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尿酸对大鼠脊髓半横断损伤后神经保护作用的实验研究

隆峰  
【摘要】:目的研究尿酸(Uric acid, UA)对SD大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury, SCI)模型的脊髓神经功能的保护作用。 方法健康成年SD大鼠65只(雌雄不计),随机分成三组:(1)假手术组(Sham operation group, n=15);(2)脊髓损伤组(Control group, n=25);(3)UA治疗组(UA treatment group, n=25)。其中脊髓损伤组和UA治疗组的大鼠按照其处死的时间再细分为五个亚组,即1天组,3天组,7天组,14天组和21天组,每时间点5只大鼠。采用脊髓半横断法制作脊髓损伤模型,假手术组只行T9棘突及椎板切除,不行脊髓半横断操作。UA治疗组大鼠在造模成功前30分钟及造模成功后6小时经腹腔注射UA(Sigma公司产品)500mg· kg-1(用0.9%氯化钠溶液配成悬浮液)20mg/kg,以后每天给药一次。脊髓损伤组大鼠则在造模成功后给予等量的生理盐水经腹腔内注射,给药次数和频率与UA治疗组相同。所有大鼠在处死前置于光照充足、平坦的水泥地面上行BBB评分,评估脊髓损伤后大鼠脊髓运动神经恢复功能,统计学分析两组间是否有差异。所有大鼠在造模后的1、3、7、14、21天分别处死,行主动脉插管灌注固定并取脊髓组织标本,每只大鼠取以损伤段为中心的上段约1cm的脊髓组织行脱水石蜡包埋,在每个脊髓脱水石蜡包埋标本纵轴中心取横行切片,行尼氏染色病理学检测。损伤段为中心下端1cm组织洗净后储存于-70℃冰箱中,并对损伤部位脊髓组织丙二醛(Malondialdehyde,MD A)含量进行检测,各组实验数据以均数±标准差(Mean±SE)表示,采用SPSS13.0统计软件进行分析,与对照组比较应用t检验,各组间比较应用F检验。P0.05表示具有显著性差异。 结果脊髓损伤后SCI组和UA治疗组所有大鼠的BBB评分值均呈逐渐升高趋势,UA治疗组的BBB评分值均明显高于同期的SCI组。SPSS软件分析除术后1天组BBB评分与脊髓损伤组相比无明显统计学意义以外,3天、7天亚组比较其SCI组与UA治疗组的P值0.05,14天、21天亚组其P值均小于0.01,均有显著统计学意义。 尼氏染色病理学检测显示假手术组大鼠脊髓组织神经元形态完整,胞浆内尼式小体清晰可见。SCI组在光学显微镜下可见脊髓组织正常结构丧失,灰质形成较大空腔,少见完整的细胞结构,胞浆混浊,尼氏体显示不清。UA治疗组脊髓组织结构比较清晰,损伤侧的灰质内,偶见小空腔,有较多的正常神经元,神经元细胞核稍浓聚,核膜完整,胞浆内尼氏体清晰可见,轴突清晰完整。 MDA含量检测可见SCI组、UA治疗组与假手术组相比,其脊髓损伤区内MDA含量与在1-7天左右呈不断增加的趋势。其中SCI组脊髓损伤区内MDA含量均要高于假手术组,且两者间存在统计学显著性差异(p0.05)。UA治疗组内MDA含量低于SCI组,其中1d,3d,7d亚组两组数据相比均存在统计学显著性差异(p0.05),但14d与21d两亚组的数据统计学差异不明显。 结论尿酸(UA)对脊髓损伤后下肢运动功能的恢复和脊髓神经细胞的保护具有积极意义。SD大鼠脊髓半横断损伤后,可以通过抑制脂质过氧化反应,减少氧化应激对脊髓神经细胞的损伤。


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