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复方何首乌浸膏对AD模型大鼠海马脑源性神经营养因子及络氨酸激酶B mRNA表达的影响

汪传香  
【摘要】:背景与目的:阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种以进行性记忆缺失和痴呆为临床特点的大脑退行性病变疾病,是一种渐进性的原发性的中枢性疾病,给社会和家庭带来了沉重的负担,医学也对此难题耗费了大量的人力和物力,但仍不能得到有效的根治。可喜的是,近年来中医中药在治疗AD方面取得了较好的疗效,本课题中复方何首乌浸膏就是在前人研究的基础上以及大量的临床实验中组方而成,以补肾活血化瘀祛痰开窍为组方原则,并在临床实验中对120例AD患者进行了疗效观察,结果发现复方何首乌浸膏组总有效率为93.33%,较西药与单味中药何首乌组比较,差异有统计学意义(P0.05),并且复方何首乌浸膏组能提高MMSE评分,降低ADL评分,说明能很好的改善AD患者的记忆及认知能力,提高患者的日常生活及社会活动能力,综上可见复方何首乌浸膏在临床试验中已经取得了较好的疗效,但对于复方何首乌浸膏治疗AD的可能作用机制,我们尚未进行实验性的研究,为了能更好的应用该方,本课题组决定对该方进行动物学的研究。故本课题组从补肾活血化瘀祛痰开窍方的组方原则出发,探讨复方何首乌浸膏对在学习记忆能力和防止神经元丢失中起重要作用的脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)和其受体络氨酸激酶B (Tyrosine kinase receptor, TrkB)表达的影响,从而探讨中药复方何首乌浸膏防治阿尔茨海默病的部分作用机理,为临床治疗AD提供治疗依据。 方法:将40只6月龄雄性SD大鼠随机分为:正常组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)、中药复方何首乌浸膏治疗组(D组)。模型组和中药组大鼠双侧海马注射p淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)造模,假手术组同法注射等体积生理盐水,正常组不作任何处理。并在造模后行Morris水迷宫试验(Morris water maze test, MWM)观察造模是否成功。检测后中药组予补肾活血化瘀祛痰开窍方复方何首乌浸膏浓缩液灌胃治疗8周,其他3组大鼠均予以等体积双蒸水对照灌胃,治疗后再次进行Morris水迷宫试验观察各组大鼠学习记忆能力的改变,最后断头处死大鼠取双侧海马组织,采用RT-PCR检测海马组织BDNF及其受体TrkB mRNA中的表达水平。 结果: 1.行为学检测结果 在隐匿平台搜索实验及空间探索实验中:造模后,与A组相比,C、D组学习记忆能力显著减退(逃避潜伏期延长、停留在平台象限时间和穿越隐匿平台位置的平均次数减少);经中药干预治疗后,与C组相比较,D组学习记忆能力明显增强(逃避潜伏期缩短、停留在平台象限时间和穿越隐匿平台位置的平均次数增加)。 2.RT-PCR结果 与A组相比较,C组BDNF及其受体TrkB mRNA和表达量明显降低(P0.05),B组则无统计学意义(P0.05);与C组比较, D组BDNF及其受体TrkB mRNA表达量均上调(P0.05)。 结论: 1.大鼠双侧海马区注射凝聚态的Aβ25-35可成功制备理想的AD模型。 2.补肾活血化瘀祛痰开窍复方何首乌浸膏可显著地提高AD模型大鼠的学习记忆能力。 3.AD模型大鼠脑内BDNF及其受体TrkB受体表达下调,可能为AD发病的部分机制。 4.复方何首乌浸膏可能是通过上调BDNF及其TrkB受体表达,从而起到了改善胆碱能神经系统,保护神经元等作用,实现其对AD的治疗。


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