1代单核体菌株分成两个群(A_1和A_2),在每群内各抽出10个菌株分别组成A_1和A_2两个等基因池。同时根据高等真菌中信息素前体羧端的CAAX模体及A座位同源结构域中保守氨基酸序列设计了176种特异性单引物。PCR扩增结果表明,仅引物XY_(161)可以扩增得到一条仅在A_1池中出现的特异标记带XY_(161)1462。将该特异带克隆、测序,分析其序列结构,结果显示该标记极可能位于信息素基因的下游端:利用BLAST程序搜索同源序列,没有比对出同源的DNA序列,但其蛋白质序列比对出同源结构域,表明该标记片段可能编码短链脱氢酶,表现出与糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)和新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)等异宗结合担子菌类似的特征。该结果表明交配型座位内的DNA序列变化较大,但其编码的蛋白质结构类似。 根据裂褶菌STE3信息素受体中的保守氨基酸序列设计的简并引物br1-F和br1-R,可以在亲本菌株H_2和24个F_1子代单株中扩增得到一条811bp的特异带,其中包括F_1代9个H_2型单株(占供试菌株的15.3%)和15个J_3型菌株(占供试菌株的25.4%)。将在H_2型菌株59号和J_3型菌株45号中扩增得到的特异带进行克隆和测序,运用BLAST搜索同源序列,其DNA序列比对不出同源序列,但其蛋白质序列可以比对出同源结构域——STE3信息素受体,总共搜索到92个同源序列,e值大小从2e-35到8.1;BLAST搜索结果表明,该信息素受体片段更加类似于四极性担子菌。序列分析发现,该片段可能包含4个内含子。SOSUI程序预测该片段编码的蛋白质是具有5个跨膜结构域的膜蛋白。该信息素受体基因片段在子代中表现了极高的重组率,表明该信息素受体基因因与交配型无关,从而表现为不连锁,该结果与二极性食用菌滑菇(Pholiota nameko)类似。 MIP基因与多种同担子菌(Homobasidiomycete)的A交配型座位紧密连锁,根据MIP蛋白(Mitochondrial intermediate peptidase)设计了6对简并引物。MIP系列引物可以在多种同担子菌中扩增出特异带,而在异担子菌(Heterobasidiomycete)中不能扩增出任何特异带,在黑木耳中运用MIP系列引物也不能扩增出任何特异带,这与黑木耳属于典型的异担子菌完全相符。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王德林;;辽宁朝阳实施“万棚万户百亿元有机黑木耳产业工程”[J];食用菌;2011年04期
2 刘纳;;餐桌上的“黑山珍”[J];生命世界;2006年11期
3 ;黑木耳新品——薛坪10号[J];乡村科技;2010年10期
4 郭建华;夏建平;陈可义;;袋栽黑木耳刺孔方法试验[J];食用菌;2011年04期
5 谢雅真;徐丽婷;曾丽萍;;黑木耳低糖果脯的研制[J];北京农业;2011年12期
6 吕玉珍;程春芝;葛洪;;黑木耳L_(35)菌株的选育及生物特性研究[J];食用菌;2011年05期
7 单福生;夏兆有;马翠杰;李将军;王刚;赵洪林;;黑木耳代料露地栽培技术[J];吉林林业科技;2011年04期
8 杨春生;相丽华;魏守强;;黑木耳菌种“北青黑29”案件引发的讨论[J];农村实用科技信息;2011年07期
9 刘华晶;许修宏;姜廷波;;大兴安岭地区野生黑木耳菌株SRAP的遗传多样性分析[J];中国农业科学;2011年13期
10 李福利;张丽娟;于国萍;;酶法提取黑木耳多糖的纯化与鉴定[J];中国林副特产;2011年04期
11 许修宏;孟琦;刘华晶;李亮;;黑木耳菌丝原生质体的制备﹑再生及单核鉴定研究[J];东北农业大学学报;2011年08期
12 张霞;宋瑞清;邓勋;;黑木耳YBS-3菌株ras启动子的克隆与分析[J];安徽农业科学;2011年17期
13 马庆芳;张介驰;张丕奇;戴肖东;刘佳宁;孔祥辉;韩增华;沙长青;;用玉米芯替代木屑栽培黑木耳的研究[J];中国食用菌;2011年04期
14 叶知勇;;四川选育成功木耳新品种“川黑木耳2号”[J];农村百事通;2011年14期
15 ;科技致富明星[J];农村实用科技信息;2011年08期
16 戴振伦;程传宏;戴小苗;屈万芹;刘光翠;徐宪平;;保康县耳林施肥效果初探[J];北京林业大学学报;2010年S2期
17 ;专研农技发“菌”财[J];农村科学实验;2011年08期
18 褚方钢;;袋栽黑木耳培养料配方7则[J];农村新技术;2011年15期
19 ;梨树种植的意外收获[J];村委主任;2011年13期
20 刘刚;;河北省又取得一批农药植保类科研成果[J];农药市场信息;2011年16期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 伍昌胜;吴康云;边银丙;;黑木耳交配型因子与等位酶位点的遗传分析[A];中国菌物学会第三届会员代表大会暨全国第六届菌物学学术讨论会论文集[C];2003年
2 徐士仙;洪芳;李坤梅;;食用黑木耳中毒一例诊治体会[A];玉溪市第十五届儿科年会论文集[C];2009年
3 张鹏;姚方杰;王立军;;黑木耳形态发育的研究[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
4 刘桂娟;姚方杰;陈影;于娅;;黑木耳杂交菌株选育及其鉴定方法[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
5 张玉红;;黑木耳高产栽培技术[A];河南省植保学会第九次、河南省昆虫学会第八次、河南省植病学会第三次会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2009年
6 李伶俐;吕明亮;应国华;薛振文;朱琼;吴邦仁;田苏奎;;袋料栽培黑木耳的品种比较[A];海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药用菌学术研讨会论文摘要集[C];2011年
7 梁华东;;黑木耳矿质营养研究和专用肥开发应用[A];全国化肥工业技术交流会论文资料集[C];2004年
8 梁华东;;黑木耳矿质营养研究和专用肥开发应用[A];全国第九届新型肥料开发与应用技术交流会论文资料集[C];2004年
9 王英华;国立耘;梁德霖;朱小琼;;内蒙马铃薯晚疫病菌交配型的分布及对几种杀菌剂的敏感性[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
10 黄晨阳;陈强;王震;张金霞;;黑木耳rDNA的IGS2多样性分析[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨春瑜;黑木耳定型热压工艺设备及重组技术研究[D];东北林业大学;2004年
2 Raoul Bruno NGUEKO;[D];浙江大学;2004年
3 王建营;疫霉菌生殖生物学和遗传多样性研究[D];南京农业大学;2000年
4 朱杰华;中国马铃薯晚疫病菌群体遗传结构研究[D];河北农业大学;2004年
5 陆凡;江苏省稻瘟病菌遗传多样性研究[D];南京农业大学;2000年
6 何培新;黄褐裸盖伞生物学及与其伴生菌点枝顶孢生态关系研究[D];山东大学;2006年
7 林范学;香菇分子遗传图谱构建和数量性状座位(QTL)分析[D];华中农业大学;2008年
8 张丹;毛木耳种质资源研究[D];四川农业大学;2005年
9 全雪丽;长白山区松口蘑种群生物学特征及其开发利用[D];东北林业大学;2006年
10 陈庆河;稻瘟病菌群体遗传多样性及其无毒基因的遗传分析与分子标记定位[D];南京农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 肖扬;PCR技术在黑木耳交配型因子研究中的应用[D];华中农业大学;2005年
2 李宏伟;黑木耳优良菌株的筛选与代用料栽培关键技术的研究[D];东北林业大学;2004年
3 宋小亚;交配反应与简并PCR在黑木耳遗传分析中的应用[D];华中农业大学;2007年
4 肖彩霞;黑木耳液体深层发酵的研究[D];江南大学;2004年
5 吕伟;甘肃马铃薯晚疫病菌生物学特性和交配型初步研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 王宝华;稻瘟病菌交配型鉴定及其有性后代的遗传分析[D];福建农林大学;2001年
7 李明容;小麦白粉菌交配型和白化性状的分子标记及其与小麦互作基因初步研究[D];中国农业大学;2004年
8 张泗举;玉米大斑病菌交配型基因片段的克隆与分析[D];河北农业大学;2008年
9 桂秀梅;玉米大斑病菌遗传多态性与有性态诱导[D];河北农业大学;2002年
10 姚国胜;中国部分地区马铃薯晚疫病菌遗传多样性研究[D];河北农业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 冯昌红;袋料黑木耳田园化栽培新技术[N];科学导报;2005年
2 记者 李景才 通讯员 李宏;黑木耳致富丰丽[N];中国绿色时报;2005年
3 刘光泉;黑木耳食疗方[N];民族医药报;2005年
4 罗逊;出血者勿食黑木耳[N];中国医药报;2003年
5 ;如何鉴别黑木耳的优劣[N];中国质量报;2008年
6 记者 马晓燕;一公斤黑木耳可卖近百元[N];嘉兴日报;2009年
7 ;刘晓龙:黑木耳菌袋扎眼常见问题及解决办法[N];吉林农村报;2009年
8 ;刘晓龙:什么决定黑木耳经济效益[N];吉林农村报;2009年
9 张振田;沂水黑木耳每亩收入超万元[N];中国绿色时报;2009年
10 记者 王海波;黑木耳在小山村栽培喜获成功[N];朝阳日报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978