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双J管生物被膜细菌耐药及其相关基因研究

李颖佳  
【摘要】:1.双J管感染生物被膜细菌临床分布及耐药特性的研究 目的 筛选双J管感染生物被膜菌,了解其临床分布,通过对其生物被膜菌与浮游菌耐药差异性的分析,探讨细菌生物被膜对抗生素的耐药特性,尝试了解生物被膜菌在体内较“真实”的耐药性。 方法 (1)双J管感染生物被膜菌的筛选鉴定及临床分布:收集湘雅三医院2009年2月~2009年7月92例患者双J管。筛选生物被膜菌株和相应浮游株;了解尿路感染生物被膜细菌的临床分布。 (2)临床耐药差异性分析:浮游菌与双J管生物被膜菌在MH培养基上耐药性分析以及生物被膜阳性菌在泊洛沙姆(Poloxamer,F-127)培养基和普通MH培养基上耐药差异性分析。 结果 (1)我院92例患者双J管中经刚果红试验筛选出生物被膜阳性菌41株,阳性率为45%,经鉴定,以肠球菌属(46.3%)和革兰阳性的葡萄球菌属(38.8%)占多数。葡萄球菌属中又以血浆凝固酶阴性菌为主,如表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和人型葡萄球菌;粪肠球菌位居整个感染菌的第一位。而革兰阴性菌只占生物被膜菌的14.6%,包括铜绿假单胞菌和大肠杆菌。 (2)生物被膜菌组与相应的浮游菌组在普通MH培养基上药敏率的比较差异无统计学意义(P0.05);生物被膜菌在Poloxamer培养基和MH培养基上,大多数药物的耐药率差异有统计学意义(P0.05),且生物被膜菌在Poloxamer培养基中耐药率较MH培养基更高。 结论 本院双J管感染生物被膜菌在临床上以葡萄球菌属和肠球菌属为主;生物被膜菌与浮游菌在体外耐药性分析未见明显差异,Poloxamer培养基有可能模拟出生物被膜菌的生存环境,而且对药物的耐受性更强。 2.粪肠球菌生物被膜形成与其相关基因三者相关性研究 目的 以粪肠球菌为研究对象,探讨粪肠球菌相关基因(明胶酶编码基因gelE、菌毛操纵子ebpA),与肠球菌生物被膜形成的相关性;对抑制生物被膜的形成提供理论依据。 方法 采用逆转录PCR、实时荧光定量PCR方法,对生物被膜和浮游菌组细菌ebpA、gelE两种与生物被膜形成相关的基因其表达进行检测。 结果 ebpA、gelE基因对粪肠球生物被膜菌形成有一定关系。生物被膜菌组ePbpA表达量分别是浮游菌组的2019倍,表明ebPA与促进生物被膜形成有关,生物被膜菌组gelE表达量分别是浮游菌组的1/138,说明gelE是抑制生物被膜形成原因之一 结论 ebpA、gelE基因与粪肠球生物被膜菌形成有一定关系。ebpA与促进生物被膜形成有关,gelE与抑制生物被膜形成有关。


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