收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

DNA与有机试剂的共振光散射光谱研究与应用

龙云飞  
【摘要】: 本论文在查阅大量文献的基础上,根据实验室的实验条件,选择共振光散射光谱法研究DNA与有机小分子之间的相互作用前后的共振光散射光谱特征,根据共振光散射光谱信号的改变值与DNA的浓度呈正比的特点,建立了四种测定DNA的新方法。这些方法具有快速、灵敏等特点,应用于鱼精DNA含量的测定,结果令人满意。 本论文共分为四章。 第一章 研究了吖啶黄与脱氧核糖核酸在微酸性条件下的共振光散射光谱特征,考察了影响因素和最佳反应条件,研究表明,吖啶黄在pH=5.5的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,于465nm处有很强的共振光散射,加入DNA以后,465nm处的共振光散射强度明显减小,且共振光散射强度减小值与加入的DNA的浓度呈良好的线性关系,据此建立了一种测定DNA的新方法。在pH=5.5的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,线性范围为0~1.25mg/L,相关系数为0.9996,最低检出限可达7.43μg/L,用于鱼精DNA的测定结果令人满意。 第二章 研究了氯化硝基四氮唑蓝与脱氧核糖核酸的最佳反应条件,并研究了它们之间相互作用的共振光散射特征,考察了体系的影响因素,建立了一种测定DNA的新方法。研究表明,在pH=1.8的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,氯化硝基四氮唑蓝与脱氧核糖核酸相互作用后产生共振光散射强度增强,共振光散射强度增强值与加入的DNA的浓度呈良好的线性关系,线性范围为0~7mg/L,相关系数为0.9958,检出限为30.04μg/L,用于鱼精DNA的测定结果令人满意。 第三章 研究了碱蓝6B与脱氧核糖核酸的最佳反应条件,探索了体系在四硼酸钠-盐酸(pH=2.90)缓冲溶液中的共振光散射特征,并考察了影响因素,建立了一种测定纳克级DNA的新方法。方法的线性范围为10~100.4μg/L,相关系数为0.9913,检出限为4.2μg/L,用于鱼精DNA的测定结果令人满意。 第四章 在pH 9.90的Tris-HCl缓冲溶液中,阳离子表面活性 WP=16 剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)对阴离子染料二甲苯兰FF与核酸(fsDNA﹑ctDNA﹑yRNA)的共振光散射光谱有协同增强作用。考察了影响因素,在优化条件下研究了共振光散射强度与核酸浓度之间的关系,对于fsDNA﹑ctDNA﹑yRNA的线性范围分别为0.05~3.0mg/L﹑0.05~6.0mg/L﹑0.5~2.0mg/L,检出限分别为24.1μg/L ﹑18.4μg/L﹑57.0μg/L。据此建立了一种测定核酸的新方法,该方法具有稳定性好、灵敏度高等特点。用于fsDNA合成样测定结果令人满意。


知网文化
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978