收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

纳米脂质体槲皮素对肝损伤大鼠保肝作用的研究

张洋  
【摘要】:目的肝脏易发生各种代谢性、感染性疾病以及原发性和继发性肿瘤。我国是肝病高发区,有十分之一多的人口感染肝炎,而乙型肝炎表面抗原阳性患者比阴性者显著增高。肝炎导致的原发性肝癌是在我国肿瘤死因中占第二位的常见病。因此研究肝靶向性治疗药物具有重要意义。 使用特殊的载体是目前实现肝靶向药物运输的主要方式,而纳米载体可以改变药物的体内分布,显示出体内分布的靶向性。载药纳米颗粒进入人体内迅速被网状内皮系统(RES)摄取,而RES主要分布于肝,因而可借此种被动靶向作用达到肝靶向给药的目的。脂质体(liposome)是磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的一种分子有序组合体,为多层囊泡结构,每层均为类脂双分子膜,层间和脂质体内核为水相,双分子膜为油相。载药脂质体纳米粒具有与细胞结构相似,有生物膜的特性和功能,进入体内被生物降解,免疫原性小、毒性极低;已广泛用于运载水溶性和脂溶性药物。 槲皮素(Quercetin)及其衍生物是自然界分布最广的一种黄酮类化合物,其具有抗癌、抗炎症、抗纤维化、抗氧化和清除自由基、抗病毒、逆转某些肿瘤的耐药性、扩张血管、降低血压的药理活性,并对机体免疫有增强作用;它可对肝癌细胞显出较强的细胞毒作用,能有效抑制肝癌细胞的生长;对肝损伤具有良好的保护作用及一定的抗肝纤维化的作用,在治疗肝脏疾病中有着广阔的应用前景。但由于其普通制剂不溶于水,肝靶向性差,直接应用可影响凝血功能,限制了其在肝病治疗中的应用。根据上述思想,以纳米脂质体为药物载体包裹中药成分槲皮素制成纳米脂质体槲皮素,改善给药系统水溶性,实现肝靶向给药,使纳米药物在肝脏中更加聚集。 本课题目的是首先制备出水溶性较好的纳米脂质体槲皮素,验证其肝脏靶向性及体内代谢的药效成分,然后应用于肝损伤模型动物考察其对肝脏的保护作用。 方法采用高压均质-喷雾干燥法制备纳米脂质体槲皮素,使用透射电镜、粒度仪观察其形态及测量其粒径,HPLC法测量药物包封率。使用CCL4加猪血清配合乙醇饮食建立复合大鼠肝损伤模型,同时建立测定模型大鼠血浆及各组织中槲皮素的HPLC法,肝损伤大鼠分组后分别给予槲皮素和纳米脂质体槲皮素,观察各组模型大鼠体内槲皮素的时间空间分布,并验证其靶向性。给予正常大鼠纳米脂质体槲皮素,使用高效液相色谱-质谱法(LCMS)分析大鼠血浆中的药物代谢产物是否存在药效成分,为药效学研究提供依据。将肝损伤模型大鼠按体重随机分为正常对照组、损伤模型对照组、纳米脂质体槲皮素组、槲皮素药物组,空白纳米脂质体组后按不同剂量给药,比较各组大鼠血清ALT、AST、TBiLi、TBA、TP;各组大鼠肝脏系数;各组大鼠肝脏的病理改变;各组大鼠肝脏MDA、GSH-Px、SOD、LN、HA、PCⅢ、Ⅳ-C。同时通过各组大鼠肝脏Bcl-2和Bax蛋白表达的比较,探讨纳米脂质体槲皮素保护肝脏的机制。 结果采用本实验方法制得的纳米脂质体槲皮素粒径为123±31nm,纳米粒子呈类圆形,表面有厚度均匀的包衣包裹,且粒度分布均匀。为测定槲皮素纳米药物所建立的HPLC法色谱分离良好,精密度、重现性、方法回收率良好。纳米脂质体槲皮素的包封率为91.18±0.78%,载药量为0.61±0.08mg/mg。本实验所建立的复合肝损伤模型大鼠达到实验要求。用于测定血浆及各组织中槲皮素的HPLC法色谱分离及专属性良好,精密度、重现性、方法回收率良好。槲皮素在肝损伤大鼠体内的药物半衰期为10min,而纳米脂质体槲皮素在大鼠体内的药物半衰期达到2h,脂质体延长了槲皮素在大鼠体内的循环时间,纳米脂质体槲皮素具有一定的缓释性。模型大鼠体内槲皮素由注射纳米药物后5min起即可较浓集于肝,以10min后更为明显,且明显高于对照组(P0.05),槲皮素被制成纳米药物后提高了其对肝脏、脾脏的趋向性,降低了其对心脏、肾脏的趋向性;纳米脂质体槲皮素较槲皮素有很好的肝靶向性。当纳米脂质体槲皮素药物剂量增加到100mg/kg时,大鼠出现死亡。大鼠血浆中槲皮素代谢产物测定的色谱及质谱条件可满足实验需要,使用液相色谱-质谱联用法可确认大鼠血浆代谢产物中含有槲皮素、柽柳素、异鼠李素等药效成分。纳米脂质体槲皮素组及槲皮素组大鼠的一般状况明显优于损伤模型对照组和空白纳米脂质体组,但较正常对照组稍差,同剂量纳米脂质体槲皮素组在血清AST、ALT、TBiLi、TBA、TP、ALB及肝脏MDA、GSH-Px、SOD、LN、HA、PCⅢ、Ⅳ-C等指标总体较损伤对照组、槲皮素组及空白脂质体纳米药物组有明显的提高。纳米脂质体槲皮素、槲皮素及空白脂质体纳米药物对肝损伤大鼠肝功能保护在AST、ALT、TBiLi、TBA上呈现出由高到低的剂量-效应依赖关系。各组大鼠肝组织光镜观察可见相同剂量的槲皮素纳米脂质体药物组的肝组织病变情况好于槲皮素组和空白脂质体纳米粒组及损伤模型组,特别是高剂量的纳米脂质体槲皮素组大鼠的肝组织病理情况接近正常对照组;同时,空白脂质体纳米粒对肝损伤大鼠的肝脏病理情况亦有所改善。损伤模型对照组、纳米脂质体槲皮素高剂量组、槲皮素药物高剂量组,空白纳米脂质体高剂量组及正常对照组的大鼠肝脏Bcl-2蛋白的表达依次升高,而Bax蛋白表达则是依次降低。 结论所制备的纳米脂质体槲皮素粒度分布均匀,载药量、包封率高。本实验制备的纳米脂质体槲皮素与肝损伤模型大鼠肝脏有较强的亲和力,具有良好的肝靶向性,是十分理想的靶向性给药系统。本实验制备的纳米脂质体槲皮素同时具有较好的脾靶向性,有一定的药物缓释性,可较长时间维持血药浓度。纳米脂质体槲皮素在正常大鼠体内的血浆代谢产物中存在药效成分槲皮素、柽柳素及异鼠李素。纳米脂质体槲皮素对模型大鼠的肝脏保护优于未纳米化的槲皮素及空白脂质体纳米药物,且呈正相量效关系,100mg/kg以上的纳米脂质体槲皮素会产生致命的毒性反应。纳米脂质体槲皮素保护肝脏的机制是降低肝脏MDA水平,增强肝脏SOD和GSH-Px的活性及增强Bcl-2蛋白的表达和减弱Bax蛋白的表达。空白脂质体纳米药物亦有保护肝脏的功效,亦呈现正相量效关系。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈伟;修瑞娟;;脂质体包裹的前列腺素E1在缺血性疾病中的应用[J];山东医药;2010年52期
2 王军;谈弋;;甲基莲心碱纳米脂质体在小鼠体内组织分布的研究[J];中国药师;2011年05期
3 王青松;沙先谊;方晓玲;;紫杉醇纳米脂质体的制备及其在小鼠体内组织分布[J];中国临床药学杂志;2006年04期
4 王青松;沙先谊;韩丽妹;郭洁;方晓玲;;紫杉醇纳米脂质体的制备与大鼠体内药动学[J];中国新药杂志;2006年21期
5 顾宜,石玉,张三奇,薛克昌,李煜楠;大黄素纳米脂质体的制备和质量评价[J];第四军医大学学报;2003年05期
6 张晓云;倪京满;乔华;;鬼臼毒素纳米脂质体抗肿瘤作用的研究[J];中国中药杂志;2006年02期
7 何文;吴燕;代文兵;陈健;;羟基喜树碱包衣纳米脂质体的制备及在小鼠体内组织分布的研究[J];中国药学杂志;2006年03期
8 陈静;张晓云;倪京满;魏虎来;;鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞的凋亡诱导作用[J];中国临床药理学与治疗学;2006年08期
9 赵若威;王强;刘立恒;樊荣;;尼莫地平纳米脂质体制备工艺及处方优化研究[J];黑龙江医学;2006年11期
10 徐云龙;王伟;钱秀珍;;茶树油纳米脂质体制备及处方设计与优化[J];沈阳药科大学学报;2007年05期
11 路薇薇;吴敏;奚政君;姚俊宇;;辛夷挥发油纳米脂质体的毒性研究[J];上海交通大学学报(医学版);2007年06期
12 张璐;张阳德;;磁性纳米脂质体的制备及特性研究[J];中国现代医学杂志;2010年17期
13 罗琥捷;李临生;;鱼腥草挥发油纳米脂质体的制备[J];陕西中医;2005年12期
14 简江波;袁媛;杨柏灿;刘昌胜;;皮肤外用纳米马钱子碱脂质体的镇痛抗炎作用[J];中成药;2006年12期
15 蒋正立;朱萍;;纳米脂质体研究新进展[J];海峡药学;2008年11期
16 梁巧余;孙转;葛志强;;星点设计-效应面法优化蛋白纳米脂质体的制备工艺[J];中国生化药物杂志;2010年04期
17 邓启盼;曹亚;;纳米脂质体应用于肿瘤研究的进展[J];国际病理科学与临床杂志;2010年06期
18 梅华;;天麻素纳米脂质体的制备及其体外释药特性研究[J];中国药师;2011年04期
19 张桂芳,朱家壁,庄妍,胡健;尼莫地平纳米脂质体制备工艺及处方优化研究Ⅰ[J];中国药科大学学报;2003年01期
20 仝新勇;周建平;谭燕;吴春勇;林文垚;刘馨;;紫杉醇纳米脂质体在大鼠体内的药动学[J];中国医院药学杂志;2006年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘超;闵苏;孙善全;;在内毒素脑损伤大鼠模型中内毒素剂量和作用时间对脑红蛋白表达变化的影响[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
2 常越;张建中;;高血糖大鼠脑缺血再灌注海马CA3区神经元中胞浆磷脂酶A2表达的上调[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年
3 赵小贞;林清;林凌;王玮;;拟痴呆大鼠海马线粒体膜电位、细胞色素C和Bax蛋白的变化[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
4 牛朝诗;杨艳艳;;泛素连接酶hHrd1在帕金森病大鼠模型中脑的表达及其意义[A];中国医师协会神经外科医师分会第二届全国代表大会论文汇编[C];2007年
5 桂定坤;顾勇;彭艾;林善锬;;黄芪水提物对阿霉素肾病大鼠ANP抵抗的改善作用[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
6 马曦;韩鹏飞;李德发;;大鼠模型研究α-硫辛酸对大豆抗原glycinin致敏的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
7 杨礼腾;刘欣;程德云;方洵;穆茂;胡晓波;聂莉;;迷迭香二萜芬提取物调控大鼠肺损伤间质过度修复的作用[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
8 韩纪昌;李红兵;张逸捷;李四红;王伯章;;阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺动脉压的影响及机理研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
9 修丽娟;魏品康;林晖明;庞彬;;消痰解郁方对慢性应激后荷瘤大鼠的行为学影响及机制研究[A];第三届江浙沪中西医结合高峰论坛论文汇编[C];2011年
10 杨鉴冰;孟巧绒;陈梅;刘东平;朱丽红;;祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠血管内皮生长因子的影响[A];全国第八次中医妇科学术研讨会论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王建枫;锌对大鼠肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)的影响及其调控机理研究[D];浙江大学;2008年
2 周春雷;五肽化合物PLNPK对大鼠抗GBM肾炎的治疗作用及其作用机制的研究[D];天津医科大学;2008年
3 云宇;缺血后处理抗大鼠肾缺血—再灌注损伤的作用机制研究[D];昆明医学院;2010年
4 刘明;梓醇对脑缺血损伤大鼠恢复早期神经功能的影响及其机制研究[D];北京中医药大学;2011年
5 张洋;纳米脂质体槲皮素对肝损伤大鼠保肝作用的研究[D];中南大学;2012年
6 沙莹;粒细胞集落刺激因子对脑缺血再灌注大鼠的治疗及其作用机制的研究[D];吉林大学;2010年
7 李国;白介素-6中和抗体及索拉菲尼对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的作用及其机制[D];中国协和医科大学;2009年
8 莫雪安;同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠模型的实验研究[D];广西医科大学;2011年
9 邹彬;电刺激干预对废用性肌萎缩大鼠线粒体生物合成和呼吸功能的影响[D];北京体育大学;2011年
10 孙凤平;参芪复方对GK大鼠肾脏NF-κB及PPARγ的影响[D];成都中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 司惠丽;大黄对实热证大鼠能量代谢影响的研究[D];山东中医药大学;2012年
2 陈连连;粉防己碱对血管性痴呆大鼠星形胶质细胞的炎性作用机制的研究[D];重庆医科大学;2012年
3 张红雷;依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障损伤的影响[D];南华大学;2012年
4 张玉坤;染料木黄酮对大鼠肺动脉高压的作用及机制研究[D];重庆医科大学;2012年
5 罗洁;他达那非对分流型肺动脉高压大鼠心肌肥厚及Cx43的影响[D];河北医科大学;2012年
6 杨一萍;MD对大鼠脑缺血再灌注损伤的治疗作用[D];安徽医科大学;2012年
7 王法娟;高碘对大鼠下腔静脉内皮细胞活化的影响[D];山东大学;2012年
8 于明明;硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的防治作用研究[D];中国海洋大学;2010年
9 王冠栋;大强度间歇游泳运动对膳食诱导肥胖大鼠肥胖及炎症因子的影响[D];河南大学;2010年
10 刘舰杭;创伤性休克对大鼠血脂、TNF-α的影响[D];石河子大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘华;雌二醇可减轻大鼠模型急性胰腺炎的器官损害[N];医药导报;2004年
2 ;电针对帕金森病大鼠模型抗氧化酶有影响[N];中国中医药报;2005年
3 张艳 方素清 姜凯 宋婷婷;慢心衰气虚血瘀证大鼠模型[N];中国中医药报;2006年
4 内蒙古医学院中医学院 任秀玲;“肺气虚”大鼠模型微观基础表达的实验研究[N];中国中医药报;2007年
5 姜之炎 吴玉晶;小儿敷贴粉可改善哮喘大鼠气道反应[N];中国医药报;2005年
6 张超群 范晓莉;山西医大用新法制备2型糖尿病大鼠模型[N];中国医药报;2005年
7 张中桥;中药能调节胃泌素水平[N];中国医药报;2005年
8 记者 王华锋;用中药抗老年性痴呆前景看好[N];中国医药报;2006年
9 张中桥;宝宝乐能调节胃泌素和CCK[N];中国中医药报;2006年
10 ;ALS治疗新方向[N];医药经济报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978