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前列康泰方对慢性前列腺炎大鼠前列腺组织细胞因子的调控作用研究

赵乔  
【摘要】: 目的探讨慢性前列腺炎的基本病机,从细胞信号因子角度研究慢性前列腺炎的病理机制,初步阐明中药前列康泰方治疗慢性细菌性、非细菌性前列腺炎的作用及其机制,初步揭示慢性前列腺炎“肝实肾虚”病机理论的科学内涵。 方法 1.观察前列康泰方对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用和对角叉莱胶所致大鼠足跖肿胀的抑制作用。 2.观察前列康泰方对慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织形态学的影响。本实验共分两大部分进行:①制造慢性细菌性前列腺炎模型:取45只大鼠麻醉,无菌条件下切开下腹部皮肤和肌层,于前列腺两侧叶注入预先稀释好的浓度为10~7~10~9个/ml大肠杆菌混悬液0.2ml,最后缝合腹壁肌层和皮肤。将已做手术的45只大鼠随机分为慢性细菌性前列腺炎模型组、左氧氟沙星组和前列康泰方组,每组15只。②制造慢性非细菌性前列腺炎模型:将45只大鼠麻醉,无菌条件下切开下腹部皮肤和肌层,于前列腺两侧叶注入25%消痔灵注射液0.2ml,最后缝合腹壁肌层和皮肤。将已做手术的45只大鼠随机分为慢性非细菌性前列腺炎模型组、前列康组和前列康泰方组,每组15只。另外取15只正常wistar大鼠,无菌条件下切开下腹部皮肤和肌层,于前列腺两侧叶注入无菌生理盐水0.2ml,做为两个实验共用的正常对照组(假手术组)。造模7天后开始给药,各实验组大鼠分别给予相应药物,每天灌胃2次,连续5周,光镜下观察各组大鼠前列腺组织形态学的变化。 3.透射电镜下观察前列康泰方对慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织细胞超微结构的影响。 4.用放射免疫法检测各组大鼠血浆TXB_2、6-K-PGF_(1α)含量的变化。 5.用双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)检测各组大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平的变化。 6.用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组大鼠前列腺组织TNF-α、IL-1βmRNA表达水平的变化。 结果 1.前列康泰方对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有明显的抑制作用(P<0.05)。 2.光镜下大鼠前列腺组织形态学改变:慢性细菌性和非细菌性前列腺炎模型组前列腺腺泡上皮细胞分泌功能降低,腺腔及间隙有炎性细胞浸润,有纤维细胞增生和血管增生,病理损害明显。前列康泰方组前列腺腺泡上皮细胞分泌增多,间质炎性细胞浸润和纤维细胞增生明显减轻。 3.透射电镜下大鼠前列腺组织细胞超微结构的变化:慢性细菌性和非细菌性前列腺炎模型组前列腺腺泡上皮细胞胞浆中粗面内质网中度扩张,线粒体肿胀,细胞间质胶原纤维明显增生。前列康泰方组前列腺腺泡上皮细胞胞浆中可见丰富的粗面内质网,排列整齐,内质网轻度扩张,线粒体肿胀明显减轻。 4.慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠血浆TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)含量的变化:与正常对照组比较,两个模型组大鼠血浆TXB_2水平均升高、6-Keto-PGF_(1α)水平均降低(P<0.05),TXB_2/6-Keto-PGF_(1α)比值显著性升高(P<0.01)。与模型组比较,前列康泰方组血浆TXB_2水平降低、6-Keto-PGF_(1α)水平升高(P<0.05),TXB_2/6-Keto-PGF_(1α)比值显著性下降(P<0.01)。 5.慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平的变化:与正常对照组比较,两个模型组大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平均升高(P<0.05);与模型组比较,前列康泰方组大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05)。 6.慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达水平的变化:与正常对照组比较,两个模型组大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均增强(P<0.05):与模型组比较,前列康泰方组大鼠前列腺组织TNF-α、IL-1βmRNA表达水平降低(P<0.05)。 结论本课题提出了慢性前列腺炎实证多责之于肝,虚证多责之于肾,“肝实肾虚”是慢性前列腺炎的病机特点,“浊瘀阻滞”是慢性前列腺炎缠绵难愈的症结所在。通过本实验研究发现,前列康泰方能使实验动物炎症反应减轻,有明显的抗炎作用;使慢性细菌性和非细菌性前列腺炎大鼠光镜和电镜下前列腺组织的炎性病理损害明显减轻。慢性细菌性和非细菌性前列腺炎模型组大鼠血浆TXB_2水平较正常对照组均显著升高,6-keto-PGF_(1α)水平均显著降低,致使TXB_2/6-Keto-PGF_(1α)比值明显升高,说明慢性前列腺炎确实存在“浊瘀阻滞”;而前列康泰方可降低大鼠血浆TXB_2水平,升高6-Keto-PGF_(1α)水平,使TXB_2/6-Keto-PGF_(1α)比值显著性下降,说明前列康泰方能改善大鼠血瘀的状况,这可能是该方治疗慢性前列腺炎的作用机制之一。慢性细菌性和非细菌性前列腺炎模型组大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平均显著升高,TNF-α、IL-1βmRNA表达也增强,说明慢性前列腺炎确实存在异常免疫反应;而且机体出现的这种异常免疫反应可能是慢性细菌性和非细菌性前列腺炎的共同发病机制。前列康泰方能使大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β的水平降低,使TNF-α、IL-1βmRNA表达也下降,说明该方对前列腺组织中细胞因子及其受体有一定的调控作用,这可能是该方治疗慢性前列腺炎的作用机制之一。


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