“双固一通”针法治疗绝经后骨质疏松症模型大鼠的机理研究

【摘要】：目的: 探讨“双固一通”针法治疗绝经后骨质疏松症的作用机理,为针灸预防和治疗骨质疏松症提供实验依据。 方法: 选择6～10月龄雌性SD大鼠,切除双侧卵巢后饲养90天,造成实验性骨质疏松症动物模型。然后随机分成对照组、常规取穴组、双固组、一通组、双固一通组等5组,每组12只。对照组不作任何治疗;常规取穴组取脾俞、胃俞、肾俞,气海俞;双固组取关元、足三里;一通组取肾俞、膈俞、大杼;双固一通组取关元、足三里、肾俞、膈俞、大杼。电针治疗每天1次,每次15分钟,留针10分钟,连续治疗6天后休息1天,持续治疗8周。(1)用全自动生化仪测定血钙、血磷、血碱性磷酸酶(ALP)和尿钙、尿磷、尿肌酐,用放射免疫法测定血清骨钙素(BGP),用化学发光免疫分析法测定尿脱氧吡啶啉(D-Pyr);(2)应用双能X线骨密度诊断仪测量大鼠腰椎_(1-5)和股骨的骨矿物质含量(BMC)和骨密度(BMD);(3)采用双抗体+PEG法检测血清雌二醇(E_2);(4)应用光镜观察骨小梁的形态结构,借助VIDAS图像分析系统测量骨小梁的相对体积(TBV%)、骨小梁的宽度(Tb.Th)和骨小梁的间隙(Tb.Sp);(5)采用酶联免疫法检测血清胰岛素样生长因子-1;(6)应用RT-PCR技术检测白细胞介素-6mRNA在骨组织的表达;(7)应用RT-PCR技术检测骨保护蛋白mRNA在骨组织的表达。 结果: (1)、骨代谢生化指标检测结果显示:各组间血Ca、血P、血清骨钙素(BGP)之间比较无显著性差异(P0.05);与对照组比较,所有针刺治疗组血ALP、尿Ca/Cr、尿P/Cr均降低(P0.05),“双固一通”组显著降低(P0.01),常规取穴组、双固组、一通组之间比较无显著性差异(P0.05):所有针刺治疗组尿D-Pyr均降低(P0.05),各针刺治疗组之间比较无显著性差异(P0.05)。结果提示:针刺能够降低去卵巢骨质疏松症模型大鼠血ALP、尿Ca/Cr、尿P/Cr,且“双固一通”针法优于常规取穴针法。 (2)、骨矿物质含量和骨密度检测结果显示:与对照组比较,所有针刺治疗组的BMC及BMD均增高(P0.05),双固一通组显著增高(P0.01);双固一通组较常规取穴组、双固组、一通组显著增高(P0.05);常规取穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P0.05)。结果提示:针刺能够提高去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨矿含量和骨密度,且“双固一通”针法优于常规取穴针法。 (3)、雌二醇检测结果显示:与对照组比较,所有组的E_2均增高(P0.05),双固一通组显著增高(P0.01);双固一通组较常规取穴组、双固组、一通组显著增高(P0.05);常规取穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P0.05)。结果提示:针刺能提高去卵巢骨质疏松症模型大鼠E_2的水平,且“双固一通”针法优于常规取穴针法。 (4)、光镜观察结果显示:对照组骨小梁稀疏、细、中断点多、间距宽,部分区域出现较大的空白区域。常规取穴组、双固组、一通组的骨小梁增多、 博士学位论文 “双固一通”针法治疗绝经后骨质疏松症模型大鼠的作用机理 增粗、间隙变窄,中断点减少,三组间的区别不明显。双固一通组的骨小梁排 列密集,相互之间的连接明显增多,宽度增宽,体积增大,间隙变窄。骨组织 形态计量学比较结果显示:与对照组比较,所有治疗组单位面积内骨小梁的体 积及宽度增大(P0 .05),间隙变窄(P0 .05),双固一通组骨小梁的体积及宽 度增大显著(P0.01),间隙变窄显著(P0 .01);双固一通组较常规取穴组、 双固组、一通组的骨小梁的体积和宽度增大(P0 .05),间隙变窄(P0 .05); 常规取穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P0 .05)。结果提示: 针刺在一定程度上可以改善或恢复绝经后骨质疏松症模型大鼠的骨组织形态结 构,“双固一通”针法优于常规取穴针法。 (5)、胰岛素样生长因子一1检测结果显示:与对照组比较,所有组的IGF一1 均增高(P0 .05),双固一通组增高显著(P0 .01);双固一通组较经验取穴组、 双固组、一通组显著增高(P0.05);经验取穴组、双固组、一通组三组之间无 显著性差异(PO.05)。结果提示:针刺能够提高去卵巢骨质疏松症模型大鼠 IGF一1的水平,且“双固一通”针法优于常规取穴针法。 (6)、骨组织白细胞介素一6mRNA表达水平检测结果显示:与对照组比较, 所有针刺组的IL一6mRNA表达均减弱(P0 .05),双固一通组表达明显减弱 (P0.01);双固一通组较常规取穴组、双固组、一通组减弱(P0 .05);常规取 穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P0 .05)。结果提示:针刺 能够降低去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨组织的工L一6mRNA表达水平,且“双固一 通”针法优于常规取穴针法。 (7)、骨组织骨保护蛋白mRNA表达水平检测结果显示:与对照组比较,所 有针刺组的OPGmRNA表达均升高(P0 .05),双固一通组表达明显升高 (P0.01);双固一通组较常规取穴组、双固组、一通组升高(P0.05);常规取 穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P0 .05)。结果提示:针刺 能够提高去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨组织的OPGmRNA表达水平,且“双固一 通”针法优于常规取穴针法。 结论: 针刺在一定程度上能够防治绝经后骨质疏松症,且“双固一通”针法优于 其他常规取穴针法。 主题词:绝经后骨质疏松症/“双固一通”针刺疗法 骨/?