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利多卡因对LPS诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5表达的影响

曾悦翔  
【摘要】:目的:观察不同剂量利多卡因预处理对LPS诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5(Aquaporin-5, AQP-5)的影响,并对其可能机制进行初步探讨。 方法:原代培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分7组(n=6):1.空白对照组;2.溶剂对照组(无水乙醇,0.4μl/ml); 3.LPS组;4. Lidol (2μl/ml)+LPS组;5.Lido2(20(μg/ml)+LPS组;6.Lido3(200μg/ml)+LPS组7.Lido3组(单纯Lido,终浓度为200μg/ml),LPS终浓度为1μg/ml,相应组加入LPS 10min前加入Lido,4h后ELISA检测上清液中TNF-α含量,RT-PCR及western blot检测各组细胞AQP-5mRNA及蛋白表达水平。 结果: 1. ELISA结果显示,空白对照组、溶剂对照组及Lido3组细胞上清液中TNF-α含量分别是(224.3±43.8),(222.6±34.4),(213.7±87.2),三组间无明显统计学意义(P0.05);与前面三组对照组比较,LPS组及Lido+LPS组TNF-α释放增加(P0.05);与LPS组比较,Lido+LPS组TNF-α释放减少(P0.05),Lidol+LPS组、Lido2+LPS组、Lido3+LPS组组间TNF-α释放虽无明显统计学差异,但数值上呈现明显的剂量依赖性。 2. RT-PCR结果显示,空白对照组、溶剂对照组及Lido3组均有AQP-5 mRNA表达,三者无明显差异(P0.05);前面三组对照组比较,LPS组及Lido+LPS组AQP-5 mRNA表达降低(P0.05);与LPS组比较,Lido+LPS组AQP-5 mRNA表达增加(P0.05), Lidol+LPS组、Lido2+LPS组、Lido3+LPS组组间AQP-5 mRNA表达虽无明显统计学差异,但数值上呈现明显的剂量依赖性。 3. Western blot结果显示,空白对照组、溶剂对照组及Lido3组均有AQP-5蛋白表达,三者无明显差异(P0.05);前面三组对照组比较,LPS组及Lido+LPS组AQP-5蛋白表达降低(P0.05);与LPS组比较,Lido+LPS组AQP-5蛋白表达增加(P0.05),Lidol+LPS组、Lido2+LPS组、Lido3+LPS组组间AQP-5蛋白表达虽无明显统计学差异,但数值上呈现明显的剂量依赖性。 结论:在LPS所致ALI细胞模型中,2-200μg/ml利多卡因预处理可上调肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-5 mRNA和蛋白表达,其机制可能与抑制TNF-α释放有关。


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