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SiO_2/松香基核壳型色谱固定相高效分离天麻素

邓杰  
【摘要】:天麻素是传统中药天麻的有效活性成分之一,广泛应用于生物医药领域。目前用来分离纯化天麻素的大部分固定相是石油基大孔树脂,在分离纯化过程中可能把有毒的苯系物质残留在药物中,存在药物安全隐患。松香是一种丰富的可再生生物质资源,以其绿色环保、独特的三元菲环结构和较好的力学刚性等优势受到越来越多人的青睐。本文以松香改性制得的交联剂为原料,合成出SiO_2/松香基核壳型固定相,用于分离天麻素及其衍生物,主要内容如下:1.以丙烯海松酸丙烯酸乙二醇酯(AAEGA)为交联剂,甲基丙烯酸甲酯(MMA)为单体采用硅胶涂覆的方法制备出了4种SiO_2/松香基高分子微球并作为色谱固定相,分别命名为SP_1、SP_2、SP_3、SP_4,将SiO_2微球命名为SP_0。采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、激光粒度测定仪、比表面积及微孔物理吸附仪和热重分析仪对其进行一系列的表征。结果表明,SiO_2/松香基高分子微球保留了SiO_2微球球形度好的特点,粒径分布在2-10μm范围内,比表面积在275-305 m~2/g范围内,平均孔径在6.31-6.36 nm范围内,在250℃开始分解表明SiO_2/松香基核壳型固定相有较好的热稳定性。2.采用湿法装柱,将SiO_2/松香基高分子微球填充至4.6×250 mm的不锈钢空色谱柱中,得到对应微球的SP_1、SP_2、SP_3、SP_4色谱柱分离天麻素及其衍生物(苯基β-D吡喃葡萄糖苷和4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷)。并探索了乙腈浓度、磷酸浓度、流速、柱温的改变对天麻素及其衍生物的分离效果。结果表明,当流动相为乙腈-0.05%磷酸水(3:97 v/v),温度为25℃,流速为0.3 mL/min时,SP_3色谱柱对天麻素及其衍生物分离效果最好,对天麻素和苯基β-D吡喃葡萄糖苷的分离度为8.52,对天麻素和4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷的分离度为14.7。3.选取分离效果最好的SP_3色谱柱,探索了SP_3色谱柱对分离天麻素及其衍生物的热力学,通过范特霍夫方程计算出ΔH、ΔS、ΔG等热力学数据,结果表明,SP_3色谱柱对天麻素和苯基β-D吡喃葡萄糖苷、天麻素和4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷的拆分既是焓驱动也是熵驱动过程。4.将天麻素从野生天麻中提取出来配成天麻水提物,选取分离效果最好的SP_3色谱柱从天麻水提物中分离纯化天麻素,分离纯化后的天麻素的纯度从47.7%提高到86.4%,说明SP_3色谱柱能够有效分离纯化天麻素,具有一定的应用价值。


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