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蜡梅属植物花粉低温及超低温保存研究

陈珊  
【摘要】:蜡梅属植物具有很高的观赏价值,是重要的园林绿化植物之一。本研究以蜡梅属植物花粉为材料,进行了花粉低温及超低温保存技术、保存后活力测定,以及超低温保存前后生理生化指标变化三个方面的研究。通过实验,初步确立了蜡梅花粉超低温保存的技术程序。主要研究结果如下: 1.蜡梅花粉的超低温保存程序为:花粉在25℃下恒温干燥24小时后,不经过预冻处理直接投入液氮,保存一定时间(1-360d)后取出花粉,用37℃水浴快速化冻。 2.蜡梅花粉萌发培养基为15%蔗糖+50mg/L H_3BO_3+0.7%琼脂+1.5mg/L2,4-D+0.05%Ca~(2+),调整各成分浓度,对花粉萌发会产生影响。所测的H11、H29、H46、H50四个基因型蜡梅花粉在上述培养基成分浓度组合中萌发率最高。 3.贮藏温度是影响蜡梅花粉寿命的重要因素。经研究发现,室温和4℃适合花粉的短期保存(10-15d),例如H8、H11、H89号花粉;在-20℃、-70℃、-196℃的保存下,花粉的寿命延长。H5、H29、H50号花粉在液氮中保存1年时,萌发率均比保存前分别高出21.027%、23.136%、1.623%。研究表明,超低温贮藏是解决大部分基因型蜡梅花粉长期保存的有效途径,如H5、H29、H50、H82、H86。 4.花粉活力随干燥时间延长而增加,在24h达到相比较好的萌发率,干燥时间为36h,花粉萌发率开始出现下降。通过测定14个基因型蜡梅的花粉在25℃下分别干燥4h、8h、12h、16h、24h、36h等六个水平的萌发率,确定24h为蜡梅花粉的合适干燥时间。 5.预冻温度和化冻方式影响蜡梅花粉超低温保存效果。不经预冻处理直接将花粉投入液氮保存,取出后用37℃水浴快速化冻效果较好。 6.作为保护性酶,SOD、CAT、POD的活性在蜡梅花粉超低温保存过程中发生不同程度的变化,-196℃超低温胁迫提高了酶活性:而逆境生理指标MDA的含量在蜡梅花粉超低温贮藏后增加,说明花粉膜脂过氧化程度加强,膜系统受损;超低温也影响蜡梅花粉的物质代谢,使花粉中的蛋白质含量呈现波动变化。


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