毛细管电泳电化学发光在药物检测方面的应用研究

【摘要】： 毛细管电泳(Capillary electrophoresis, CE)是在在施加电场的作用下,根据具有不同荷质比的带电物质在毛细管内的迁移速度的不同,从而实现样品中各组分分离的一种液相分离技术。它具有样品消耗少、分离效率高、分析时间短的特点,能够快速有效的对生物样品和药物进行分离,因而作为高效液相色谱的有益补充广泛地应用于日常分析。 电化学发光(Electmchemiluminescence, ECL)分析是电化学手段与化学发光方法相互结合的一门技术。它保留了化学发光方法所具有的灵敏度高、线性范围宽和仪器简单等特点,而且还具有控制性强、选择性好、可进行原位发光分析等优点。ECL检测技术由于其所用的仪器便宜、灵敏度高而且操作简单,被认为是跟毛细管电泳联用的合宜检测手段。联吡啶钌(Ru(bpy)32+)体系是研究得比较成熟的电化学发光体系,它在水溶液和有机溶液中发光效率高、溶解度好,在电化学发光的基础理论和分析应用中占有重要的地位。在一定电压施加下,Ru(bpy)32+在工作电极表面能被氧化成Ru(bpy)33+,而后通过和叔胺官能团的辅助作用生成激发态的Ru(bpy)32+?,该激发态通过返回到基态可以释放出光子。 基于以上技术,本文开展了以下几个方面的工作: 1.提出了基于CE分离和柱后Ru(bpy)32+ ECL检测的一种简单、灵敏度高、选择性好的绿色方法用于氯喹(CQ)的检测分析和与其它药物的分离。该体系也被用于蛋白和药物的相互作用研究中,测定了CQ和人血清白蛋白(HSA)的结合位点数目和作用常数。 2.把CE和末端Ru(bpy)32+ ECL检测器有机地结合起来,用于盐酸美沙酮的检测。将该CE-ECL方法进一步的用于美沙酮和人血清白蛋白的结合作用的研究之中,测得37°C时的结合位点数目和结合常数分别为25.8和5.8×10-3 M-1。 3.将纳米金修饰的铂电极用作CE-ECL的工作电极,对盐酸地芬尼多进行了测定,该方法重现性好、灵敏度高,与采用裸铂电极作为工作电极所获得的结果相比,该方法在对地芬尼多的测定上具有更高的灵敏度和更宽的线性范围。