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甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育基因Ms_4标记的开发

巴红平  
【摘要】: 陈凤祥等(1993)提出了甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育两型系9012AB的隐性上位互作遗传模式,即其育性受两对隐性重叠不育基因(ms_3ms_3,ms_4ms_4)和一对隐性上位抑制基因(rfrf)互作控制。该模式的提出为隐性核不育“三系”配套生产和广泛应用提供了理论依据。目前,利用该系统的育种工作已取得了突破性的进展,同时有关该系统的核不育机理研究也充分展开。本研究是在前人研究的基础上,以隐性细胞核雄性不育两型系WLAB和GOSAB为材料,主要进行Ms4位点的分子标记开发,以期为分子标记辅助育种和Ms4的克隆奠定基础。取得的主要结果和结论如下: 1.2007年春构建了WLA×WLB的兄妹交群体,2008年春构建了GOSB×9012A的回交群体。两个回交群体育性调查结果表明,其中可育株分别为59和60株,不育株分别为58和63株,卡平方检验符合1:1的理论分离比。 2.以兄妹交群体(WLA×WLB)为材料,运用BSA法筛选了2560对AFLP引物组合,通过验证获到了6个与Ms4连锁的标记,分别将其命名为BH1,BH2,BH3,BH4,BH5,BH6。 3.利用由GOSB和9012A构建的BC1的群体,运用BSA法筛选了1024对AFLP引物组合,获得了16个标记,分别命名为BP1,BP2,BP3…BP16。 4.采用MAPMAKER/EXP 3.0软件分析标记与Ms_4基因及标记之间的连锁关系,发现22个AFLP标记中的16个(BP1至BP16)与Ms_4位点具有连锁关系,且分别位于Ms_4位点两侧,其中最近标记与Ms_4位点的遗传距离为2.2cM。 5.将由2个群体筛选得到的22个AFLP标记片段回收测序后,于NCBI网站运行Blastn程序与拟南芥同源序列进行比对发现,7个片段(BH6,BP1,BP4,BP5,BP9,BP10,BP11)与拟南芥具有较高的同源性,其中标记BH6的同源性高达到85%。


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