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新型电化学免疫传感技术用于日本血吸虫等蛋白分子检测的研究

周亚民  
【摘要】: 血吸虫病是一种分布广泛的寄生虫病,在我国湖南、湖北、江西、安徽等省的 江湖地区,血吸虫病仍然威胁着人们的身体健康。发展灵敏度高,使用方便的传 感器用于诊断血吸虫病对于保护人们身体健康是非常必要的。电化学免疫传感器 是结合高度专一的免疫反应与高度灵敏的电分析技术发展起来的传感装置。它具 有装置简单、操作方便、易微型化及集成化等优点。本论文考察了基于免疫组份 不同固定化方法和传感原理,发展电流型免疫传感器、电容型免疫传感器、压电 免疫传感器用于血吸虫病诊断及蛋白质分子检测。具体内容如下: 基于将日本血吸虫抗体包埋在石蜡碳粉中制成表面可更新的生物复合电极。在 优化实验条件下,敏感电极对血吸虫抗原的检测范围为0. 5-30μg/ml。基于抗C3抗 体在碳粉石蜡复合电极表面上吸附固定发展补体第三成份(C3) 电流型免疫传感 器,能在0. 06~10μg/ml范围内检测C3浓度,该传感器构制简单,所需免疫试剂 量少。基于血吸虫抗原在Nafion膜上固定构制电流型免疫传感器,能在 0. 02-4. 8μg/ml的浓度范围内测定血吸虫抗体。发展一种敏感面可再生的电流型免 疫传感器,用于测定转铁蛋白(Tf)。蛋白A包埋在Nafion膜中用于固定抗-Tf抗 体,并用化学试剂交联稳定,使敏感膜具有较大的免疫活性和较好的再生稳定性。 基于Nafion膜的固定抗IgM抗体和邻氨基酚发展一种可省略分离步骤的酶联免疫 传感器,只有通过免疫反应结合在电极表面上的酶标物接触到酶的电子介体,催 化底物反应产生电流信号,因而可以不需要分离步骤,简化了分析过程。通过蛋 白A将血吸虫抗体固定在金电极表面上发展一种电容型免疫传感器,能在 0. 4~18ng/ml范围内检测SjAg,具有响应速度快、灵敏度高、无需使用标记物等优 点。发展了一种基于石英晶体微天平传感的酶联免疫传感器,通过酶标物催化底 物生成沉淀使石英晶片频率降低来定量酶标物及待测物,它具有装置简单、携带 方便、灵敏度高等特点。


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