收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

白色念珠菌诱导活化的巨噬细胞中半乳糖凝集素-3的表达及作用

龙达  
【摘要】:第一部分白色念珠菌对巨噬细胞U937的活化作用 实验目的:观察白色念珠菌对人巨噬细胞系U937细胞的活化作用。 方法:观察不同浓度不同作用时间点的白色念珠菌刺激人巨噬细胞系U937细胞后细胞培养液中NO浓度和Galectin-3的表达以及对细胞存活率的影响。 结果:1、白色念珠菌终浓度与巨噬细胞系U937细胞存活率与因子表达:在107PFU/mL及以下时,,促进细胞生长,相对存活率升高,细胞中NO及Galectin-3的表达增强,各组间比较有统计学意义(P0.05);在108PFU/mL及以上时,可抑制细胞生长,相对存活率降低,细胞中NO及Galectin-3的表达降低,各组间比较有统计学意义(P0.05) 2、白色念珠菌作用时间与巨噬细胞系U937细胞存活率与因子表达:白色念珠菌处理3h及以上时,可促进细胞生长,细胞中NO及Galectin-3的表达增强,各组间比较有统计学意义(P0.05);白色念珠菌处理3h及以下时,对细胞生长影响不大,细胞中NO及Galectin-3的表达变化不明显,组别之间差异无统计学意义(P0.05)。 结论:1、白色念珠菌浓度在107PFU/mL及以下时,刺激人巨噬细胞系U937细胞活化。对NO浓度和Galectin-3的表达以及对细胞存活率的影响呈正相关。 2、白色念珠菌作用时间3h及以上时人巨噬细胞系U937细胞活化。 第二部分半乳糖凝集素-3在白色念珠菌诱导的人巨噬细胞系U937细胞中的表达及其功能 目的:观察Galectin-3在白色念珠菌诱导的人巨噬细胞系U937细胞中的表达并探讨其功能。 研究方法:通过慢病毒载体介导的Galectin-3-shRNA沉默基因,建立半乳糖凝集素-3基因阻断的人U937巨噬细胞株模型,体外评价和观察galectin-3在人巨噬细胞系U937细胞受白色念珠菌感染时的细胞存活率的影响以及细胞培养液中NO浓度、IL-8、TNF-a、COX2、TLR2和TLR4表达的变化,Galectin-3与白色念珠菌的结合测定,激光共聚焦显微镜观察Galectin-3与TLR2、TLR4的表达分布。 结果:1、利用通用引物对菌落进行PCR检测。获得阳性克隆4个,送3号样品进行测序验证。测序结果表明,针对galectin-3的shRNA序列已经成功连入慢病毒载体。 2、定量PCR和Westernblot检测表明细胞内的Galectin-3表达受到显著的敲减。 3、白色念珠菌刺激U937后,可促进细胞生长,细胞中IL-8、TNF-a、COX2、TLR2和TLR4表达增强,NO水平呈上升,组别之间有统计学意义。沉默Galectin-3后细胞生长受到抑制,细胞相对存活率下降,细胞中IL-8、TNF-a、COX2、TLR2和TLR4表达增强,NO水平呈上升,组别之间有统计学意义。 4、结合测定结果随着白色念珠菌浓度的升高,Galectin-3与白色念珠菌的结合程度相应加深,当浓度在107PFU/mL及以上时有明显上调,组别之间有统计学意义,当浓度在109PFU/mL时,与108PFU/mL组相比,无统计学意义。沉默Galectin-3后,得到相似结果。但是结合程度较对照组明显下降。 结论: 1、本实验成功构建了慢病毒载体介导的Galectin-3-shRNA沉默基因人U937巨噬细胞株模型。 2、Galectin-3对白色念珠菌刺激人巨噬细胞系U937细胞后细胞培养液中NO浓度、IL-8、TNF-α、COX2、TLR2和TLR4表达的调节呈负相关,对细胞存活率的影响呈正相关。 3、Galectin-3能与白色念珠菌直接结合。 第三部分半乳糖凝集素-3在白色念珠菌诱导的人巨噬细胞系U937细胞中的作用机制分析 目的:探讨半乳糖凝集素-3在白色念珠菌诱导的人巨噬细胞系U937细胞中的作用机制。 研究方法:蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中FAS、NF-κB、JNK和ERK1/2蛋白含量。 结果:1、在Galectin-3被抑制的情况下,白念珠菌感染会造成细胞中FAS和NF-κB蛋白的表达上调。 2、在Galectin-3被抑制的情况下,白念珠菌感染会造成细胞中磷酸化JNK表达上调和磷酸化ERK1/2蛋白表达下调。 结论:1、在白色念珠菌诱导的人巨噬细胞系U937细胞中Galectin-3参与了MAPK通路的应答激活。 Galectin-3通过调节Fas和NF-κB的表达参与抗细胞凋亡作用。 3、Galectin-3是抑制白念珠菌感染的关键分子和潜在的治疗靶标。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘丹;;白色念珠菌厚壁孢子快速生成试验[J];工企医刊;2000年03期
2 曹先伟,冀朝辉,万喆,李若瑜;白色念珠菌耐药株CYP51基因突变热点探讨[J];中华医院感染学杂志;2004年11期
3 孙慎侠,曲晓娟,伦永志,付昌斌;白色念珠菌拮抗菌株的筛选[J];中国微生态学杂志;2004年06期
4 張永聖;;桂皮乙醚抽出物水溶部分抗白色念珠菌作用的實驗研究——二.抗生素對桂皮乙醚抽出物水溶部分抗白色念珠菌作用的影響[J];微生物学报;1958年04期
5 沈菊初;;在牛胆汁中白色念珠菌芽管的形成[J];国际检验医学杂志;1981年02期
6 常山,张雅萍,肖光夏;抗白色念珠菌IgY的稳定性与应用研究[J];第三军医大学学报;2001年12期
7 ;病原真菌[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年01期
8 ;病原真菌[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年10期
9 曹文飞,李川生;用ELISA检测白色念珠菌单克隆抗体[J];细胞与分子免疫学杂志;1985年02期
10 冯贻泽,梁超;一种分离鉴别白色念珠菌的专一性培养基[J];微生物学通报;1991年04期
11 董建芳;鹅口疮引起白色念珠菌脑膜炎1例[J];甘肃科技;1995年04期
12 陈建魁,牟兆钦;白色念珠菌感染的分子生物学诊断研究进展[J];军事医学科学院院刊;1997年01期
13 韩莉,万福珠,刘朝奇;白色念珠菌促进荷瘤鼠肿瘤生长作用机制的初步研究[J];湖北三峡学院学报;1997年03期
14 ;病原真菌[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年08期
15 付萍,刘晓莉,李学平,袁志伟,蔡梅;白色念珠菌天冬氨酸蛋白酶与菌株毒力的研究[J];昆明医学院学报;2003年01期
16 刘春国;周斌;;CHROMagar Candida培养基分离鉴定白色念珠菌[J];广西医学;2006年01期
17 张庆华;白色念珠菌的细胞壁和抗原结构及生物化学研究[J];医学新知杂志;1996年01期
18 暨明,韦超凡;白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡通路的探究[J];微生物学杂志;2001年04期
19 陈曦,陈江野;Kl LAC4用作白色念珠菌的报告基因[J];生物化学与生物物理学报;2000年05期
20 陈曦,陈江野;白色念珠菌形态转换的调控[J];生命的化学;2000年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 娄域峰;张华;施新萍;;半乳糖凝集素-3在心脏疾病诊断中的应用[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
2 赵旭赟;;Galectin-1在HIF-1α诱导的髓系白血病分化过程中的作用[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
3 古爱军;周林玉;;Galectin-3在肾细胞癌中的表达及意义[A];华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会论文汇编[C];2011年
4 杨玉芝;韩长雪;杜馥曼;王丹;向朝峰;;Galectin-3和CD44v6在甲状腺癌中的表达及临床价值[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
5 娄域峰;施新萍;董侃;倪一鸣;;半乳糖凝集素-3在急性冠状动脉综合征和稳定性冠心病诊断中的应用[A];《中华急诊医学杂志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine创刊一周年庆典《中华急诊医学杂志》第十届组稿会、第三届急诊医学青年论坛论文汇编[C];2011年
6 唐秀英;陈瑞爱;刘成宏;李琳;王林川;朱文冠;区德庆;林琦萍;黄文科;;鸡附红细胞体与白色念珠菌混合感染的诊治[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
7 廖辉;张海涛;;脑膜白血病合并白色念珠菌脑膜炎[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
8 胡庆丰;周永列;吕火烊;朱永泽;王珍妮;邱莲女;张玉霞;;流式细胞术快速检测白色念珠菌对氟康唑敏感性方法的研究[A];2009年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2009年
9 张美玲;王宏伟;田洹;张兆芳;魏莲花;;甘肃黄芩中黄芩苷、黄芩苷元、黄芩苷盐对白色念珠菌的抑制[A];甘肃省中医药学会2009年学术研讨会论文专辑[C];2009年
10 王明悦;康克飞;唐宁风;李若瑜;Pranab K.Mukherjee;Mahmoud A.Ghannoum;;白色念珠菌分泌性IL-12抑制因子的功能研究和部分纯化[A];2007中华医学会第二次医学真菌学术会议暨医学真菌实验室研究技术新进展学习班论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 龙达;白色念珠菌诱导活化的巨噬细胞中半乳糖凝集素-3的表达及作用[D];中南大学;2012年
2 汤东;胰腺星状细胞高表达Galectin-1促进胰腺癌免疫抑制及进展的研究[D];南京医科大学;2012年
3 陈锋;胶质瘤中Runx2、Galectin-3的表达及其相互关系[D];武汉大学;2010年
4 吕坤;Galectin-9在病毒性心肌炎发病中的作用及其机制[D];复旦大学;2009年
5 万黎;Galectin-3特异性siRNA对肺癌肿瘤干细胞生物学功能影响的研究[D];华中科技大学;2010年
6 李来邦;重组腺病毒载体Ad5-galectin-9对大鼠肝移植抗排斥反应的实验研究[D];昆明医学院;2009年
7 何文涛;阻断天然免疫Tim-3信号或TLR信号促进移植耐受诱导[D];华中科技大学;2010年
8 倪坚;白色念珠菌Crk1相互作用蛋白的筛选与功能研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
9 李宇华;低分子量苹果多糖的结肠炎癌变预防作用及机制研究[D];第四军医大学;2010年
10 张斌;蜈蚣提取液的分离纯化与治疗肝细胞性肝癌机制的研究[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李晶;重组人Galectin-1蛋白的表达、纯化及生物活性的检测[D];第四军医大学;2010年
2 张慧娟;半乳凝集素-3(Galectin-3)在心力衰竭患者中的表达及其对预后的影响[D];大连医科大学;2011年
3 张国强;肝细胞肝癌中galectin-9表达及其临床意义[D];南方医科大学;2011年
4 黄丽;植入早期小鼠子宫内膜形态学及Galectin-3、整合素α4表达的研究[D];安徽医科大学;2011年
5 袁中旭;胰腺星状细胞高表达Galectin-1促进胰腺癌肿瘤血管生成的研究[D];南京医科大学;2012年
6 徐跃;中华蟾蜍与日本蟾蜍皮肤galectin-3 cDNA的克隆、序列分析及原核表达[D];浙江农林大学;2012年
7 薛慧婷;果胶与半乳凝素-3的相互作用对T细胞聚集及凋亡的影响[D];东北师范大学;2012年
8 孙娅莉;仔猪galectins基因的组织分布及断乳前后其在胃肠道表达差异研究[D];河南农业大学;2010年
9 赵霞;Tim-3/Galectin-9在小鼠急性移植物抗宿主病中的表达及意义[D];华中科技大学;2010年
10 孙成新;半乳糖凝集素3的制备及果胶对其与T细胞相互作用的影响[D];东北师范大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 唐啸;治疗鹅口疮 禁用抗生素[N];中国医药报;2007年
2 江苏泰州市人民医院儿科主任医师 张亚明;鹅口疮治疗必须彻底[N];健康报;2008年
3 龙翔;念珠菌性前列腺炎的治疗[N];家庭医生报;2007年
4 文佩;顽固的霉菌性阴道炎[N];农村医药报(汉);2006年
5 欣欣;霉菌性阴道炎的致病因素[N];保健时报;2005年
6 袁俊荣;真菌性阴道炎反复发作与性生活有关[N];卫生与生活报;2007年
7 保健时报实习记者 李清柳;小心 别让难言之痒盯上你[N];保健时报;2006年
8 晓康;假牙戴用不当有啥危害[N];医药养生保健报;2008年
9 克雪;抗真菌兽药的合理应用[N];河南科技报;2008年
10 张运昌;非淋菌性阴道炎的治疗[N];保健时报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978