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天然活性物质的诱导、分离及活性研究

盛桂莲  
【摘要】: 本文从诱导分离及活性测试的角度对植物体内天然存在及诱导生成的活 性物质进行了初步研究。 在植物体内天然存在的活性物质研究中,作者以黄果茄未成熟果实为实验 材料,粉碎后分别用水和有机溶剂抽提分离,详细地观察测试了各粗提物对靶 标生物——湖北钉螺(日本血吸虫的中间宿主)的杀灭效果。其中有机溶剂粗 提物在室温条件下对成螺浸杀24、48、72h的LC_(50)分别为0.621、0.322、0.181mg .1~(-1);对不同螺龄幼螺及螺卵也有很好的浸杀效果:对螺龄为ld和60d的幼螺 浸杀12、24、36h的LC_(50)分别为0.375、0.249、0.137mg.1~(-1)和0.446、0.262、 0.129mg.1~(-1),浓度为0.54mg.1~(-1)浸杀48h时,螺龄为ld的螺卵孵出率即为0。 进一步跟踪分析粗提物中的有效成分,改变洗脱剂和展层剂的极性和配比对粗 提物进行了CLC、TLC等分离纯化,得到TLC结果显示R_f值不同的三种纯化样 品,浓度为15ppm时,浸杀成螺72h的死亡率分别为86.2%、96.6%、91.7%。 在活性物质诱导生成方面,先以美人蕉叶片、湿地松松针为实验材料,设 定时间梯度用UV照射以上离体组织并经条件培养和提取分离后对提取物进行 HPLC检测,探索了UV对植物体内防御性化合物生成的诱导作用及UV照射时间 对防御性化合物生成量的影响;接着以“鄂宜105”水稻为实验材料,用10~(-6)mol .1~(-1)人工合成寡糖作为诱导子喷雾离体水稻叶片,条件培养,观察了离体组织 褐变反应;经有机溶剂提取和CLC、TLC分离纯化、GC-MS检测后发现经寡糖处 理的水稻叶片中生成了多种防御性化合物,其中包括己知的由病原菌侵染生成 的Lactone类水稻PA——MA,说明寡糖可起类似于病原菌的作用,诱导植物体 内PA的生成,提高植物的抗病性,同时也说明了寡糖作为新型绿色农药的现实 可能性。为了检测信号分子SA在PA生成中的作用,作者用人工合成寡糖和相 应的病原菌(稻瘟菌、白叶枯病菌、棉黄萎病菌)分别处理离体健康的水稻、 小麦及棉花叶片,条件培养,抽提分离后,定性检测结果说明处理样品中SA 的含量明显增加,预示了SA含量的增加与PA的生成之间的相关性。


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