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消瘤汤抗肿瘤作用及机制探讨

张玮  
【摘要】: 目的: 消瘤汤是由白花蛇舌草、黄芪、半枝莲、藤梨根、白英、龙葵等药物组成,具有清热解毒,扶正培本,活血消肿,化瘀利湿之功效,诸药配伍,扶正祛邪,攻补兼施,气血同治,痰瘀热毒并除。本研究在中医理论的指导下,通过中药血清药理学实验,从细胞、分子水平系统地探讨消瘤汤抗肿瘤作用机理。观察消瘤汤含药血清对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响、细胞凋亡率及细胞周期变化。研究消瘤汤含药血清对肝癌细胞Bel-7402凋亡的诱导作用,探讨消瘤汤诱导肝癌细胞凋亡的可能机制,为临床上应用该方治疗恶性肿瘤提供实验依据。 方法: 选用SD大鼠30只,随机分为五组,即消瘤汤高、中、低剂量组、氟脲嘧啶组、空白对照组。用中药血清药理学方法,制备各受试药物含药血清和无药血清。各实验组细胞分别加入各受试药物血清,空白对照组加入无药血清,分别培养24h,48h。 1用台盼蓝染色检测各组细胞蓝染率。 2通过MTT(噻唑蓝)比色法检测各组细胞抑制率。 3流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。 4流式细胞仪检测各组细胞周期变化。 结果: 1台盼蓝染色显示,细胞蓝染率无明显变化。 2 MTT比色显示,各实验加药组细胞存活率降低,细胞生长增殖明显受到抑制,随着时间的延长,细胞的相对抑制率逐渐增加,消瘤汤含药血清药物浓度较低时,细胞相对抑制率随着含药血清浓度的增大而增加,当含药血清达到一定浓度后,细胞相对抑制率随着血清浓度的增加而下降。各实验加药组中细胞生长抑制率与空白对照组相比,均有显著性差异。以氟尿嘧啶组、消瘤汤中剂量组较空白对照组细胞生长抑制率增高显著。 3流式细胞仪检测凋亡峰,实验组细胞在G_1期前出现凋亡峰,凋亡峰随着含药血清浓度的增加先升高后下降,显示量效关系,各实验组之间相比较,相同培养时间中,以氟尿嘧啶组、消瘤汤中剂量组细胞凋亡峰最高,而空白对照组细胞始终无凋亡峰出现。同一实验组,细胞凋亡百分率随着药物作用时间的增加而增加,显示时效关系,培养48小时作用明显。各实验加药组中细胞凋亡率与空白对照组相比,均有显著性差异。 4流式细胞仪检测细胞周期,各实验组细胞周期均出现明显改变,与空白对照组相比,均有显著性差异。表现为实验组中G_1期,S期变化不明显,G_2~M期细胞明显增加。以氟尿嘧啶组、消瘤汤中剂量组细胞周期变化显著。 结论: 1消瘤汤能可抑制人肝癌细胞Bel-7402生长增殖,并呈现出一定的剂量效应。 2消瘤汤可诱导肝癌细胞Bel-7402凋亡。 3消瘤汤诱导肝癌细胞Bel-7402凋亡的机制可能与阻止Bel-7402细胞增殖周期的运行有关。 4提示消瘤汤具有治疗肝癌的潜力。


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