收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

锁核酸分子信标的设计、合成及其性能研究

崔亮  
【摘要】:锁核酸(Locked nucleic acid, LNA)作为一种新型的核酸衍生物,具有亲和性高、热稳定性好、抗酶切能力强、体内无毒性等优点,并且可以像普通DNA引物一样采用固相法进行合成,因而被广泛地应用于反义治疗、单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测等多个领域。基于锁核酸的上述优良性能,本文将其应用于分子信标的设计与合成中,有望提高分子信标的性能。主要开展了以下几方面的工作: (1)末端修饰锁核酸分子信标的设计、合成及性能研究。 设计、合成了一种茎部修饰锁核酸的新型分子信标,并通过荧光和色谱的方法考察了其抗酶切能力、杂交性能、热稳定性等。与常规分子信标相比,末端修饰锁核酸的分子信标抗酶切能力强,在与DNase I作用的长时间内分子信标几乎没有被降解;热稳定性好,在90℃的高温下仍然能够保持发夹状态;背景荧光信号低,提高了其杂交信背比;保持了分子信标的单碱基识别能力。这些性能将会拓展分子信标在复杂生物体系内的应用。 (2)错配位点修饰锁核酸分子信标的设计、合成及性能研究。 设计、合成了在错配位点修饰1个和3个锁核酸的分子信标,通过荧光实验考察了其选择性、杂交信背比、热稳定性等。结果表明,在错配位点修饰锁核酸显著地提高分子信标的单碱基错配识别能力,但是随着锁核酸修饰数目的增加,其选择性并不会进一步提高。同时,锁核酸的修饰也提高了分子信标的信背比。熔解曲线表明,这种性能的提高是锁核酸的杂交亲和性高所致,因此具有通用性,将有助于分子信标在SNP检测及低丰度样品中的检测。 (3)汞离子特异性锁核酸分子信标的设计、合成及性能研究。 设计、合成了汞离子选择性锁核酸分子信标,通过荧光实验考察锁核酸T-T碱基错配与汞离子的结合能力,发现锁核酸T-T错配链也具有与汞离子结合形成T-Hg~(2+)-T结构的性能,其检测下限可达到14.3 nM,线性范围为25 nM - 150 nM,达到了常规分子信标的检测范围,且对汞离子有良好的选择性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张永有,程金平,朱艳冰;分子信标及其应用研究进展[J];生命的化学;2002年02期
2 陈忠斌,王升启,孙志贤;分子信标核酸检测技术研究进展[J];生物化学与生物物理进展;1998年06期
3 李正军,梁红艳;毛细管电泳、分子信标技术及其在遗传学中的应用[J];国外医学.遗传学分册;2002年02期
4 ;NEWS[J];分析化学;2011年02期
5 李军,王柯敏,何晓晓,唐志文;纳米尺度和单分子水平上的化学生物学研究[J];大学化学;2004年01期
6 殷志祥,张风月,许进;基于分子信标的DNA计算[J];生物数学学报;2003年04期
7 殷志祥,刘文斌,杨静;分子信标DNA计算模型的研究进展与展望[J];生物学杂志;2005年05期
8 赵军;贺大林;;分子信标在活细胞研究中的应用新进展[J];国际生物制品学杂志;2006年02期
9 梁红艳,白静,李正军,姜晓峰;毛细管电泳分子信标技术与SARS病毒的实验室检测[J];中国生物工程杂志;2003年09期
10 仲志鸿;羊小海;王柯敏;谭蔚泓;李惠敏;孟祥贤;郭秋平;;以分子信标为报告分子的凝血酶检测新方法[J];生命科学研究;2006年03期
11 霍希琴;颜鸿飞;李军;周兴旺;李伟;羊小海;;分子信标检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法[J];生命科学研究;2009年01期
12 刘凌凤,唐志文,王柯敏,谭蔚泓,李军,郭秋平,孟祥贤,黄杉生,李杜;基于分子信标实时监测大肠杆菌DNA连接酶催化的DNA连接过程[J];高等学校化学学报;2003年10期
13 唐志文,王柯敏,谭蔚泓,李军,刘凌凤,郭秋平,孟祥贤,黄杉生,李杜,罗维方;分子信标用于核酸连接过程的实时监测[J];科学通报;2003年06期
14 金锐;;实时荧光定量PCR应用技术综述[J];科教文汇(中旬刊);2007年10期
15 刘上峰,李麓芸,莫亚勤,傅俊江,刘刚,邢晓为,卢光琇;小鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因SRG2的分子克隆及其在隐睾中的表达特征[J];遗传学报;2003年10期
16 康 燕;封科军;蒋健晖;沈国励;俞汝勤;;分子信标研究进展[J];化学传感器;2008年02期
17 于黎娟;;分子信标的研究现状及应用[J];科技信息;2010年21期
18 张立国,张琚;实时定量PCR技术的介绍[J];生物技术;2003年02期
19 王超;孟祥晨;;荧光分子信标探针检测双歧杆菌的研究[J];东北农业大学学报;2008年03期
20 唐红星;羊小海;王柯敏;谭蔚泓;李伟;;硫代修饰分子信标用于活细胞内mRNA的检测[J];科学通报;2008年17期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 贺大林;赵军;王志强;杨小杰;王新阳;王明珠;;Survivin分子信标诊断膀胱肿瘤的6年研究总结[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年
2 柯国梁;葛韵;王春明;朱志;杨朝勇;;基于非天然碱基L-DNA分子信标的细胞温度计[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
3 廖农;高建华;曾位森;赵伟;罗秋生;;实时PCR分子信标检测P53基因SNP方法的建立[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
4 王春明;朱志;宋彦龄;谭蔚泓;杨朝勇;;新型光调控分子信标的设计与合成[A];中国化学会第27届学术年会第03分会场摘要集[C];2010年
5 曹烁晖;蔡伟鹏;谢堂堂;刘倩;刘晓庆;李耀群;;基于表面等离子体耦合定向荧光的生物传感研究[A];中国化学会第27届学术年会第09分会场摘要集[C];2010年
6 羊小海;李晓平;王青;王柯敏;郭秋平;崔亮;薛曹叶;;基于锁核酸分子信标和酶放大检测RNA[A];第六届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
7 于黎娟;禚林海;乔光明;高源;唐波;;核酸酶双纳米金分子信标用于细胞内成像[A];中国化学会第27届学术年会第04分会场摘要集[C];2010年
8 杨朝勇;;用于细胞内基因成像的新型核酸探针的设计与合成[A];中国化学会第26届学术年会化学生物分会场论文集[C];2008年
9 郑红;;实时定量PCR法检测肝细胞癌中Survivin基因mRNA的表达[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
10 梁红艳;赵弘;姜晓峰;;CRTH2基因多态性与IL-13表达关系的研究[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 汤丹;新型生物传感器的研究及其在核酸和蛋白质检测方面的应用[D];吉林大学;2011年
2 李军;分子信标荧光探针用于遗传物质的超灵敏检测及超微型DNA、pH传感器的研究[D];湖南大学;2002年
3 周波;用于蛋白检测的生物条码技术与方法的研究[D];中国协和医科大学;2010年
4 姚权;磁性纳米颗粒连接miR-155分子信标用于非小细胞肺癌诊断的实验研究[D];第三军医大学;2012年
5 李志勇;瓜环与荧光染料的自组装及其应用研究[D];大连理工大学;2013年
6 吴继魁;基于新型分子信标和胸腺嘧啶—汞(Ⅱ)配位作用的DNA和Hg~(2+)检测技术研究[D];华东师范大学;2010年
7 叶其炎;基于不同探针的几种持久性有毒污染物检测方法研究[D];东华大学;2010年
8 吴子侠;中国人群非综合征性耳聋高频突变位点的快速荧光筛查[D];苏州大学;2013年
9 周慧;基于G-四链体探针和链置换放大的光学分析新方法[D];湖南大学;2012年
10 刘上峰;人类睾丸生殖细胞凋亡相关新基因TSARG2及小鼠同源基因SRG2的分子克隆及功能的初步研究[D];中南大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 崔亮;锁核酸分子信标的设计、合成及其性能研究[D];湖南大学;2009年
2 蔺凯;非标记信号增强型荧光分子信标的构建研究[D];陕西师范大学;2010年
3 刘婷;新型电化学活性及催化活性分子信标开关的研制及其应用研究[D];华东师范大学;2014年
4 李向玲;基于分子信标及生物条码技术的生物传感器检测端粒酶及肿瘤细胞[D];青岛科技大学;2011年
5 刘海涛;基于分子信标及链置换分子机器技术的生物传感器的制备[D];青岛科技大学;2012年
6 李晓平;锁核酸修饰的分子信标用于核酸和蛋白检测的研究[D];湖南大学;2010年
7 李朋;蛋白质、生物小分子荧光传感新方法研究[D];青岛科技大学;2013年
8 窦月磊;苝酰亚胺类荧光探针的研究[D];大连理工大学;2010年
9 王琪;Hs-MB型电化学活性开关分子信标的研制及其应用研究[D];华东师范大学;2011年
10 赵琎;基于分子信标和CdS/DNA纳米复合物的荧光探针研究[D];中南大学;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978