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依达拉奉治疗大鼠脊髓损伤急性期的实验研究

王微  
【摘要】:目的:研究依达拉奉对大鼠脊髓损伤急性期神经细胞保护作用,以甲基泼尼松龙为对照,探讨脊髓继发性损伤的有效治疗方案。 方法:选用体重200-250g的健康6月龄SD大鼠144只,雌雄不限,雌雄分开饲养,按照8小时内用药与8小时后用药将经改良Allen'S法建立脊髓急性损伤模型后大鼠随机分为两组。第一组72只,随机分为3个亚组,A1、B1、C1亚组,各组24只大鼠,A1组在制造动物模型后2、4、6、8h时经尾静脉予以生理盐水作为C1组对照,每个时间点随机抽取6只大鼠;B1组制造动物模型后2、4、6、8h时经尾静脉予以30mg/Kg的甲泼尼松龙,每个时间点随机抽取6只大鼠;C1组制造动物模型后2、4、6、8时经尾静脉予以3mg/Kg的依达拉奉,每个时间点随机抽取6只大鼠,治疗周期均为2h。第二组72只,随机分为3个亚组,A2、B2、C2、亚组,各亚组24只SD大鼠。A2组在制造动物模型后10、12、14、24h时经尾静脉予以生理盐水作为C2组对照,每个时间点随机抽取6只大鼠,B2组在制造动物模型后10、12、14、24h时经尾静脉予以甲泼尼松龙5.4mg/kg/h维持治疗,每个时间点随机抽取6只大鼠;C2组在造模后10、12、14、24h时经尾静脉予以依达拉奉3mg/kg,每个时间点随机抽取6只大鼠,治疗时间为均为2h。处死每组中相应批次大鼠,每个时间点随机抽取3只大鼠,心脏灌注及固定后,取出损伤节段区脊髓组织,酒精梯度脱水后行石蜡包埋切片,切片后采用免疫组化法对Caspase-3、Bcl-xl进行检测,计数阳性细胞数。观察第一组剩余大鼠于治疗后2天每个用药时间点大鼠运动功能,进行BBB评分,观察第二组损伤经治疗后2天每个用药时间点剩余大鼠观察运动功能,进行BBB评分。所得数据以SPSS15.0对两组所得数据进行分析。 结果: 1.运动神经功能评分:采用BBB评分法进行评分,对脊髓损伤后的运动神经功能评估,第一组(8h内用药)各亚组中A1组在治疗2天后运动神经功能恢复较差,8h开始用药大鼠评分为:0.28±0.04,B1组恢复较好,8h开始用药大鼠评分为:0.35±0.04,结果:B1C1A1(P0.05),有统计学差异。第二组(8h后用药)各亚组中A2组治疗2天后运动神经功能恢复较差,24h开始用药大鼠评分为:0.36±0.03,C2组恢复较好,24h开始用药大鼠评分为:0.43±0.05,结果:A2B2C2(P0.05),有统计学差异。 2.capase-3阳性细胞数,第一组至伤后第6小时达高峰,B1组最少,A1组最多,C1组介于两者之间,B1C1A1(P0.05);有统计学差异。Bcl-xl表达水平:C1B1A1(P0.05);第二组capase-3阳性细胞数持续增高,24小时A2组最高:C2组最少,A2与B2组相比P0.05,无显著性差异,A2C2,P0.05,有统计学差异;Bcl-xl表达水平:C2B2A2(P0.05),有统计学差异。 结论: 1.依达拉奉对大鼠脊髓损伤急性期脊髓神经细胞具有保护作用,减轻脊髓继发性损伤。 2.大鼠脊髓损伤8小时后,依达拉奉对脊髓神经细胞保护作用优于甲基泼尼松龙。


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