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普萘洛尔治疗血管瘤机制的初步研究

李锁  
【摘要】:目的 1.观察普萘洛尔对体外培养脐静脉内皮细胞(HUVEC-12细胞)细胞毒及增殖的影响。 2.通过VEGF/ERK的胞内信号转导途径,探讨普萘洛尔治疗血管瘤的分子机制。 方法 1.采用不同浓度普萘洛尔干预内皮细胞,光学显微镜下观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞细胞毒及增殖情况;蛋白质免疫印迹(western blot)法测定磷酸化ERK变化。 2.采用不同浓度VEGF刺激内皮细胞,应用蛋白质免疫印迹(western blot)法测定磷酸化ERK变化,建立内皮细胞VEGF阳性系统。 3.采用不同浓度普萘洛尔干预经VEGF刺激的内皮细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞细胞毒及增殖情况;蛋白质免疫印迹(western blot)法测定磷酸化ERK变化。 4.在抑制剂干预研究中,应用ERK信号通路特异性抑制剂PD98059、普萘洛尔分别及联合处理经及未经VEGF刺激内皮细胞,观察内皮细胞细胞毒、增殖及磷酸化ERK的变化。 结果 1.普萘洛尔浓度在1-16ug/ml的范围内,对正常人血管内皮细胞安全、无细胞毒作用。 2. VEGF在20ng/ml时内皮细胞磷酸化ERK表达最强,以此浓度建立内皮细胞VEGF阳性系统。 3.与空白对照组相比,普萘洛尔对经VEGF刺激内皮细胞无细胞毒作用(P0.05);在普奈洛尔浓度为8-16ug/ml时能明显抑制内皮细胞的增值及磷酸化ERK表达(P0.05) 4.与空白对照组比较,PD98059能明显抑制经VEGF刺激的内皮细胞增殖和降低磷酸化ERK水平;普萘洛尔具有PD98059相似效应,普萘洛尔与PD98059可能具有协同作用。 结论 普萘洛尔治疗血管瘤的机制可能为通过抑制(?)VEGF诱导的内皮细胞的胞内ERK信号转导,从而促进血管瘤的消退。


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